一种预防或治疗血栓性疾病的提取物制造技术

本发明专利技术提供一种预防或治疗血栓性疾病的提取物，具体地说，提供一种水蛭和／或地龙分子量不超过５８００道尔顿的提取物，以及它的制备方法、药物组合物、用途。本发明专利技术的提取物和现有的同类产品相比，在药物活性或治疗作用不被减弱的前提下，药物安全性被显著地提高。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种预防或治疗血栓性疾病的提取物，具体地说，涉及水蛭和/或地龙5800道尔顿以下分子量的提取物，以及其药物组合物、制备方法和用于制备预防或治疗血栓性疾病的药物的用途。
技术介绍
水蛭作为经典的破血逐淤药物，为中国药典所收载。中国药典收载的水蛭药材品种有三种，即水蛭科动物蚂蟥 Whitmania pigra Whitman、7jC蛭 Hirudo mpponica Whitman 或柳叶蚂蟥Whitmania ac-ranulata Whitman，其中作为药用主要品种为水蛭科动物蚂蟥 (ffhitmania pigra Whitman)。水蛭的主要成分为蛋白质、多肽、氨基酸、核酸、酶、糖类以及微量元素等。对水蛭中蛋白质、氨基酸、糖类及微量元素等成分的定性、定量研究已多有报道，主要方法为薄层色谱法、高效液相色谱法、电泳法等。其中小分子成分主要为次黄嘌呤、 黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷等，嘧啶和嘌呤均为含有N原子的不饱和的杂环化合物。地龙作为传统中药，具有清热定惊、通络、平喘、利尿之功效，为中国药典所收载。中国药典收载的地龙药材品种有四种，即钜蚓科动物参环毛顿Pheretima aspergillum(E. Perrier)、通俗环毛虫引 Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛虫引 Pheretima guillelmi (Michaelsen)或木节盲环毛虫引Pheretimapectinifera Michaelsen,其中作为药用主要品种为钜引科动物参环毛蚓(Pheretima aspergillum(E. Perrier))，习称广地龙。地龙的主要成分为蛋白质、氨基酸、核酸、酶、糖类等。对地龙中蛋白质、氨基酸等成分的定性、 定量研究已有报道。其中小分子成分主要为次黄嘌呤及含氮化合物。临床上使用的药品疏血通注射液，是由水蛭、地龙两味药材的水提取物作为药物活性成分的中药注射剂是一种高效速效的治疗心脑血管疾病的注射剂。中国专利申请 03148281. 3,200410101538. 8以及200510000266. 7分别公开了疏血通注射液及其制备过程，前述申请的全部内容，引入本申请作为参考。具有免疫原性的物质通常为大分子物质，相对分子量越大，免疫原性越强。而小分子多肽则免疫原性较弱或无免疫原性。抗原通常为大分子物质的可能原因是(1)抗原相对分子量越大，表面特殊化学基因(抗原决定簇)就越多，因而就越能有效地刺激免疫细胞，产生免疫应答；( 大分子抗原物质化学组成复杂、结构稳定，不易被破坏和清除，在体内停留时间较长，故可持续刺激免疫系统发生免疫应答。医药学上，通常将由51个氨基酸组成的人胰岛素(人胰岛素标准分子量为5800道尔顿)作为分界限，将分子量大于5800 道尔顿的物质统称为高分子量物质，在注射剂中受到严格的限量控制。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种预防或治疗血栓性疾病的提取物，具体地说，提供一种水蛭和/或地龙分子量5800道尔顿以下的提取物及其制备方法和用于制备药物的用途。相对于现有技术，本专利技术的提取物在临床上应用更加安全和放心。为实现上述专利技术目的，本专利技术的技术方案如下一种预防或治疗血栓性疾病的提取物，其以水蛭和/或地龙作为原料经提取而制成的，其特征在于所述提取物的分子量5800道尔顿(dalton)以下。上述所述的提取物，可以是水蛭的提取物、地龙的提取物或者水蛭和地龙混和在一起的提取物，其中，所述的水蛭和地龙混合在一起的提取物，可以是水蛭和地龙分别提取所得到的提取物混合后的提取物，也可以是水蛭和地龙混合在一起提取得到的提取物。并且，所述的水蛭，可以是水蛭科动物蚂蟥Whitmania pigra Whitman、水蛭 Hirudo mpponica Whitman 或柳叶虫马蟥 Whitmania ac-ranulataffhitman,所述的地龙，可以是钜蚓科动物参环毛蚓Pheretimaaspergillum (E. Perrier)、通俗环毛蚓 Pheretima vulgaris Chen、威廉环毛虫引Pheretima guillelmi (Michaelsen)或木节盲环毛虫引 Pheretima pectiniferaMichaelsen。其中，作为优选,水蛭为水蛭科动物蚂蟥(Whitmania pigraffhitman)的干品或鲜品，地龙为钜引科动物参环毛蚓(Pheretima aspergillum(E. Perrier))的干品或鲜品。本专利技术所述提取物可通过包含用截留分子量小于或等于6000道尔顿、优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤步骤的方法制备的。例如，本专利技术所述的原料通过用现有技术中常规方法制备得到的提取物(半成品或中间体)，用截留分子量小于或等于6000道尔顿、优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤，以得到分子量5800道尔顿以下的水蛭和/或地龙提取物。其中，作为优选，本专利技术所述的提取物是通过包含如下步骤的方法制备的(1)原料用注射用水或生理盐水洗净，低温浸渍，过滤，得到滤液和药渣；(2)药渣破碎后，与步骤(1)的滤液混合，形成勻浆，将勻浆反复冷冻和解融，离心分离，取上清液；(3)将步骤⑵所得上清液用截留分子量10000 100000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行超滤，得到透过液或滤液；(4)将步骤C3)所得透过液或滤液，用截留分子量小于或等于6000道尔顿、优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤。其中，如果需要，可以反复用截留分子量小于或等于6000道尔顿、优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤。并且，如果需要，还可以在过滤前进行热压处理，例如滤液在温度105 136°C热压10 45分钟处理。其中，作为优选，本专利技术所述的提取物是也可以通过包含如下步骤的方法制备的(1)原料用注射用水或生理盐水洗净，破碎形成勻浆，经反复冷冻和解融，离心分离，取上清液；(2)将步骤(1)所得上清液用截留分子量10000 100000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行超滤，得到透过液或滤液；(3)将步骤( 所得透过液或滤液用离子交换柱层析处理；(4)将步骤C3)所得洗脱液经脱盐处理后，用截留分子量小于或等于6000道尔顿、 优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤；或者将步骤(3)所得洗脱液用截留分子量小于或等于6000道尔顿、优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤后，进行脱盐处理。其中，如果需要，可以反复用截留分子量小于或等于6000道尔顿、优选截留分子量6000道尔顿的超滤膜或超滤柱进行过滤。超滤膜或超滤柱可以选用本
种常见的超滤膜或超滤柱，例如材质为聚砜材料的中空纤维超滤柱，切割分子量小于或等于6000道尔顿，优选切割分子量为6000道尔顿；以及粗滤时使用切割分子量10000 100000道尔顿的中空纤维超滤柱，优选为10000 道尔顿或50000道尔顿。上述所述的离子交换柱，可以为阳离子交换柱，也可以为阴离子交换柱。其中，阳离子交换柱例如选用CM-交联葡聚糖、CM-琼脂糖、CM-纤维素、SP-交联葡聚糖、SP-琼脂糖、SP-纤维素等；阴离子交换柱例如可选用DEAE-交联本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：李振国，
申请(专利权)人：李振国，
类型：发明
国别省市：23