表达含ｈＣＡＴ基因重组腺病毒载体及其重组腺病毒制造技术

本发明专利技术公开了含人过氧化氢酶基因重组腺病毒载体、重组腺病毒。是先将ｈＣＡＴ基因克隆到ｐｃＤＮＡ３．１＋中，酶切和基因测序鉴定阳性克隆；再利用酶切法把ｈＣＡＴ基因克隆至入门载体ｐＥＮＴＲ１Ａ中。利用体外重组ｐ　ＥＮＴＲ１Ａ－ＣＡＴ和ｐＡｄ／ＣＭＶ／Ｖ５－ＤＥＳＴ，得含人过氧化氢酶基因重组腺病毒载体。将该重组腺病毒表达载体转染包装细胞一人胚肾２９３Ａ细胞得到重组腺病毒，再利用免疫印迹和２４０ｎｍ紫外光吸收法对重组病毒中ＣＡＴ蛋白的表达量和ＣＡＴ酶的活性进行了测定。本发明专利技术为研究人过氧化氢酶基因在基因治疗中的作用奠定了基础，同时为进一揭示氧化应激在一些疾病发生发展中的作用机制和对一些疾病的基因治疗的研究打下了坚实的基础。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
含人过氧化氢酶（ｈＣＡＴ）基因重组腺病毒表达载体，其特征在于：将ｈＣＡＴ基因依次插入ｐｃＤＮＡ３．１＋、入门载体ｐＥＮＴＲ１Ａ，再利用体外重组技术体外重组ｐ　ＥＮＴＲ１Ａ－ＣＡＴ和ｐＡｄ／ＣＭＶ／Ｖ５－ＤＥＳＴ，得到含ｈＣＡＴ基因的重组腺病毒表达载体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王慧莲，宁启兰，吕社民，杨旭东，许楠，李爱玲，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：87[]