一种大豆苷元衍生物及其制备方法和应用技术

一种大豆苷元衍生物及其制备方法和应用。涉及大豆苷元，提供一种大豆苷元衍生物，其为黄色胶状，化学名为３′，８－二烯丙基－４′，７－二羟基异黄酮，分子量为３３４．１。利用克莱森重排反应，可方便、快速地制备出一种大豆苷元衍生物，制备方法简单，所用原料价格价廉，可广泛应用于工业生产中。３′，８－二烯丙基－４′，７－二羟基异黄酮具有与大豆苷元相似的结构特征，但其抗肿瘤活性与大豆苷元相比明显的提高。可显著地抑制肿瘤细胞的生长，可在制备抗肿瘤药物上具有广泛的应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种化合物，特别涉及一种大豆苷元衍生物及其制备方法和应用。
技术介绍
大豆苷元的化学结构式为：大豆苷元(4′，7-二羟基异黄酮，daidzein)，又称葛根黄豆苷元、大豆黄酮、黄豆苷元或大豆素，为一种异黄酮类化合物。主要存在于豆科植物如大豆、葛根中，尤其在发酵豆制品中具有较高的含量。大豆苷元的来源十分丰富，药理作用广泛，具有广阔的应用前景，具有广泛的药理活性如抗肿瘤、抗氧化，此外在心脑系统的作用也十分明显(Foti，P，Erba，D，Riso，P.et al.Arch Biochem Biophys(2005)433：421-427)。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种大豆苷元衍生物。本专利技术的第二目的在于提供一种大豆苷元衍生物的制备方法。本专利技术的第三目的在于提供一种大豆苷元衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述一种大豆苷元衍生物的化学名为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮，分子量为334.1，结构式为：所述大豆苷元衍生物呈黄色胶状。所述一种大豆苷元衍生物的制备方法包括以下步骤：1)在氮气保护下，将大豆苷元和无水碳酸钾加入到有机溶剂中得溶液A；将烯丙基溴加入有机溶剂中得溶液B，再将溶液B加入溶液A中进行反应，反应结束即得混合溶液；2)将步骤1)所得混合溶液过滤，滤液减压浓缩，将浓缩的剩余物进行硅胶柱层析分离，即得中间产物4′，7-二烯丙氧基异黄酮；3)将步骤2)所得的中间产物4′，7-二烯丙氧基异黄酮重排反应，将反应产物进-->行柱层析分离，即得3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮。在步骤1)中，所述有机溶剂可为二甲基甲酰胺或丙酮等，所述溶液A中大豆苷元的摩尔浓度可为0.1～1.0mmol/L，无水碳酸钾的摩尔浓度可为0.2～2.0mmol/L，所述溶液B中烯丙基溴的摩尔浓度可为为0.2～2.0mmol/L；所述反应的条件：温度可为20～28℃，时间可为16～20h，搅拌速率可为100～400rpm。在步骤2)中，所述胶柱层析的硅胶可为200～400目。在步骤3)中，所述重排反应的条件为：温度160～200℃，时间4～6h。本专利技术利用克莱森重排反应，方便、快速地制备出一种大豆苷元衍生物，制备方法简单，所用原料价格价廉，可广泛应用于工业生产中。本专利技术中的3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮具有与大豆苷元相似的结构特征，但其抗肿瘤活性与大豆苷元相比明显的提高。可显著地抑制鼻咽癌CNE2细胞、人宫颈癌细HeLa细胞、人纤维肉瘤HT1080细胞和人肝癌Bel-7402细胞的生长，可在制备抗肿瘤药物上具有广泛的应用。附图说明图1为大豆苷元和3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮的抗鼻咽癌CNE2细胞增殖活性对比图。在图1中，横坐标为药物浓度(μmol/L)，纵坐标为抑制率(％)，其中a为大豆苷元，b为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮。图2为大豆苷元和3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮的抗人纤维肉瘤HT 1080细胞增殖活性对比图。在图2中，横坐标为药物浓度(μmol/L)，纵坐标为抑制率(％)，其中a为大豆苷元，b为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮。图3为大豆苷元和3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮的抗人宫颈癌HeLa细胞增殖活性对比图。在图3中，横坐标为药物浓度(μmol/L)，纵坐标为抑制率(％)，其中a为大豆苷元，b为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮。图4为大豆苷元和3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮的抗人肝癌Bel-7402细胞增殖活性对比图。在图4中，横坐标为药物浓度(μmol/L)，纵坐标为抑制率(％)，其中a为大豆苷元，b为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮。具体实施方式实施例11)在氮气保护下，将大豆苷元2.54g和无水碳酸钾2.76g加入到30mL无水丙酮中，搅拌0.5h得乳白色浑浊液。2)将30mL含有2.4g烯丙基溴的无水丙酮溶液慢慢滴加至上述反应液，0.5h加完，氮气保护下搅拌过夜。3)过滤除去不溶物，减压除去滤液。将浓缩的剩余物进行硅胶柱层析分离，V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝10∶1作为洗脱剂，得到中间产物4′，7-二烯丙氧基异黄酮2.61g，黄色片状固体，产率78.1％。4)将该中间产物装入封管，氮气保护下，200℃重排。5h后，监测反应至观测不到原料点为止，停止反应。待封管冷却至室温后，将反应剩余物进行硅胶柱层析分离，V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝5∶1作为洗脱剂，得到目标产物3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟-->基异黄酮1.27g，黄色胶状，产率48.7％。产物用质谱鉴定。大豆苷元购买自宝鸡辰光生物科技有限公司。1H-NMR，13C-NMR由Bruker av400超导核磁共振仪上测定，以TMS为内标在氘代有机溶剂中测得。质谱系使用Applied Biosystems3200Q TRAP LC/MS/MS System四极杆质谱仪测得。红外在红外吸收光谱仪Nicolet Avatar360上测得。酶标仪使用Bio-Rad公司的产品。以下给出测试结果：3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮的波谱数据为：IR(film)：3326，1621，1507，1436，1277，1120，1021，914，824，797，685cm-1。1H NMR(DMSO-d6)，δ3.30(d，J＝6.6Hz，2H)，3.50(d，J＝6.1Hz，2H)，4.95(dd，J＝12.0Hz，2.0Hz，1H)，4.99(m，2H)，5.06(dd，J＝16.0Hz，1.9Hz，1H)，5.95(m，2H)，6.83(d，J＝8.3Hz，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz，1H)，7.22(dd，J＝8.0Hz，2.2Hz，1H)，7.25(d，J＝2.2Hz，1H)，7.86(d，J＝8.8Hz，1H)，8.29(s，1H)，9.53(s，1H)，10.73(s，1H)。13C NMR(DMSO-d6)：26.49，33.82，112.73，114.10，114.55，115.14，115.38，116.67，122.56，123.22，124.54，125.60，127.65，130.32，135.28，136.92，152.76，154.72，155.26，159.76，175.03。MS-ESI，m/z 333.2[M-H]-。所制得的产物为一种大豆苷元衍生物，呈黄色胶状，其化学名为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮，分子量为334.1，结构式为：实施例2本专利技术对3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮的抗肿瘤活性进行研究，发现均具有明显的抗肿瘤活性。所研究的肿瘤细胞株包括鼻咽癌CNE2细胞、人纤维肉瘤HT 1080细胞、人宫颈癌HeLa细胞和人肝癌Bel-7402细胞。取对数生长期的肿瘤细胞制成单细胞悬液，按每孔1×104个细胞接种于3个96孔板中，置于37℃、含5％CO2饱和湿度的细胞培养箱中培养24h，待细胞贴壁生长融合至80％时，分别加入终浓度为6.25、12.5、25、50、100、200μmol/L的2-烯丙基-5-[(E)-2-(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆苷元衍生物，其特征在于其化学名为３′，８－二烯丙基－４′，７－二羟基异黄酮，分子量为３３４．１，结构式为：＊＊＊。

【技术特征摘要】
1.一种大豆苷元衍生物，其特征在于其化学名为3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮，分子量为334.1，结构式为：2.如权利要求1所述的一种大豆苷元衍生物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)在氮气保护下，将大豆苷元和无水碳酸钾加入到有机溶剂中得溶液A；将烯丙基溴加入有机溶剂中得溶液B，再将溶液B加入溶液A中进行反应，反应结束即得混合溶液；2)将步骤1)所得混合溶液过滤，滤液减压浓缩，将浓缩的剩余物进行硅胶柱层析分离，即得中间产物4′，7-二烯丙氧基异黄酮；3)将步骤2所得的中间产物4′，7-二烯丙氧基异黄酮重排反应，将反应产物进行柱层析分离，即得3′，8-二烯丙基-4′，7-二羟基异黄酮。3.如权利要求2所述的一种大豆苷元衍生物的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述有机溶剂为二甲基甲酰胺或丙酮。4.如权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴振，陈超，丘鹰昆，薛识，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：92[]