涉及ZPA多肽的方法和组合物技术

本发明专利技术提供了ＺＰＡ多肽，与ＺＰＡ多肽相关的抗体、核酸分子、拮抗剂、激动剂、增效剂和组合物，以及鉴定、制备和使用它们的方法，这些可用于治疗和预防疾病，以及医学诊断和研究。本发明专利技术还为内在凋亡途径提供了模型系统。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】涉及ZPA多肽的方法和组合物 专利
本专利技术致力于ZPA多肽，与ZPA多肽相关的抗体、核酸分子、拮抗剂、 激动剂和组合物，以及制备和使用它们的方法，包括用于诊断和治疗哺乳动 物中的凋亡相关病症的方法。本专利技术还致力于内在凋亡途径的模型系统。
技术介绍
不受控制的细胞生长是多种细胞类型中许多疾病的原因。例如，当衍生 自正常组织的异常性或赘生性的细胞(它们增殖形成肿瘤块)的数目增加时 即发生癌。肿瘤细胞常常侵入邻近组织，而且能经由称为转移的过程通过血 液或淋巴系统扩散至局部淋巴结和较远的部位。在癌性生长中，细胞在正常 细胞不会生长的条件下增殖。癌本身表现为极其多种形式，以不同程度的4曼 入性和攻击性为特征。恶性肿瘤(癌)是美国第二位死因，仅次于心脏病 (Boring等，CA Cancel J. Clin. 43: 7 (1993))。已经有许多研究致力于发现细胞增殖性病症(诸如癌)的新治疗方法。 尽管有最新的进展，但是非常需要鉴定和理解调控细胞增殖的新细胞靶物的 功能，也非常需要开发备选的或更多的有效治疗方法以及治疗剂和诊断剂。 还需要开发备选的疗法和方法用于治疗特定细胞类型和用于治疗由异常细 胞增殖引起的或与之相关的疾病，诸如癌。开发抗癌疗法的一种方法是研究 凋亡机制，其也称为程序性细胞死亡。对决定细胞命运的凋亡机制的有力控制是生物体发育、体内稳态和细胞 损伤应答所需要的。此类途径的失调常常导致严重的疾病。例如，许多癌选 择性抑制促凋亡途径和/或增强促存活途径，从而规避宿主以调节生长为意图 的应答(Kirkin等，Biochim Biophys Acta 1644(2-3): 229-249 (2004); LeBlanc等, Nature Med. 8: 2 274-281 (2002); Cory和Adams, Trends Biochem. Sci. 26: 61-66 (2001))。因此，了解和治疗多种疾病，包括癌症、自身免疫性疾病和 变性病症，必需了解凋亡(Strasser, Nat. Rev. Immunol. 5: 189-200 (2005); Strasser等,Biochim Biophys Acta 1333: F151-178 (1997》。7已经描述了哺乳动物中的两种凋亡信号传导途径(Anderson等，Nat. Rev. Drug Discov. 4(5): 399-409 (2005)):外在途径(extrinsic pathway),通常由TNF 家族的死亡诱导性配体起始；和内在途径(intrinsic pathway),其主要响应于 由Bcl-2家族介导的胞内刺激(Strasser等，Nat. Rev. Imm. 5: 189-200 (2005); Bomer， Mol. Immunol. 39: 615-647 (2003))，但是也由外在途径的组分激活。Bcl-2蛋白的特征在于四个独特的a-螺旋序列基序，称为Bcl-2同源性(BH) 结构域BH1-BH4。在有些情况中，Bcl-2蛋白还具有使它们定位至线粒体外 膜、核被膜或内质网三者的胞质面的C-末端跨膜区(Borner， Mol. Immunol. 39: 615-647 (2003))。 Bcl-2蛋白家族成员可以分为三组(i)促存活Bcl-2样蛋白 (例如Bcl-2、 Bc1-xl、 Bcl-w、 Mcl-l、 Al/Bfl-1、 NR-13、 BHRF1、 LMW5-HL、 ORF16、 v-Bcl-2(KSHV)、 E1B-19K、 CED陽9、 Boo/DIVA/Bcl2-L画10和Bcl-B ); (ii)促凋亡多结构域蛋白(例如Bax、 Bak、 Bok/Mtd和Bcl-xs);和(iii)仅含 BH3的促凋亡蛋白(例如Bik/Nbk、 Blk、 Hrk/DP5、 BNip3、 BimL/Bod、 Bad、 Bid、 EGL-1、 Noxa、 Puma/Bbc3和Bmf)(出处同前)。大多数促存活成员含 有所有四种BH结构域，而大多数多结构域促凋亡蛋白缺乏BH4结构域。在未受刺激的细胞中，促存活和促凋亡多结构域家族成员之间的相互作 用阻止Bax样蛋白在线粒体膜上寡聚化，并且阻止其起始凋亡程序。在受到 刺激后，仅含BH3的蛋白通过与促存活蛋白二聚化而减轻对Bax样蛋白的抑 制，这释》文促凋亡多结构域蛋白来中和(compromise)线粒体膜电位并起始凋 亡。先前的实验已经证明Bcl-2家族的数个成员对于正常发育至关重要 (Lindsten等，Mol. Cell. 6: 1389-1399 (2000); Motoyama等，Science 267: 1506-1510 (1995); Veis等，Cell 75: 229-240 (1993); Rinkenberger等,Genes Dev. 14:23-27(2000))。然而，该蛋白家族在发育过程中的功能大部分是未知的 即使在具有显著发育效应的Bcl-2相关基因敲除中，起始性凋亡信号和响应于 该信号而激活的仅含BH3的蛋白也都是未知的。通过与Bcl-2的序列相似性，已经在脊推动物中鉴定出Bcl-2家族的许多 新成员，Bcl-2是该家族中以其在B细胞淋巴瘤中的作用来命名的齐名成员 (eponymous member) (Tsujimoto等，Science 228: 1440-1443 (1985))。然而，由 于Bcl-2家族成员对于发育和调节至关重要，该蛋白家族中一个或多个成员的 畸变或缺失常常引起阻止它们的功能重要性得以表征的病理，或导致一开始 就无法存活的动物。能从生长的最早阶段起监测发育和调节变化的模型系统将为解决涉及Bd-2基因家族在凋亡中作用的问题提供关键的工具。斑马鱼(/^m'o ren'o)已经用作多种生物学途径的有用冲莫型系统。斑马鱼可以充当研究凋亡的优越模型，这不仅因为鱼发育迅速，而且斑马鱼胚胎在胚胎发生的大部分时间始终保持透明，还因为存在可用的展示异常凋亡的突变型斑马鱼品系(参见例如Cole和Ross, Devel. Biol. 240: 123-142 (2001))。因为已经;险查过斑马鱼中的凋亡模式，所以凋亡细胞的才全测和凋亡的一般动力学在该生物体中是已知的(出处同前)。然而，负责斑马鱼中那些凋亡模式的生化途径尚未表征。仍未解决的问题是内在凋亡途径在斑马鱼中是否发挥功能。将斑马鱼建立为通过内在途径进行凋亡信号传导的模型的先决条件是证明Bcl-2家族的主要成员存在于斑马鱼中。已有数项研究试图鉴定斑马鱼中的Bcl-2家族成员。Inohara和Nunez发现了许多斑马鱼基因与哺乳动物和鸟类外在途径成员(诸如胱天蛋白酶)同源，但是只鉴定出八个推定与内在途径Bcl-2家族中仅仅六个成员(Bcl-xL、 Mcl画l、 NR-13、 Bax、 BNIP3和Bad)有关的斑马鱼基因(Inoham和Nunez， Cell Death Diff. 7: 509-510 (2000))。 Coultas等通过tblastn彻底搜索了斑马鱼非冗余和EST GenBank数据库，仅仅鉴定出另外三个仅含BH3的Bcl-2家族成员Bid本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其具有选自ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１、５、７和９的氨基酸序列或其变体，其中所述多肽是斑马鱼Ｂｃｌ－２相关（Ｂ２Ｒ）多结构域促凋亡多肽或斑马鱼Ｂ２Ｒ仅含ＢＨ↓［３］的促凋亡多肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿维J阿什克纳齐，埃丽卡克拉茨，基兰穆克亚拉，里斯哈特，
申请(专利权)人：健泰科生物技术公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]