人骨唾液酸蛋白ＥＬＩＳＡ检测试剂盒制造技术

本实用新型专利技术涉及人骨唾液酸蛋白ＥＬＩＳＡ检测试剂盒，包括盒体和９６孔酶标板、盖板膜、１３瓶试剂和模具（１），其特征是：酶标板是在微孔条上预包被鼠抗人ＢＳＰ单抗制成的检测板；１３瓶试剂分别为６瓶标准品溶液、１瓶高浓度标准品溶液、１瓶兔抗人ＢＳＰ多抗浓缩液，１瓶羊抗兔ＩｇＧ－ＨＲＰ浓缩液，１瓶显色液，１瓶终止液、１瓶浓缩洗涤液和１瓶样本缓冲液；模具（１）包括１３个下凹瓶位，对应关系分别是浓缩洗涤液位于下凹瓶位（２）、兔抗人ＢＳＰ多抗浓缩液位于下凹瓶位（３）、羊抗兔ＩｇＧ－ＨＲＰ浓缩液位于下凹瓶位（４）、样本缓冲液位于下凹瓶位（５）、显色液位于下凹瓶位（６）、终止液位于下凹瓶位（７）、标准品溶液和高浓度标准品溶液位于下凹瓶位（８）。本实用新型专利技术具有结构简单、成本低廉，以及快速、简便、准确地检测血清ＢＳＰ含量的特点。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及人骨唾液酸蛋白ELISA检测试剂盒，是一种人血清中骨重吸收相 关标志物骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein, BSP)的检测试剂盒。
技术介绍
骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein, BSP)是细胞外基质中的一种酸性糖蛋白，其 组织分布相对局限，主要分布在矿化组织(如骨、牙齿)和钙化的软骨与骨的交界区，其含 量约占骨细胞外基质中非胶原蛋白质的15%。近年研究发现BSP的表达水平与骨质疏松症 和肿瘤骨转移等疾病关系较为密切，血清BSP含量有望作为骨质疏松症和乳腺癌、肺癌、肾 癌、前列腺癌、甲状腺癌等肿瘤骨转移预测的标志物之一。目前，检测血清BSP含量方法包括放射免疫分析法和ELISA法二种。其中，放射 免疫分析法不仅需要特定的仪器、操作较为复杂，而且工作人员在操作时存在受到放射性 损害的风险，环境存在受到放射性污染的可能，因此安全性较差；而现有技术的ELISA检测 法需要依赖进口试剂盒，由于这种进口试剂盒结构复杂、价格昂贵，因此其应用受到一定限 制，不适宜推广应用。
技术实现思路
本技术目的，是为了克服现有技术的ELISA检测法存在进口试剂盒结构复 杂、价格昂贵的缺点，提供一种廉价、简便的人骨唾液酸蛋白ELISA检测试剂盒，并具有操 作简单、检测快速、准确，灵敏度高、成本低和稳定好的特点。本技术的目的主要通过以下技术方案实现人骨唾液酸蛋白ELISA检测试剂盒，包括盒体和盒内的一块96孔酶标板、一张盖 板膜、13瓶试剂和放置试剂瓶的模具，其结构特点在于96孔酶标板是在微孔条上预包被 鼠抗人BSP单抗(一抗)制成的检测板；13瓶试剂分别为6瓶标准品溶液、1瓶高浓度标准 品溶液、1瓶兔抗人BSP多抗浓缩液(二抗)，1瓶羊抗兔IgG-HRP浓缩液(酶标三抗)，1瓶 显色液，1瓶终止液、1瓶浓缩洗涤液和1瓶样本缓冲液；所述模具包括13个下凹瓶位，其与 13瓶试剂一一对应。本技术的目的还可以通过以下技术方案实现本技术的一种实施方式是盒体是硬纸盒；96孔酶标板由96孔聚苯乙烯酶标 板构成、放于真空铝箔袋内；盖板膜是透明硬塑料贴膜；6个浓度标准品溶液和高浓度标准 品溶液分别用自然色透明聚丙烯微量离心管装载，兔抗人BSP多抗浓缩液用红色透明聚丙 烯微量离心管装载，羊抗兔IgG-HRP浓缩液用黄色透明聚丙烯微量离心管装载，浓缩洗涤 液用透明帽的半透明聚乙烯塑料瓶装载，样本缓冲液用蓝色帽的白色聚乙烯塑料瓶装载， 显色液是用黑色帽的黑色聚乙烯塑料瓶装载，终止液用绿色帽的白色聚乙烯塑料瓶装载； 下凹瓶位用塑料泡沫制成。本技术的一种实施方式是96孔酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆装3式12条酶标反应微孔条组成，每个可拆装式微孔条有8个反应孔，每个反应孔预包被鼠抗 人BSP单抗；盖板膜大小与酶标板横切面大小一致；标准品溶液6瓶、Iml/瓶，浓度分别为 2，8，16，32，64，128ng/ml ；高浓度标准品溶液1瓶、Iml/瓶；兔抗人BSP多抗浓缩液1瓶， 200 μ 1/瓶；羊抗兔IgG-HRP浓缩液1瓶，200 μ 1/瓶；显色液1瓶、15ml/瓶，终止液1瓶、 15ml/瓶；浓缩洗涤液1瓶、IOOml/瓶；样本缓冲液1瓶、15ml/瓶。本技术的一种实施方式是盒内还设有一个自封袋、一份说明书和一份质检 报告书。本技术具有的有益效果如下1、本技术具有结构简单、成本低廉，以及快速、简便、准确地检测血清BSP含 量的特点。2、实验表明本技术试剂盒具有很高的灵敏度血清的最低检测限为1. 5ng/ ml，标准曲线的线性范围为2-lOOng/ml，回收率为80. 5 % 士 11. 2 %，相对于放射免疫分析 法和进口的同类ELISA试剂盒，本试剂盒无放射性污染，更安全，成本低，灵敏度高。附图说明图1为本技术中模具的结构俯视图。具体实施例具体实施例图1构成具体实施例的模具。本实施例公开一种人骨唾液酸蛋白ELISA检测试剂盒，包括盒体和盒内的一块96 孔酶标板、一张盖板膜、13瓶试剂和放置试剂瓶的模具，96孔酶标板是在微孔条上预包被 鼠抗人BSP单抗(一抗)制成的检测板；13瓶试剂分别为6瓶标准品溶液、1瓶高浓度标准 品溶液、1瓶兔抗人BSP多抗浓缩液(二抗)，1瓶羊抗兔IgG-HRP浓缩液(酶标三抗)，1瓶 显色液，1瓶终止液、1瓶浓缩洗涤液和1瓶样本缓冲液；所述模具包括13个下凹瓶位，其与 13瓶试剂一一对应。盒内还设有一个自封袋、一份说明书和一份质检报告书。如图1所示，泡沫塑料模具1有13个下凹瓶位，与13瓶试剂一一对应，其对应位 置依次为50ml浓缩洗涤液位于下凹瓶位2，200 μ 1 二抗浓缩液位于下凹瓶位3，200 μ 1酶 标三抗浓缩液位于下凹瓶位4，15ml样本缓冲液位于下凹瓶位5，15ml显色液位于下凹瓶位 6，15ml终止液位于下凹瓶位7，6种浓度Iml/瓶标准品溶液及Iml高浓度标准品溶液位于 下凹瓶位8。本实施例中96孔酶标板由96孔聚苯乙烯酶标板构成、放于真空铝箔袋内；盖板膜是透明硬塑 料贴膜；6个浓度标准品溶液和高浓度标准品溶液分别用自然色透明聚丙烯微量离心管装 载，兔抗人BSP多抗浓缩液用红色透明聚丙烯微量离心管装载，羊抗兔IgG-HRP浓缩液用黄 色透明聚丙烯微量离心管装载，浓缩洗涤液用透明帽的半透明聚乙烯塑料瓶装载，样本缓 冲液用蓝色帽的白色聚乙烯塑料瓶装载，显色液是用黑色帽的黑色聚乙烯塑料瓶装载，终 止液用绿色帽的白色聚乙烯塑料瓶装载；下凹瓶位用塑料泡沫制成。96孔酶标板由外框支撑架及放置其上的可拆装式12条酶标反应微孔条组成，每4个可拆装式微孔条有8个反应孔，每个反应孔预包被鼠抗人BSP单抗；盖板膜大小与酶标板 横切面大小一致；标准品溶液6瓶、Iml/瓶，浓度分别为2,8,16，32，64，128ng/ml ；高浓度 标准品溶液1瓶、Iml/瓶；兔抗人BSP多抗浓缩液1瓶，200 μ 1/瓶；羊抗兔IgG-HRP浓缩 液1瓶，200 μ 1/瓶；显色液1瓶、15ml/瓶，终止液1瓶、15ml/瓶；浓缩洗涤液1瓶、IOOml/ 瓶；样本缓冲液1瓶、15ml/瓶。本实施例的制作方法如下采用预包被鼠抗人BSP单抗的96孔酶标反应微孔条 制成检测板，放入真空铝箔袋中，以塑料硬贴膜为盖板膜，将50ml浓缩洗涤液，15ml样本缓 冲液，Iml高浓度标准品溶液，不同浓度标准品溶液6瓶，Iml/瓶，200 μ 1兔抗人BSP多抗 浓缩液，200 μ 1羊抗兔IgG-HRP浓缩液等试剂用不同大小和颜色的塑料瓶和微量离心管盛 装，并按照图1所示位置分别固定于泡沫塑料模具1中，与试剂板、盖板膜一同封装于纸盒 内。其中，6个浓度标准品溶液和高浓度标准品溶液均用自然色透明聚丙烯微量离心管，兔 抗人BSP多抗浓缩液用红色透明聚丙烯微量离心管，羊抗兔IgG-HRP浓缩液用黄色透明聚 丙烯微量离心管，浓缩洗涤液用透明帽的半透明聚乙烯塑料瓶，样本缓冲液用蓝色帽的白 色聚乙烯塑料瓶，显色液是用黑色帽的黑色聚乙烯塑料瓶，终止液用绿色帽的白色聚乙烯 塑料瓶；每一个试剂盒中的试剂足够进行96次测定(包括标准分析孔)，既可一次同时检 测多个样品，也可拆本文档来自技高网...

【技术保护点】
人骨唾液酸蛋白ＥＬＩＳＡ检测试剂盒，包括盒体和盒内的９６孔酶标板、盖板膜、１３瓶试剂和放置试剂瓶的模具（１），其特征是：９６孔酶标板是在微孔条上预包被鼠抗人ＢＳＰ单抗制成的检测板；１３瓶试剂分别为６瓶标准品溶液、１瓶高浓度标准品溶液、１瓶兔抗人ＢＳＰ多抗浓缩液，１瓶羊抗兔ＩｇＧ－ＨＲＰ浓缩液，１瓶显色液，１瓶终止液、１瓶浓缩洗涤液和１瓶样本缓冲液；模具（１）包括１３个下凹瓶位，其与１３瓶试剂的对应关系分别是浓缩洗涤液位于下凹瓶位（２）、兔抗人ＢＳＰ多抗浓缩液位于下凹瓶位（３）、羊抗兔ＩｇＧ－ＨＲＰ浓缩液位于下凹瓶位（４）、样本缓冲液位于下凹瓶位（５）、显色液位于下凹瓶位（６）、终止液位于下凹瓶位（７）、６瓶标准品溶液和１瓶高浓度标准品溶液位于下凹瓶位（８）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王捷，夏冰，
申请(专利权)人：广州军区广州总医院，
类型：实用新型
国别省市：81[中国|广州]