本发明专利技术公开了丙酸睾酮作为构建精液异常动物模型的工具药的用途。本发明专利技术通过动物实验发现，体外注射丙酸睾丸酮可有效抑制实验动物的精子发生并降低精子的质量及活性，停止注射丙酸睾丸酮后，实验动物的精液常规（精子数量、质量及活性）均不能恢复，说明该过程是不可逆转的。实验结果表明，丙酸睾酮能作为构建精液异常动物模型的工具药，用以构建精液异常动物模型。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及丙酸睾酮的一种新用途，尤其涉及丙酸睾酮作为构建精液异常动物模 型的工具药的用途，属于丙酸睾酮的医药用途领域。
技术介绍
睾酮，又称睾丸素、睾丸酮或睾留酮，是一种类固醇荷尔蒙，由男性的睾丸或女性 的卵巢分泌，肾上腺亦分泌少量睾酮。它是主要的男性性激素及同化激素。不论是男性或女 性，它对健康及有着重要的影响，包括增强性欲、力量、免疫功能、对抗骨质疏松症等功效。 睾酮主要包括环戊丙酸睾酮、庚酸睾酮、乙炔睾酮、癸酸乙酸睾酮、甲基睾酮、苯乙酸睾酮、 丙酸睾酮和睾酮环丁酯等种类。引起男子不育症的原因很多，精液异常便是最常见的原因。为了验证临床各种治 疗药物的药效，需要构造精液异常的动物模型。C F Weinbauer等报道给动物注射睾酮环丁酯能够有效抑制精子的发生，但该过 程是可恢复性的，停药后精液常规恢复正常(CF Weinbauer et al. Testosterone-induced inhibiton of spermatogenesis is more closely related to suppression of FSH than to testicular androgen levels in the cynomolgus monkey model(Macaca fascicularis). Journal of Endocrinology (2001) 168, 25-38.) 崔毓桂等报道体外注射 庚酸睾酮能够使男性成为无精子症者或严重少精子症者，但停止注射庚酸睾酮后，受试者 能100%恢复精子的产生能力(崔毓桂.男性激素避孕的研究和应用.国际生殖健康/计 划生育杂志.2008年7月第27卷第4期)。现有的研究表明睾酮中的庚酸睾酮和睾酮环丁酯虽可抑制精子发生，但这个过程 是可恢复性的，停药后精液常规恢复正常，因而不能将其用作构建精液异常的动物模型的 工具药。迄今为止，尚无构建精液异常动物模型的相关报道。因此，迫切需要一种用于构建 精液异常的动物模型的工具药，以验证临床药物的治疗效果。
技术实现思路
本专利技术主要目的是提供一种用于构造精液异常的动物模型的工具药；本专利技术主要目的是通过以下技术方案来实现的本专利技术通过动物实验发现，体外注射丙酸睾丸酮可有效抑制实验动物的精子发生 及降低精子的质量或活性，停止注射丙酸睾丸酮后，实验动物的精液常规(精子数量、质量 及活性)均不能恢复，说明该过程是不可逆转的。本专利技术中所述的精液异常包括精子数量、质量或活性相比于正常的精液有明显 下降。实验结果表明，丙酸睾酮能作为构建精液异常动物模型的工具药，用以构建稳定 的精液异常动物模型。作为参考，所述的精液异常动物模型的构建包括向怀孕的雌鼠体外注射丙酸睾 丸酮，每天注射1次，连续注射2-5天；获取子代成年雄鼠，即得精液异常动物模型。更优选的，将怀孕16天的雌鼠给予颈背部皮下注射丙酸睾丸酮2. 5mg，每天注射1 次，连续注射3天；获取子代成年雄鼠，即得精液异常动物模型。本专利技术的一个构建稳定的精液异常动物模型的整体技术方案将孕16天的雌鼠随机分为A组和B组；A组的雌鼠给予颈背部皮下注射丙酸睾丸 酮2. 5mg，连续注射3天；B组的雌鼠给予颈背部皮下注射中性茶油2. 5mg，连续注射3天； 观察两组的产仔情况，A组产下的雄鼠为模型组，B组产下的雄鼠为对照组。分别饲养两组 产下的雄鼠，待其生长至成年为实验对象。对两组实验对象的精液常规进行分析或观察，实 验结果发现相比于对照组实验对象，模型组实验对象的精子密度、精子活率、a级运动、直 线速度、直线运动精子活率均有明显下降；模型组实验对象的睾丸形态与对照组实验对象 相比无明显变化。上述结果表明，用丙酸睾丸酮注射怀孕的雌鼠，所得到的成年子代雄鼠精液质量 出现异常或下降，且精液质量异常或下降的现象稳定、持续的显现，符合精液异常动物模型 的各项要求。附图说明图1模型组雄性大鼠与对照组雄性大鼠睾丸形态学观察；ABC为模型组睾丸形态， 分别在10 X，20 X，40 X光镜下观察；DEF为对照组睾丸形态，分别在10 X，20 X，40 X光镜 下观察。具体实施例方式下面结合具体实施例来进一步描述本专利技术，本专利技术的优点和特点将会随着描述而 更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本专利技术的范围构成任何限制。本领域技术 人员应该理解的是，在不偏离本专利技术的精神和范围下可以对本专利技术技术方案的细节和形式 进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本专利技术的保护范围内。实验例1、实验材料1.1实验动物Wistar大鼠，雌性10只，体重(250 士 20) g，雄性5只，体重(300 士 20) g，购自黑龙 江中医药大学动物实验中心。1. 2药物与试剂丙酸睾丸酮(购自天津金耀氨基酸有限公司)；吐温80(天津博迪化工有限公 司)；山羊抗鼠P450cl7抗体，(美国SAN2TA CRUZ公司)；辣根酶标记兔抗羊IgG(北京博 奥森生物技术有限公司)。1. 3主要仪器组织切片机，上海徕卡仪器设备公司产品；普通光学显微镜(CK2Z型)，日本 0LYM2PUS公司产品；电子精密天平(L Ibror AEL2200型)，日本Shimadzu产品。2、实验方法2. 1模型的建立将雌雄大鼠按2 1合笼，阴道涂片查找精子，找到精子则视为孕0天，对达到孕 16天的雌鼠给予颈背部皮下注射丙酸睾丸酮2. 5mg或等剂量的中性茶油对照。连续注射3 天，观察产仔情况，最后取所产下的雄鼠，生长至成年则为实验对象。2. 2动物分组从注射丙酸睾丸酮者所生子代雄鼠中随机选出10只为模型组，从注射中性茶油 者所生雄鼠中随机取10只为对照组。2. 3标本采集模型组与对照组大鼠长至成年后，禁食水12h，乙醚麻醉，眶静脉丛取血，室温放置 30分后，以lOOOOr/min离心20min，分离血清，_70°C保存待测。断颈处死，取一侧睾丸、附 睾称重，放入-70°C冻存，另一侧睾丸放入Bouin氏液中固定，附睾尾剪碎用以评估精子质量。2. 4观察指标及检测方法2. 4. 1精子质量评估取一侧附睾尾用眼科小剪剪碎，用;3mlPBS液稀释(无钙离子和镁离子的PBS液)， 使精子自由扩散，37°C孵育30min，用计算机辅助精子分析系统观察精子密度、精子活率、运动质量等。2. 4. 2睾丸组织学切片睾丸放入Bouin氏液中固定16h以上，睾丸组织脱水，透明，浸蜡，包埋，切片厚度 为0. 7mm, HE染色，在X 10、X 20、X40光镜下观察睾丸组织形态学变化。2. 4. 3统计学方法所有数据均运用SPSS 13. 0统计软件进行分析，采用两样本等方差t检验，以P <0. 05为有统计学意义。3实验结果3. 1精子质量评估模型组的精子密度、精子活率、精子a级运动、精子直线运动速度以及直线运动精 子活力均较对照组显著降低，有统计学意义。见表1。表IPNA雄性大鼠与对照组精子质量分析(n = 10，J ±s )权利要求1.丙酸睾酮作为构建精液异常动物模型的工具药的用途。2.按照权利要求1所述的用途，其特征在于，包括向怀孕的雌鼠体外注射丙酸睾丸 酮，每天注射1次，连续注射2-5天；获取子代成年雄鼠，即得精液异常动物模型。3.按照权利本文档来自技高网...
【技术保护点】
丙酸睾酮作为构建精液异常动物模型的工具药的用途。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴效科，马红丽，丛晶，李楠，
申请(专利权)人：吴效科，
类型：发明
国别省市：93[]
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