【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及具有乙酰木聚糖酯酶活性的分离的多肽和编码该多肽的分离的多核 苷酸。本专利技术还涉及包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞,以及产生和使用所 述多肽的方法。相关技术描述植物细胞壁多糖构成植物细胞壁的90%并且能够分成以下三组纤维素、半纤维 素和果胶。纤维素是细胞壁多糖的主要成分。半纤维素是植物细胞壁中第二丰富的成分。 主要的半纤维素聚合物是木聚糖。植物细胞壁中发现的木聚糖的结构取决于它们的来源可 能差异显著,但是它们始终含有β-1,4-连接的D-木糖主链。β-1,4-连接的D-木糖主链 能够用多个侧基取代,所述侧基如L-阿拉伯糖(L-aribinose)、D-半乳糖、乙酰基、阿魏酰 基(feruloyl)、对-香豆酰基(p-coumaroyl)和葡糖醛酸残基。木聚糖主链的生物降解依赖于两类酶内切木聚糖酶和β-木糖苷酶。内切木聚 糖酶(EC 3. 2. 1. 8)将木聚糖主链切割成较小的寡糖,这些寡糖能够进一步通过β _木糖苷 酶(EC 3.2.1.37)降解成木糖。木聚糖的降解中涉及的其它酶包括,例如,乙酰木聚糖酯 酶、阿拉伯糖酶、α “葡糖醛酸糖苷酶、阿魏酸酯酶和对_香豆酸酯酶。乙酰木聚糖酯酶(EC 3. 1. 1. 6)从乙酰木聚糖的β -D-吡喃木糖基残基 (β-D-xylopyranosyl residue)上的2位和/或3位去除0_乙酰基。乙酰木聚糖在木 聚糖的水解中发挥重要作用,因为所述乙酰侧基能够在空间上干扰切割主链的酶的接近。 乙酰侧基的去除促进内切木聚糖酶的作用。基于序列相似性的糖酯酶分类体系产生了对 13个家族的 ...
【技术保护点】
具有乙酰木聚糖酯酶活性的分离的多肽,其选自下组:(a)多肽,其包含与SEQIDNO:2的成熟多肽具有优选至少80%,更优选至少85%,甚至更优选至少90%,并且最优选至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%同一性的氨基酸序列;(b)由如下多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸在优选至少高严紧条件下与以下杂交:(i)SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列,(ii)包含SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;(c)由如下多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸包含与SEQIDNO:1的成熟多肽编码序列具有优选至少85%,更优选至少90%,并且最优选至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,或至少99%同一性的核苷酸序列;和(d)变体,其包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的SEQIDNO:2的成熟多肽。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-9-28 60/976,152具有乙酰木聚糖酯酶活性的分离的多肽,其选自下组(a)多肽,其包含与SEQ ID NO2的成熟多肽具有优选至少80%,更优选至少85%,甚至更优选至少90%,并且最优选至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%同一性的氨基酸序列;(b)由如下多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸在优选至少高严紧条件下与以下杂交(i)SEQ ID NO1的成熟多肽编码序列,(ii)包含SEQ ID NO1的成熟多肽编码序列的基因组DNA序列,或(iii)(i)或(ii)的全长互补链;(c)由如下多核苷酸编码的多肽,所述多核苷酸包含与SEQ ID NO1的成熟多肽编码序列具有优选至少85%,更优选至少90%,并且最优选至少95%,至少96%,至少97%,至少98%,或至少99%同一性的核苷酸序列;和(d)变体,其包含取代、缺失和/或插入一个或多个(几个)氨基酸的SEQID NO2的成熟多肽。2.权利要求1的多肽,其包含或其组成为SEQID NO 2的氨基酸序列;或其具有乙酰 木聚糖酯酶活性的片段。3.权利要求1的多肽,其由如下多核苷酸编码,所述多核苷酸包含或其组成为SEQID NO 1的核苷酸序列或其编码具有乙酰木聚糖酯酶活性的片段的亚序列。4.权利要求1的多肽,其由大肠杆菌NRRLB-50067中所含质粒pTterAXe2A中含有的 多核苷酸编码。5.分离的多核苷酸,其包含编码权利要求1-4中任一项的多肽的核苷酸序列。6.核酸构建体,其包含权利要求5的多核苷酸,该多核苷酸与指导所述多肽在表达宿 主中产生的一个或多个调控序列可操作地连接。7.重组宿主细胞,其包含权利要求6的核酸构建体。8.产生权利要求1-4中任一项的多肽的方法,包括(a)在有益于产生所述多肽的条件 下培养细胞,所述细胞以其野生型形式产生所述多肽;和(...
【专利技术属性】
技术研发人员:艾尔弗雷多洛佩斯德利昂,丁晗澍,
申请(专利权)人:诺维信公司,
类型:发明
国别省市:DK
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