本说明书公开了经修饰的梭菌毒素，含有这种毒素的组合物，以及使用这种经修饰的梭菌毒素和组合物治疗哺乳动物的慢性神经源性炎症的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利申请根据35U.S.C.§119(e)，要求以2007年10月23日提交的美国临时专利申请No.60/982,021、2008年6月27日提交的美国临时专利申请No.61/076,228和2008年9月10日提交的美国临时专利申请No.61/090,692作为优先权基础，上述临时申请的全部内容均以援引的方式纳入本文。梭菌毒素，例如肉毒神经毒素(BoNT)(BoNT/A、BoNT/B、BoNT/C1、BoNT/D、BoNT/E、BoNT/F和BoNT/G)以及破伤风神经毒素(TeNT)，它们抑制神经传递的能力已经被用于多种治疗和美容用途，参见例如，William J.Lipham，COSMETIC AND CLINICAL APPLICATIONSOF BOTULINUM TOXIN(Slack、Inc.，2004)。市售的梭菌毒素药物组合物包括：BoNT/A制剂，例如，(Allergan、Inc.，Irvine，CA)、(Beaufour Ipsen，Porton Down，England)、(Prollenium、Inc.，Ontario，Canada)、(Medy-Tox，Inc.，Ochang-myeon，South Korea)、BTX-A(Lanzhou Institute BiologicalProducts，China)和(Merz Pharmaceuticals，GmbH.，Frankfurt，Germany)；以及BoNT/B制剂，例如，MyoBlocTM/NeuroBlocTM(ElanPharmaceuticals，San Francisco，CA)。例如，目前已被一个或多个国家批准用于治疗下列适应症：弛缓不能、成人痉挛、肛裂、背痛、睑痉挛、磨牙症、子宫颈肌张力异常、特发性震颤、眉间皱纹或运动机能亢奋性脸部皱纹、头痛、半面痉挛、膀胱过度活动症、剧汗、青少年大脑麻痹、多发性硬化、肌阵挛障碍、鼻唇皱纹、痉挛性语言障碍、斜视和VII神经障碍。梭菌毒素疗法在多种适应症的治疗中获得成功。通常，患者对给予梭菌毒素治疗的耐受性良好。然而在某些应用中，给予毒素治疗可能是有争议的，因为要获得有益效果需要较大剂量。较大剂量会增加毒素通过间隙液体和循环系统(例如心血管系统和淋巴系统)的可能性，导致毒素不利地扩散到毒素治疗的非目标区域。这样的扩散会导致不良的副作用，例如，抑制在非治疗目标区域的神经元中的神经递质释放，或者非治疗目标区域的肌肉麻痹。例如，向患者颈部肌肉给予治疗有效量的BoNT/A来治疗斜颈时，可能会由于毒素扩散到口咽部而引发吞咽障碍。又例如，向患者的膀胱给予治疗有效量的BoNT/A来治疗膀胱过度活动症时可能会引发口干和/或干眼症。因此，仍然需要改进的梭菌毒素，所述改进的梭菌毒素应能够在治疗位置起作用，而在毒素治疗的非目标区域仅产生可忽略的或最小的影响。梭菌毒素疗法通过切断用于将神经递质分泌至突触间隙的胞吐过程，从而抑制神经递质的释放。对于制药工业来说，非常需要在梭菌毒素疗法目前的肌肉弛缓应用的基础上再进一步拓展其用途，以治疗与感觉神经相关的疾患，例如各种慢性疼痛、神经源性炎症和泌尿生殖器障碍，以及其他障碍，例如胰腺炎。目前被用来拓展基于梭菌毒素的疗法的一种方法涉及对梭菌毒素进行修饰，以使得所述经修饰的毒素对于非梭菌毒素靶细胞具有改变的细胞靶向能力。通过用一种对于非梭菌毒素靶细胞中存在的非梭菌毒素受体具有选择性结合活性的靶向结构域置换梭菌毒素中天然存在的靶向结构域，来获得上述改变的靶向能力。对靶向结构域这样的修饰可产生具有以下能力的经修饰的毒素，所述经修饰的毒素-->能够选择性地结合非梭菌毒素靶细胞中存在的非梭菌毒素受体(靶受体)(改变的靶向能力)。对非梭菌毒素靶细胞具有靶向活性的经修饰的梭菌毒素能够结合非梭菌毒素靶细胞上存在的受体，易位至细胞质中，并发挥其对于非梭菌毒素靶细胞中的SNARE复合物的蛋白水解作用。神经源性炎症涵盖一系列由复杂的生物过程介导的血管性和非血管性的炎性反应，所述生物过程导致炎性介质和致敏化合物从感觉神经元中局部释放。当受到有害刺激(例如病原体、细胞损伤或刺激物)的损伤时，炎症介导细胞(例如肥大细胞、免疫细胞、血管内皮细胞和血管平滑肌细胞)会释放炎症介导和致敏分子，例如，组胺、前列腺素、白三烯、5-羟色胺、中性蛋白酶、细胞因子、缓激肽和一氧化氮。参见Jennelle DurnettRichardson and Michael R.Vasko，Cellular Mechanisms of NeurogenicInflammation，302(3)J.Pharmacol.Exp.Ther.839-845(2002)，该文献的全部内容以援引的方式纳入本文。这些炎症介导和致敏分子作用于感觉神经元，从而刺激炎症诱导分子从周围神经末梢释放，所述炎症诱导分子例如，神经肽例如P物质(SP)和降血钙素基因相关肽(CGRP)、前列腺素，以及氨基酸例如谷氨酸。这些炎症诱导分子一旦被释放就会引发炎性反应，炎性反应的特征通常为水肿(血浆外渗而产生的肿胀)，过敏(由于某些感觉神经元的兴奋性改变而引起)，以及红斑(由于血管舒张而引起的发红和发热)，所述炎性反应可蔓延至刺激部位以外的范围(潮红应答)。Id.由于潜在的炎症症状是由初级感觉神经元的激活和随后的炎症诱导分子的释放而引发的，因此这种反应被称为神经源性炎症。通常，神经源性炎症是机体用于清除有害刺激物和启动受损组织愈合过程的一种保护性机制。这种急性神经源性炎症形成了维持组织完整性并有助于组织修复的第一道防线。事实上，如果没有急性神经源性炎症，损伤和感染将永远不会愈合，组织将不断被破坏从而危及机体的生命安全。然而，严重的或长时间的有害刺激会导致慢性神经源性炎性反应，这种慢性神经源性炎性反应反而会引发损伤而不是帮助修复。这种慢性神经源性炎症与多种人类疾病中存在的许多看似不相关的障碍的病理生理学都有着千丝万缕的联系。治疗慢性神经源性炎症的尝试仅取得了有限的成功。这其中一部分的原因是慢性神经源性炎症的病因学是一个复杂的应答过程，它部分地基于似乎通过多种机制引发炎症的各种炎症诱导分子以及大量炎症介导和致敏分子。参见Richardson & Vasko，302(3)J.Pharmacol.Exp.Ther.839-845(2002)。因此，非常需要能够防止炎症诱导分子从感觉神经元慢性释放从而用于治疗慢性神经源性炎症的化合物和方法。本申请说明书公开了用于治疗患有慢性神经源性炎症的个体的经修饰的梭菌毒素组合物和方法。这一目的通过向需要该治疗的个体给予治疗有效量的含有经修饰的梭菌毒素的组合物而实现。本文公开的方法提供了一种用于治疗慢性神经源性炎症并且基于门诊患者的安全、低廉的方法。因此，本专利技术的一个方面提供了一种含有经修饰的梭菌毒素的组合物，所述经修饰的梭菌毒素包括阿片样肽结合结构域、梭菌毒素易位结构域和梭菌毒素酶促结构域。可用于开发这类组合物的经修饰的梭菌毒素记载于例如下列文献：Steward，L.E.et al.，Modified Clostridial Toxins withEnhanced T本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种治疗哺乳动物的慢性神经源性炎症的方法，所述方法包括给予需要该治疗的哺乳动物治疗有效量的含有经修饰的梭菌毒素的组合物的步骤，所述梭菌毒素包括阿片样肽结合结构域、梭菌毒素易位结构域和梭菌毒素酶促结构域，其中给予所述组合物可减少炎症诱导分子的释放，由此减轻慢性神经源性炎症相关的症状。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-10-23 60/982,021;US 2008-6-27 61/076,228;U1.一种治疗哺乳动物的慢性神经源性炎症的方法，所述方法包括给予需要该治疗的哺乳动物治疗有效量的含有经修饰的梭菌毒素的组合物的步骤，所述梭菌毒素包括阿片样肽结合结构域、梭菌毒素易位结构域和梭菌毒素酶促结构域，其中给予所述组合物可减少炎症诱导分子的释放，由此减轻慢性神经源性炎症相关的症状。2.权利要求1的方法，其中所述经修饰的梭菌毒素包括如下的氨基端至羧基端线性单链多肽结构顺序：1)梭菌毒素酶促结构域、梭菌毒素易位结构域、阿片样肽结合结构域；2)梭菌毒素酶促结构域、阿片样肽结合结构域、梭菌毒素易位结构域；3)阿片样肽结合结构域、梭菌毒素易位结构域和梭菌毒素酶促结构域；4)阿片样肽结合结构域、梭菌毒素酶促结构域、梭菌毒素易位结构域；5)梭菌毒素易位结构域、梭菌毒素酶促结构域和阿片样肽结合结构域；或6)梭菌毒素易位结构域、阿片样肽结合结构域和梭菌毒素酶促结构域。3.权利要求1的方法，其中所述阿片样肽结合结构域为脑啡肽、BAM22肽、内啡素、内啡肽、强啡肽、伤害感受肽或血啡肽。4.权利要求1的方法，其中所述梭菌毒素易位结构域为：BoNT/A易位结构域、BoNT/B易位结构域、BoNT/C1易位结构域、BoNT/D易位结构域、BoNT/E易位结构域、BoNT/F易位结构域、BoNT/G易位结构域、TeNT易位结构域、BaNT易位结构域或BuNT易位结构域。5.权利要求1的方法，其中所述梭菌毒素酶促结构域为：BoNT/A酶促结构域、BoNT/B酶促结构域、BoNT/C1酶促结构域、BoNT/D酶促结构域、BoNT/E酶促结构域、BoNT/F酶促结构域、BoNT/G酶促结构域、TeNT酶促结构域、BaNT酶促结构域或BuNT酶促结构域。6.一种治疗哺乳动物的慢性神经源性炎症的方法，所述方法包括给予需要该治疗的哺乳动物治疗有效量的含有经修饰的梭菌毒素的组合物的步骤，所述梭菌毒素包括阿片样肽结合结构域、梭菌毒素易位结构域、梭菌毒素酶促结构域和外源性蛋白酶切割位点，其中给予所述组合物可减少炎症诱导分子的释放，由此减轻慢性神经源性炎症相关的症状。7.权利要求6的方法，其中所述经修饰的梭菌毒素包括如下的氨基端至羧基端线性单链多肽结构顺序：1)梭菌毒素酶促结构域、外源性蛋白酶切割位点、梭菌毒素易位结构域、...
【专利技术属性】
技术研发人员：KR奥基，J弗朗西斯，
申请(专利权)人：阿勒根公司，
类型：发明
国别省市：US
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