施用偶合物的方法技术

本发明专利技术涉及一种治疗宿主动物以消除致病细胞的方法。所述方法包括如下步骤：向所述宿主动物施用半抗原－载体偶合物；向所述宿主动物施用ＴＨ－１偏向佐剂；并且向所述宿主动物施用偶合至半抗原的配体，其中配体－半抗原偶合物在使用半抗原－载体偶合物的第一治疗周期中被施用。本发明专利技术还涉及相同的方法，其中半抗原－载体偶合物与ＴＨ－１偏向佐剂的重量比是从约１∶１０至约１∶１。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请根据美国法典第35编专利法第119(e)条要求在2007年11月15日提交的美国临时申请序列第61/003，212号、在2007年11月16日提交的第60/988,621号、在2007年11月28日提交的第60/990,815号和在2008年4月10日提交的第61/043,833号的权益，其中每个申请都通过引用被并入本文。专利
本专利技术涉及施用用于治疗由致病细胞(pathogenic cells)所致的疾病状态的配体偶合物(conjugate)的方法。更特别地，将定向的配体-免疫原偶合物施用于患病宿主以治疗疾病例如癌症、炎症以及由活化的免疫细胞所致的其他疾病。专利技术背景和简述哺乳动物免疫系统提供识别和消除肿瘤细胞和其他致病细胞的手段。虽然免疫系统通常提供坚强的防线，但是仍有许多情况下癌细胞和其他致病细胞避开了宿主免疫应答并保持了并发的宿主病原性。已经开发了化疗剂和放射疗法以消除复制的癌细胞。然而，大多数(如果不是所有的话)当前可得的化疗剂和放射疗法方案具有不利的副作用，因为它们不仅破坏癌细胞，而且它们还影响正常宿主细胞例如造血系统的细胞。此外，可发生对化疗剂的抵抗。癌细胞产生对化疗剂的抵抗的能力以及当前可得的抗癌药物的不利副作用强调了对于开发具有特异性和减少的宿主毒性的新的定向疗法的需要。本文所述的方法涉及通过增加宿主免疫系统对致病细胞群体的识别和应答来消除宿主中的此类细胞群体。实际上，增加了致病细胞的抗原性以增强内源性免疫应答介导的致病细胞消除。该方法包括施用配体-免疫原偶合物，其中所述配体能够在体内特异性结合至独一无二地表达、优先表达或过量表达配体结合部分的致病细胞群体，而且配体偶合的免疫原能够引发抗体产生或者能够被宿主动物中内源性或共同施用的外源性抗体所识别。免疫系统介导的致病细胞消除是由免疫原偶合的配体与受体、转运蛋白(transporter)或由致病细胞所独一无二地表达、过量表达或优先表达的其他表面呈递蛋白的结合指导的。由致病细胞所独一无二地表达、过量表达或优先表达的表面呈递蛋白是不存在或少量存在于非致病细胞上的受体，其提供选择性消除致病细胞的手段。至少一种另外的治疗因子例如免疫系统刺激剂、细胞杀伤剂、肿瘤穿透增强剂、化疗剂或细胞毒性免疫细胞可被共同施用于宿主细胞以增强治疗效力。在一个实施方案中，提供了治疗宿主动物以消除致病细胞的方法。所述方法包括如下步骤：向宿主动物施用半抗原-载体偶合物；向宿主动物施用TH-1偏向佐剂(TH-1 biasing adjuvant)，其中半抗原-载体偶合物与TH-1偏向佐剂的重量比是从约1∶10至约1∶1；并且向宿主动物施用偶合至半抗原的配体，其中配体-半抗原偶合物在施用半抗原-载体偶合物的第一周或者稍晚时间被施用，其中所述稍晚时间是在完成使用半抗原-载体偶合物的第一治疗周期之前。在另外的实施方案中，致病细胞是癌细胞，致病细胞是活化的免疫细胞，或者所述活化的免疫细胞是巨噬细胞或单核细胞。在另一个实施方案-->中，配体-半抗原偶合物是在施用半抗原-载体偶合物的第一、第二、第三或第四周被施用的。在又其他的实施方案中，配体是结合维生素受体的配体，所述配体选自由叶酸和其他结合叶酸(folate)受体的配体所组成的组，所述配体是具有只通过配体的谷氨酰基γ-羧基部分与所述半抗原共价连接的谷氨酰基部分的叶酸类似物，所述配体是具有只通过配体的谷氨酰基α-羧基部分与所述半抗原共价连接的谷氨酰基部分的叶酸类似物，或者所述配体是能够结合至受体的小有机分子，并且其中所述受体在所述致病细胞群体的表面上被优先表达、独一无二地表达或过量表达。在其他方面，半抗原是具有少于20,000道尔顿的分子量的有机分子，并且/或者所述有机分子选自由荧光素、硝基苯基(nitrophenyl)和多硝基苯基(polynitrophenyl)所组成的组。在其他说明性的方面，该方法还包括向宿主动物施用免疫刺激剂的步骤，所述免疫刺激剂是细胞因子，所述细胞因子包括IL-2、IL-12、IL-15或其组合，或者所述细胞因子包括与IFN-γ或IFN-α联合的IL-2、IL-12、IL-15或其组合。在其他实施方案中，以多次注射施用配体-半抗原偶合物的组合物，半抗原-载体偶合物的施用包括接种(vaccination)，并且/或者半抗原-载体偶合物与TH-1偏向佐剂的重量比是从约1∶8至约1∶1、约1∶6至约1∶1、约1∶4至约------1∶1、约1∶3至约1∶1，或者是约1∶3或约1∶2.5。在另一个说明性的实施方案中，佐剂是皂树皂甙，佐剂是修饰的皂甙佐剂，载体是钥孔形血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin)，或者半抗原-载体偶合物具有下式：其中KLH是钥孔形血蓝蛋白，而且配体-半抗原偶合物具有下式：或其药学上可接受的盐。在上述任一个实施方案中，提供了治疗宿主动物以消除致病细胞的方法，其中所述方法包括如下步骤：向宿主动物施用半抗原-载体偶合物，向宿主动物施用TH-1偏向佐剂，并且向宿主动物施用偶合至半抗原的配体，其中配体-半抗原偶合物在用半抗原-载体-->偶合物的第一治疗周期中被施用。附图简述图1显示测定结果，其中测量了使用叶酸-FITC的早期或晚期给药时注射了Bis-EDA-FITC和叶酸-FITC的小鼠的直肠温度。使用1μg剂量的KLH-FITC对小鼠预先免疫。图2显示使用叶酸-FITC的早期或晚期时给药注射了Bis-EDA-FITC和叶酸-FITC的小鼠的直肠温度。使用35μg剂量的KLH-FITC对小鼠预先免疫。图3显示使用叶酸-FITC的早期或晚期给药时的叶酸定向的免疫疗法对于具有乳腺肿瘤植入物的小鼠的存活的作用。使用35μg剂量的KLH-FITC对小鼠预先免疫。图4显示叶酸-FITC的示例性结构。图5显示KLH-FITC的示例性结构。图6显示KLH-FITC与叶酸-FITC相对比的给药方案。图7显示示例性的给药简图。图A：在第23天静脉内施用单剂的EC17。图B：在第8-12、15-19和22天用EC17的多次皮下给药对小鼠脱敏。图8显示被免疫的小鼠中抗FITC IgE抗体的产生。图9显示被免疫的豚鼠中的过敏反应测定。专利技术详述提供了对患有癌症或由活化的免疫细胞如巨噬细胞或单核细胞所致的疾病状态的宿主的治疗性治疗方法。该方法通过标记抗原性的致病细胞以导致宿主免疫系统对它们的识别和消除从而导致免疫应答介导的致病细胞消除的增强。该方法利用能够高亲结合至癌细胞或其他致病细胞例如活化的免疫细胞的配体-免疫原偶合物。所述配体-免疫原偶合物装饰致病细胞以使它们显示抗原性，并被宿主自身的免疫系统或被例如共同施用的抗体消除。该方法还可利用组合疗法，其通过使用配体-免疫原偶合物和能够刺激内源性免疫应答的另外的治疗因子(例如，免疫刺激剂，如细胞因子)而实现。本文所述方法被用来在含有致病细胞群体的宿主动物中增强内源性免疫应答介导的致病细胞群体消除。本专利技术适用于导致各种病状例如癌症和炎症的致病细胞群体。在各方面，致病细胞群体可以是致瘤性的癌细胞群体，包括良性肿瘤和恶性肿瘤，或者它可以是非致瘤性的。在其他实施方案中，癌细胞群体可自发地或通过例如存在于宿主动物种系中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗宿主动物以消除致病细胞的方法，所述方法包括如下步骤：向所述宿主动物施用半抗原－载体偶合物；向所述宿主动物施用Ｔ↓［Ｈ］－１偏向佐剂，其中半抗原－载体偶合物与Ｔ↓［Ｈ］－１偏向佐剂的重量比是从约１∶１０至约１∶１；并且向所述宿主动物施用偶合至半抗原的配体，其中配体－半抗原偶合物的施用在使用半抗原－载体偶合物的第一治疗周期中被启动。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-11-15 61/003,212;US 2007-11-16 60/988,621;1.一种治疗宿主动物以消除致病细胞的方法，所述方法包括如下步骤：向所述宿主动物施用半抗原-载体偶合物；向所述宿主动物施用TH-1偏向佐剂，其中半抗原-载体偶合物与TH-1偏向佐剂的重量比是从约1∶10至约1∶1；并且向所述宿主动物施用偶合至半抗原的配体，其中配体-半抗原偶合物的施用在使用半抗原-载体偶合物的第一治疗周期中被启动。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述致病细胞是癌细胞。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述致病细胞是活化的免疫细胞。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述活化的免疫细胞是巨噬细胞或单核细胞。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述配体-半抗原偶合物的施用在使用半抗原-载体偶合物的治疗的第一或第二周或者在稍晚时间被启动，其中所述稍晚时间是在完成使用半抗原-载体偶合物的第一治疗周期之前。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述配体是结合维生素受体的配体。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述配体选自由叶酸和其他结合叶酸受体的配体所组成的组。8.根据权利要求7所述的方法，其中所述配体是具有只通过配体的谷氨酰基γ-羧基部分与所述半抗原共价连接的谷氨酰基部分的叶酸类似物。9.根据权利要求7所述的方法，其中所述配体是具有只通过配体的谷氨酰基α-羧基部分与所述半抗原共价连接的谷氨酰基部分的叶酸类似物。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述配体是能够结合至受体的小有机分子，并且其中所述受体在所述致病细胞群体的表面上被优先表达、独一无二地表达或过量表达。11.根据权利要求1所述的方法，其中所述半抗原是具有少于20,000道尔顿的分子量的有机分子。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述有机分子选自由荧光素、硝基苯基和多硝基苯基所组成的组。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述聚硝基苯基是二硝基苯基或三硝基苯基。14.根据权利要求1所述的方法，还包括向所述宿主动物施用免疫刺激剂的步骤。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述免疫刺激剂是细胞因子。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞因子包括IL-2、IL-12、IL-15或其组合。17.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞因子包括与IFN-γ或IFN-α联合的IL-2、IL-12、IL-15或其组合。18.根据权利要求1所述的方法，其中所述配体-半抗原偶合物的组合物以多次注射施用。19.根据权利要求1所述的方法，其中所述半抗原-载体偶合物的施用包括接种。20.根据权利要求1所述的方法，其中半抗原-载体偶合物与TH-1偏向佐剂的重量比是从约1∶8至约1∶1。21.根据权利要求1所述的方法，其中半抗原-载体偶合物与TH-I偏向佐剂的重量比是从约1∶6至约1∶1。22.根据权利要求1所述的方法，其中半抗原-载体偶合物与TH-1偏向佐剂的重量比是从约1∶4至约1∶1。23.根据权利要求1所述的方法，其中半抗原-载体偶合物与TH-1偏向佐剂的重量比是从约1∶3至约1∶1。24.根据权利要求1所述的方法，其中半抗原-载体偶合物与...

【专利技术属性】
技术研发人员：CP利蒙，P罗纳德埃利斯，
申请(专利权)人：恩多塞特公司，
类型：发明
国别省市：US