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具有杀虫活性的蛋白制造技术

技术编号:5485938 阅读:163 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开的有害有机体控制剂对于针对常规苏云金杆菌(Bt)杀虫剂获得耐药性的害虫是有效的,并且对于鞘翅目害虫、特别是白蜡窄吉丁(EAB)、花曲柳窄吉丁(鞘翅目:吉丁科)是有活性的。此外,本发明专利技术公开了能够产生毒性蛋白(Cry8Da)的微生物苏云金杆菌血清变型蜡螟SDS502菌株,所述毒性蛋白(Cry8Da)可以起到有害有机体控制剂的活性成分的作用以控制EAB。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及一般控制有害有机体,更具体地说,组成成分和方法,控制方法和白蜡 窄吉丁( ‘ ΑΒ的”),Agrilus曲柳窄吉丁。
技术介绍
苏云金杆菌(“Bt基因”)是一个孢子形成,杆状,革兰氏阳性菌密切相关,蜡样芽 胞杆菌。大量的Bt基因已被发现并分离到亚种,分组,如苏云金芽孢杆菌苏云金杆菌,苏云 金芽孢杆菌kurstaki,苏云金芽孢杆菌aizawai的基础上,分类计划最初由博纳富瓦,并在 1963年开发德巴尔雅克等。转Bt显然是从其他杆菌区别在于细胞内晶体s,这是不溶性的 蛋白生产中的存款,其中许多人对各种昆虫物种的杀虫活性。在芽孢形成过程中,综合了大 量转Bt —个或几个蛋白S的然后晶体利泽成各种形状的。转Bt基因为基础的昆虫icides制定与孢子S和转Bt发酵过程中产生的材料, 但主要的活性成分S是这些昆虫icidal蛋白晶体S作为第已知哭毒素哭了一个天然毒素 毒性后,两者均致命剂量摄入通路涉及的易感主机1)由适当的PH值在中肠晶体毒素原增 溶作用的结果;2)酶切割的毒素原分子在特定地点的活化形式的结果该毒素;3)活化毒素 分子受体结合具体的刷状缘膜,导致肠上皮细胞裂解;4)不可弥补的损害编队在肠道中肠 细菌进入血腔造成的;及5)死亡败血症(Knowles和埃拉尔1992年,鲍尔和潘克拉茨1992 年)。该基因编码的转Bt晶体蛋白被称为“哭,因为它的晶体-表型的生产”。第一次哭 基因,后来被指定哭生长素,克隆约由施奈夫和怀特利(1981年,国立。Natl。ACAD的。科 技。美国78个,2893年至2897年)20年前。从那时起,额外的cry基因的克隆许多报告已 经出版。即使在一转Bt生产菌株的晶体蛋白在昆虫s品种特性不同。大多数转Bt晶体生 产线昆虫icidal蛋白的角度衡量,鳞翅目物种活跃。此外,还有转Bt菌株产生晶体线昆虫 icidal蛋白活火山对双翅目和鞘翅目昆虫物种。截至1997年,约190Bt基因为基础的微生物昆虫icides登记在美国的某些鳞翅 目,双翅目控制和鞘翅目害虫fl (施奈夫等。1993年)。由于蛋白秒,转Bt的哭声基因用于 赋予昆虫抗性植物和微生物秒使用基因工程在转Bt晶体蛋白,Cry3,Cry7,Cry8,Cry9和Cry43已知的对鞘翅目物种活跃。 其中,CrySCa报道,对付圣甲虫甲虫活跃(大场等。,1992年,j的耳目一新。微生物。14, 54-57)。在2003年,浅野等人。(2003年,生物防治28 (2003),191-196)公布了一个新的转Bt菌株称为SDS502这显示了对鲳cuprea,甲侧柏,和非常高的水平弧丽金龟活动调查粳 稻,这是圣甲虫甲虫物种。体育粳稻,日本甲虫,是在美国特别重要的基因高山口 SDS502粳 稻活动负责已被隔离并命名crySDa。该基因编码的蛋白,CrySDa,发现有一高,对日本甲虫 的具体活动,至少高一倍作为CrySCa和Cry43Aa,另外两个转Bt晶体蛋白S与具体活动对 日本甲虫和其他金龟子杀虫活性。进一步资料SDS502,CrySDa,并CrySDa可能会发现在美 国专利号6962977',发出2005年11月8日,这是此纳入参考的全部。在昆虫害虫的,任何已知的杀虫活性哭了先前发现,白蜡窄吉丁(EAB的),花曲柳 窄吉丁(鞘翅目吉丁科),可能是其中最具破坏性的。在白蜡窄吉丁是蛀木虫,原产于中 国,日本,韩国,蒙古,俄罗斯远东地区,以及台湾(于1992年)。成虫从树上开始出现在5月底,在6月的高峰出现。在白蜡树叶完全刷新了这个 时候。EAB的成虫比较长寿命(在实验室2个月)和灰树木的树叶在其整个生命。他们的 日子大多是在花的檐篷,并要求饲养3周前的成熟开始产卵。有一些交错出现,因为EAB的 发展在一或两年,这取决于对虫害的下降阶段,由于灰卫生早在侵扰他们需要2年时间攻 击分行上层林冠削弱树。一旦冠下降是广泛的,他们攻击的主要干道和发展,是在一年内完 成。2002年,被确定为EAB的广泛灰(白蜡属的原因。)在密歇根州和东南部附近的 安大略省,加拿大死亡率。EAB的已造成约自其在北美(抵达Cappaert等2500万下密歇根 州白蜡树。2005年,波兰和麦卡洛2006年)。EAB的也蔓延到美国密歇根州上半岛,俄亥 俄,印第安纳州,马里兰州,弗吉尼亚州和伊利诺伊州。尽管州政府和联邦政府旨在遏制EAB的,缺乏有效的方法来检测EAB的遍布树木 和虫害面积隔离导致了监管机构从一个贫穷战略转变为管理1。在美国,EAB的根除努力涉 及所有在周围白蜡树(美国农业部动植物检疫局2006年)著名虫害的Vi英里区搬迁。到 被发现的感染和治疗时间,然而,EAB的了通常已经消灭这些外区分散。青铜桦木镗床,甲anxius,美国一个天然的EAB的相对已知传播在10至20英里 的速度,每一年,这已被视为一个EAB的'自然扩散率(估计2003年提出的联邦登记册)。 EAB的飞行和分散的格局最近的研究发现孕女性强制移民;一飞一女交配2公里,每天平均 在4天飞行近10公里(泰勒等人。2006年)。除了自然扩散,蔓延的EAB的是加速通过人 类辅助布满灰的木柴,木材,实木包装材料的运动,和苗木。这导致了 EAB的蔓延从密歇根 州的马里兰州和弗吉尼亚州在2003年;检疫遵守和执行仍然是一个问题。由于EAB的整个 北美,管理机构,土地管理者和公众传播正在寻求诸如微生物和生物控制的可持续管理工 具,以减少EAB的人口密度,减缓其传播(Cappaert等人。2005年,高2006年的报告,波兰 和麦卡洛2006年,BenDor等。2006年)。EAB的带来的风险,在北美灰资源是巨大的。对粉煤灰的60种,白蜡属。全世界已 知的16种天然到北美洲(哈克等人。2002年)。灰种北美特有的森林和已知的易受EAB 的包括白色灰(楼美洲),绿灰(楼permsylvanica),灰,黑(黑楼)树,是森林的重要组 成部分;布卢阿什(楼quadrangulata)和南瓜灰(陈大良号),这是不太常见的物种。有 越来越多的证据表明,EAB的攻击都将白蜡属。,虽然先天易感性的物种和品种而异(刘等 人。2003年),魏等人。2004年,Rebek等。2005年,刘等人。印刷中)。每个白蜡属。适应是在森林生态系统略有不同的栖息地。几个品种的不良的场所和潮湿的土壤排水宽容,保护环境敏感的沿岸地区;如灰黑色的纯林生长在沼泽和沼泽中, 他们提供浏览,热盖北部地区,保护野生动物,如鹿和驼鹿。在农业和防护林区,为牲畜提供 了至关重要的灰住房;例如约25年的北达科他州所有的树木%是白蜡属。年轻的白蜡树 的树皮,包括海狸,兔哺乳动物青睐食品,和豪猪;老树木提供诸如木材鸭,啄木鸟,山雀腔 筑巢鸟类的栖息地,和红胸币鸟;种子消耗鸭,歌曲和游戏鸟类,小型哺乳动物和昆虫第根 据最近美国农业部森林服务清单,有约80亿美元,其中美国的林地约6. 93亿美元在密歇根 州发生(美国农业部2006年财政司司长)白蜡树。截至2006年,经理们估计25密歇根 白蜡树万元屈服于EAB的。作者EAB的对林区生态环境的影响是难以量化或预测,虽然一 2. 6%的林地平均有白蜡树属植物。(美国农业部财政司司长2006年)。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种控制花曲柳窄吉丁(Agrilus planipennis Fairmaire)的方法,该方法包括:  使用对于花曲柳窄吉丁具有杀虫活性的组合物处理植物;  其中所述组合物包含苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)蛋白。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员:LS博尔JL利比斯
申请(专利权)人:美国农业部菲龙有限责任公司
类型:发明
国别省市:US[美国]

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