改进的α-干扰素多肽制造技术

本发明专利技术提供了改进的α－干扰素多肽及其偶联物，以及编码该多肽的核酸。本发明专利技术还包括包含这些多肽、偶联物和核酸的组合物；含有或表达该多肽、偶联物和核酸的细胞；制备该多肽、偶联物、核酸的方法；和使用该多肽、偶联物和核酸的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术一般地涉及多核苷酸及其编码的多肽、多肽的偶联物，以及载 体、细胞、抗体，和使用与生产该多核苷酸、多肽和偶联物的方法。
技术介绍
a-干扰素是种类繁多的细胞因子基因螺旋束超家族的成员(Sprang, S.R. et al. (1993) Curr. Opin. Struct. Biol. 3:815-827)。编码人a-千扰素的基因家族 由超过20个串联重复非等位基因和假基因组成，它们在氨基酸水平上有 85-98。/。的相似性(Henco， K. et al. (1985) J. Mol. Biol. 185:227—260)。表达活性 a-干扰素蛋白的基因可根据遗传座位分成13个家族。已知表达的人类a-干扰 素蛋白及其等位变化形式在下文中有列表Allen G. and Diaz M.O. (1996) J. Interferon and Cytokine Res. 16:181-184。a-干扰素可抑制各种类型的细胞增殖，尤其有用于治疗经常与癌症相关 的多种细胞增殖紊乱，特别是血液恶性病变如白血病。这些蛋白质对抗多 发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病、低度淋巴瘤、卡波西肉瘤、慢性骨髓 性白血病、肾细胞癌、膀胱肿瘤和卵巢癌显示有抗增殖活性(Bonnem,E.M. et al. (1984) J. Biol. Response Modifiers 3:580; Oldham, R.K. (1985) Hospital Practice 20:71)。a-干扰素还可用于对抗各种类型的病毒感染(Finter, N.B. et al. (1991) Drugs 42(5):749)。 a-干扰素具有抗人乳头瘤病毒感染、乙型肝炎和丙型肝炎 感染的活性(Finter, N.B. et al" 1991,见前文；Kashima, H. et al. (1988) Laryngoscope 98:334; Dusheiko, G.M. et al. (1986) J. Hematology 3 (Supple. 2):S199; Davis, GL et al. (1989) N. England J. Med. 321:1501)。干扰素和干扰素受体在某些自身免疫和炎症疾病发病机理中的作用也有研究(Benoit, P. et al, (1993) J. Immunol. 150(3):707)。尽管这些蛋白质在许多疾病的治疗中均具有治疗价值，但是尚未有人 将它们最优化以供用作药物。例如，对剂量造成限制的毒性、受体交叉反 应性、以及较短的血清半衰期，显著地降低了许多这类细胞因子的临床效 用(Dusheiko, G. (1997) Hepatology 26:112S—121S; Vial, T. and Descotes， J. (1994) Drug Experience 10:115—150; Funke， I. et al. (1994) Ann. Hematol. 68:49—52; Schomburg, A. et al. (1993) J. Cancer Res. Clin. Oncol. 119:745-755)。伴随着干扰素的施用产生多种严重的副作用，包括流行性感 冒样症状、疲劳、幻觉、发热、肝酶升高和白细胞减少(Pontzer， C.H. et al. (1991) Cancer Res. 51:5304; Oldham, 1985,见前文)。丙型肝炎病毒(HCV)是非宿主整合性RNA病毒，具有极高的复制率(rate ofreplication),因此具有高度的遗传多样性。已经鉴定了至少6种HCV RNA 基因型和超过30种亚型。HCV基因型已被证明是预测对IFN-a治疗的响应的 指标。已发现感染HCV基因型2和3的患者通常对干扰素治疗响应良好。感 染基因型4、 5和6的患者响应往往较差。感染HCV基因型1的患者对干扰素 治疗的响应往往非常差，其中大约50。/。的基因型l患者被归为IFN-a治疗"无 响应者"。基因型l是目前最普遍的丙型肝炎形式，美国患者的大约70%、欧 洲患者的50。/。是受其感染的。显然，对HCV感染特别是基因型1变型感染更 有效的治疗方法是人们亟需的。有遗传和生物化学证据表明，基因型l HCV(及其它亚型)通过抑制关键 的IFN响应蛋白，例如ds-RNA激活的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PKR,而积极 地减弱IFN-a的信号通路(Katze M.G., e a/. (2002) Nat. Rev. Immunol. 2(9):675-687)。上述遗传多样性和积极抑制抗病毒响应可能造成的一个结 果，就是HCV(特别是基因型1)具有逃逸宿主免疫监视的能力，从而导致较 高的慢性感染率。HCV广泛的遗传异质性具有重要的诊断和临床意义，它 可能为临床过程中的变化、疫苗难于开发和对治疗缺乏响应等问题提供解 释。本专利技术致力于解决对于表现更高的抗病毒和/或免疫调制效能的a-干扰 素分子的需求。本专利技术提供了新型a-干扰素多肽和多肽偶联物、编码这些多 肽的核酸，和使用这些分子的方法。这些分子可有益地用于多种用途，包7括例如，治疗和预防处理，尤其是用于病毒感染和与病毒感染相关的疾病 和病症的治疗和预防处理。本专利技术满足这些和其它的需要。专利技术概述本专利技术提供了新型多肽，包括它们的变体和包含这些多肽的融合蛋白。 本专利技术还提供了包含与一个或多个非多肽部分共价连接的本专利技术多肽的偶 联物。本专利技术还提供了编码本专利技术任何一种多肽的核酸，和包含这些核酸 的载体和宿主细胞。此外，本专利技术提供了制备和使用这些多肽、偶联物和 核酸的方法，以及通过进一步研究可以明了的其它特征。在一个方面中，本专利技术提供了分离或重组的多肽，该多肽包含标识为SEQ ID NO: 1 -SEQ ID NO:319之一的序列。本专利技术还提供了包含这些多肽之 中的任何多肽的融合蛋白和偶联物，编码这些多肽的核酸，以及制备和使 用这些多肽的方法。本专利技术还提供了分离或重组的多肽，它们各自包含如下所述的序列 该序列与选自SEQ ID NO: 1隱SEQ ID NO:319中的序列相比，在O-16个氨基酸 位置上不同，例如在0,2,3,4, 5，6, 7, 8, 9, 10， 11， 12, 13, 14， 15或16个氨基酸 位置上不同，例如在0-16个氨基酸位置上不同，在0-15个氨基酸位置不同， 在0-14个氨基酸位置上不同，在0-13个氨基酸位置上不同，在0-12个氨基酸 位置上不同，在0-ll个氨基酸位置上不同，在0-10个氨基酸位置上不同，在 0-9个氨基酸位置上不同，在0-8个氨基酸位置上不同，在0-7个氨基酸位置 上不同，在0-6个氨基酸位置上不.同，在0-5个氨基酸位置上不同，在0-4个 氨基酸位置上不同，在0-3个氨基酸位置上不同，在0-2个氨基酸位置上不同， 或在O-l个氨基酸位置上不同。某些这样的多肽包含如下所述的序列，该序 列与选自下组的序列相比在0到16个氨基酸位置上不同SEQ ID NO: 1 ， SEQ ID NO:2， SEQ ID NO:6， SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:9, SEQ ID N本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离或重组的多肽，该多肽包含与选自下组的序列在０－８个氨基酸位置上不同的序列，且该多肽表现抗病毒活性：ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３１２；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６２；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６６；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３２；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ： ８８；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９７；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１６７；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０７；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２０８；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９４；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４１；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４６；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７１；ＳＥＱ　ＩＤ 　ＮＯ：３１０；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７６；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８９；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９６；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４８；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１８；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１０；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：８７；ＳＥＱ　 ＩＤ　ＮＯ：１０３；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２３４；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１７９；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６０；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０６；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１４０；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２７； ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９３；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９５；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１９１；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２６３；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２９８；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２４；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５８；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ： １２４；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：７；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９；ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：３０３；和ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：马丹M佩邓加特，伊恩萨斯，托马斯布奎因，戴维林，泰迪陈，道格拉斯格普蒂尔，埃米布里迪厄安德森，史蒂文H巴斯，菲利普A帕滕，
申请(专利权)人：马克西根公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]