臭牡丹提取物及其用于治疗气道高反应性疾病的用途制造技术

一种臭牡丹提取物及其用于治疗气道高反应性疾病的用途，由臭牡丹全株提取得到约占臭牡丹原药０．７％左右重量比的三萜类提取物，并研究证实臭牡丹中三萜类化合物可以减轻气道与肺泡病理改变、炎症反应及气道高反应，其效应接近糖皮质激素，有非常明显的降低气道高反应和减轻臭氧应激引起的气道与肺损伤的功能，是治疗气道高反应性疾病的有效部位，且未观察到臭牡丹总提物对外周血白细胞及肝肾毒性，安全性好。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种天然植物提取物的医药用途，特别涉及臭牡丹提取物及 其用于治疗气道高反应性疾病的用途。
技术介绍
气道高反应是一种常见的临床表现，主要见于支气管哮喘、慢性阻塞性 肺疾病、病毒性上呼吸道感染等急慢性呼吸道疾病。现一般认为气道高反应 的发病机制是气道炎症，故药物治疗手段主要是从抗炎和对症治疗两个方向 进行防治。目前常用的治疗气道高反应的药物有抗炎药物和支气管扩张剂两 类，抗炎药物中较肯定的有两类皮质类固醇及色甘酸钠尼多酸钠，其中吸 入性的皮质类固醇已成为治疗哮喘的一线药物；支气管扩张剂中常用的有氨茶碱、喘定。虽然这些药物可以治疗或缓解气道高反应，但不能解决病情反 复发作和阻断气道结构重塑与肺功能衰退进程等问题。同时，这些药物对人 体有着不同程度的副作用，且患者对这些药物的耐受性逐年增加。因此，从 天然植物中分离出具有对抗气道炎症与降低气道高反应，且毒副作用小的药 物成分，将有利于该类疾病的临床治疗，具有较大的社会效益。臭牡丹，学名C7eracfem/r腦6wgez'5te 英文名i ose G/o^Zjower, 科名马鞭草科K^&m^e^小灌木，广泛分布于华北、华南、西北及西南各 省，生于山坡、林缘或沟旁。其作为药用植物，早已被各民族广泛使用并积 累其丰富的药用经验，在传统医学中用于治疗痈疽，疔疮，乳腺炎，关节炎， 湿疹，头痛，牙痛等症。但目前关于其活性成分的研究非常少，且均未涉及 气道炎症或气道高反应疾病。
技术实现思路
本专利技术的目的在于从臭牡丹中提取出三萜类提取物，并研究得到该提取 物能用于治疗气道炎症或气道高反应疾病有显著疗效。本专利技术的另一 目的在于制备出含有臭牡丹三萜类提取物的各种药学可接 受形式的各种药物制剂。本专利技术通过下述方法从臭牡丹中提取出三萜类提取物将臭牡丹全株剪碎后加50wt。/。乙醇，置于82i:水浴锅内加热回流，提取回流液，浓縮蒸干，加双蒸水搅拌成混悬液，然后用石油醚萃取，分离弃去萃取液后再用氯仿萃取，回收氯仿萃取液，浓縮蒸干，得到占臭牡丹原药0.7%左右重量比的三砲 类提取物。专利技术人进一步研究证实，臭牡丹中三萜类化合物可以减轻臭氧攻击所造 成气道与肺泡病理改变、炎症反应及气道高反应，其效应接近糖皮质激素， 有非常明显的降低气道高反应和减轻臭氧应激引起的气道与肺损伤的功能， 是治疗气道高反应性疾病的有效部位，且未观察到臭牡丹总提物对外周血白 细胞及肝肾毒性，安全性好。按药剂学方法，将本专利技术臭牡丹提取物中的三萜类化合物制备成临床药 学上可接受的多种药物剂型作为治疗气道高反应性疾病的药剂，所说的药剂 包括目前任何一种药剂学上所说的剂型，包括口服制剂中气雾剂、口服液、 片剂、颗粒剂、微丸剂、胶囊剂中的任何一种。附图说明图l:臭牡丹三萜类提取物小鼠气道反应性曲线图(n=8);P<0.05vs正常对照组 # PO.05 vs模型组 图2:臭牡丹三萜类提取物小鼠乳酸脱氢酶(LDH)活性条形图(n=8);PO.05 vs 正常对照组 弁P<0.05 vs模型组 图3:各实验组小鼠肺脏病理切片图(HE X100); 图4:各实验组小鼠肺脏病理切片图(HE X400); 图5:各实验组小鼠肝病理切片图(HE X400)。 具体实施例方式实施例l:臭牡丹三萜类提取物的分离制备野生臭牡丹全株，洗净、晾干，称取100克，剪碎后加入2L圆底烧瓶中， 加50%乙醇1L;将圆底烧瓶置于82'C水浴锅内加热回流提取4小时，回收回 流液。然后再加lL50。/。乙醇，重复上述操作一次。然后合并提取液，倒入烧 杯中浓縮蒸干；再加双蒸水200ml，搅拌成混悬液；然后用200ml石油醚萃取 二次，分离弃去萃取液后再用氯仿200ml分二次萃取，回收氯仿萃取液。从 氯仿萃取液中取O.lml做其成分的预试检查，其余的浓縮蒸干，浓縮物称重， 约为0.7克。然后将浓縮物做成乳化剂，方法如下将浓縮物置于烧杯中，加植物油1.5克，置于75'C水浴锅中，不断搅拌使其充分熔化待用。另取一干净烧杯， 加阿拉伯胶0.375克，加双蒸水5ml，置于95'C水浴锅中，搅拌20分钟，然后冷却至70'C待用。然后把油相和水相两者混合起来，用乳钵研磨至无大颗 粒状态，然后再加双蒸水调至总体积为25ml，然后再用超声波粉碎5min。然 后置于密封的玻璃瓶中冷藏待用。药物成分的预试检查利用硅胶薄层板进行提取物的化学成分预试检查。 用毛细吸管吸少量上述提取物分别点样于三块硅胶薄层板然后在第一块薄层 板上喷洒香草醛-浓硫酸；在第二块薄层板上喷洒1%三氯化铁；在第三块薄 层板上喷洒碘化铋钾，观察颜色变化。提取物的鉴定结果见表l:表l:对提取物作薄层硅胶预试检査的结果<table>table see original document page 5</column></row><table>薄层硅胶预试检査是一种定性检验天然药物中成分的方法，其主要原理 是通过一些化学反应引起的颜色变化来鉴定药物的某一类别的存在。三萜类 物质经氯仿萃取后在香草醛-浓硫酸的作用下，生成橙色到蓝色物质，其颜色 深浅与三萜含量成正比，酚类物质能够与1%三氯化铁反应变成蓝、暗绿或蓝 紫色，生物碱能够与碘化铋钾反应而呈现桔红色或黄色。本实验所得提取物 只可与香草醛-浓硫酸发生反应变成深蓝色，说明含有大量的三萜类物质，无酚类和生物碱。实施例2:臭牡丹三萜类提取物对小鼠气道高反应模型的作用1. 动物分组及处理昆明小鼠50只，随机分成5组。给药方式为灌胃， 灌胃量为lml/100g体重。① 正常对照组每天用生理盐水灌胃一次，连续7天；② 臭牡丹三萜类对照组组每天用臭牡丹三萜类提取物乳化剂灌胃一次， 连续7天；③ 气道高反应模型组每天晚上用生理盐水灌胃，连续7天，灌胃第三 天开始每天下午用臭氧攻击20分钟，连续5天；④ 激素治疗组(阳性对照)每天晚上用0.5mg/ml的糖皮质激素灌胃，连 续7天，灌胃第三天开始每天下午用臭氧攻击20分钟，连续5天；⑤ 臭牡丹三萜类治疗组每天晚上用臭牡丹三萜类提取物乳化剂灌胃一次，连续7天，灌胃第三天开始每天下午用臭氧攻击20分钟，连续5天。2. 观察指标① 气道阻力(Buxco小动物肺功能检测系统)水合氯醛麻醉小鼠(剂量为0.3ml/100g)，然后切开小鼠气管，插管后连 接Buxco小动物肺功能检测系统，测量小鼠在基础状态下的气道阻力；然后 依次用0.39mg/ml， 0.78mg/ml， 1.56mg/ml和3.12mg/ml的乙酰甲胆碱(Mch) 激发，测量小鼠在这四种不同激发状态下的气道阻力，分别除以该只小鼠在 基础状态下的气道阻力值所得相对值即为气道阻力比值。以乙酰甲胆碱激发浓度为横坐标，气道阻力比值为纵坐标，绘制小鼠气 道反应性曲线。曲线的升高幅度越大，表示小鼠对Mch的反应越明显，气道 反应性越高。结果如附图1 (n=8)所示，模型组呈现明显的气道高反应，臭牡丹三萜 类提取物具有与激素类似的降低臭氧应激所导致的气道高反应的作用。臭牡 丹三萜类提取物单独作用对小鼠气道反应性无影响。② 支气管肺灌洗液(BALF)中的白细胞计数与分类 开胸结扎一侧肺并切取后用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种臭牡丹提取物，其特征在于由下述方法制备：臭牡丹全株剪碎后加５０％乙醇，置于８２℃水浴锅内加热回流，提取回流液，浓缩蒸干；加水搅拌成混悬液，然后用石油醚萃取，分离弃去萃取液后再用氯仿萃取，回收氯仿萃取液，浓缩蒸干，得到约占臭牡丹原药０．７％左右重量比的三萜类提取物。

【技术特征摘要】
1.一种臭牡丹提取物，其特征在于由下述方法制备臭牡丹全株剪碎后加50％乙醇，置于82℃水浴锅内加热回流，提取回流液，浓缩蒸干；加水搅拌成混悬液，然后用石油醚萃取，分离弃去萃取液后再用氯仿萃取，回收氯仿萃取液，浓缩蒸干，得到约...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦晓群，向阳，邓政，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：43[中国|湖南]