【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及通过利用脂质酰基转移酶对脂质进行生物转化以制备碳水化合物酯 和/或蛋白质酯和/或蛋白质亚基酯和/或羟基酸酯(hydroxy acid ester)的方法。本专利技术还涉及脂质酰基转移酶在对脂质进行生物转化使其成为以下一或多种物 质中的用途碳水化合物酯和/或蛋白质和/或蛋白质亚基酯和/或羟基酸酯。本专利技术还涉及本文固定化的脂质酰基转移酶的用途,该固定化的脂质酰基转移 酶可用于在高水分环境中对脂质进行生物转化以制备一或多种碳水化合物酯和/或蛋白 质酯和/或蛋白质亚基酯和/或羟基酸酯。本专利技术还涉及固定化的脂质酰基转移酶.
技术介绍
脂酶已经广泛用于脂质的生物转化以制备高价值产品,例如糖酯,以便用 于广泛的工业中,包括食品和/或饲料工业,化妆品和/或皮肤护理工业,油化学 (oleochemical)工业和制药工业。当生物转化过程需要脂质底物水解时,脂解酶可用于高水分环境中。然而,当 生物转化过程需要酯交换反应或酯基转移反应诸如通过醇解,由于不需要的水解反应利 用酯酶高水分环境可以是有害的,所述不需要的水解反应可导致不需要的生物产物和/ 或使得生物转化产物的产量较低。通常,需要酯交换作用和/或酯基转移作用的生物转化过程利用非-水环境中的 酯酶,所述非-水环境诸如油系统和/或有机溶剂系统诸如丁醇,甲醇或己烷。这样的 系统提供这样的环境,其中极性受体分子和脂质供体分子可以至少部分溶解,且所述酯 酶具有足够的酶活性。尽管少量水是任何酶活性所需的,水的量严格保持在较低水平以 避免该酶的水解活性。通常,糖酯,蛋白质酯,羟基酸酯已经通过化学合成利用无机催化 ...
【技术保护点】
制备碳水化合物酯的方法,所述方法包括将酰基供体、酰基受体与水混合以产生含5-98%水的高水分环境,其中所述酰基供体是脂质底物,其选自由磷脂、溶血磷脂、甘油三酯、甘油二酯、糖脂或溶血糖脂组成的组中的一或多种,且所述酰基受体是碳水化合物;以及将所述混合物与脂质酰基转移酶接触,使得所述脂质酰基转移酶催化以下反应中的一或所有两种:醇解或酯基转移作用。
【技术特征摘要】
GB 2003-1-17 0301120.2;GB 2003-1-17 0301117.8;GB 21.制备碳水化合物酯的方法,所述方法包括将酰基供体、酰基受体与水混合以产生 含5-98%水的高水分环境,其中所述酰基供体是脂质底物,其选自由磷脂、溶血磷脂、 甘油三酯、甘油二酯、糖脂或溶血糖脂组成的组中的一或多种,且所述酰基受体是碳水 化合物;以及将所述混合物与脂质酰基转移酶接触,使得所述脂质酰基转移酶催化以下 反应中的一或所有两种醇解或酯基转移作用。2.权利要求1的方法,其中所述脂质酰基转移酶是固定化的。3.权利要求1或2的方法,其中所述方法包括纯化所述碳水化合物酯。4.权利要求1-3之一的方法,其中所述脂质酰基转移酶的特征是,其为具有酰基转移 酶活性并包含氨基酸基序GDSX的酶,其中X是以下氨基酸残基中的一或多种L、A、 V、I、F、Y、H、Q、T、N、M 或 S。5.前述权利要求任意一项所述的方法,其中所述脂质酰基转移酶是在使用“经缓冲 的底物中的转移酶测定法”检测时具有至少2%酰基转移酶活性的脂质酰基转移酶;所述 转移酶测定法包括以下步骤i)将450mg磷酸卵磷酯和50mg胆固醇溶于氯仿,在真空条件下蒸发干燥;ii)将300mg胆固醇/磷脂酰胆碱混合物移到Wheaton玻璃杯中,添加15ml50mM HEPES缓冲液pH 7,并在搅拌过程中使脂质分散到缓冲液中;iii)在使用磁力搅拌器混和的同时,将底物加热至35°C,并添加0.25ml酶溶液;iv)在反应0、5、10、15、25、40和60分钟后取出2ml样品,并立即添加25μ14Μ HCl以酸化游离脂肪酸,终止酶反应;ν)添加3ml氯仿,并剧烈摇晃振摇30秒,将样品离心,分离2ml氯仿相,并用 0.45 μ m的滤纸过滤,进入IOml涂焦油的Dram玻璃杯中;vi)在60°C氮蒸汽条件下蒸发氯仿,并称量样品;vii)通过GLC分析提取的脂质。6.前述权利要求任意一项所述的方法,其中所述脂质酰基转移酶被分类为 E. C .2.3.1 .χ ο7.前述权利要求任意一项所述的方法,其中所述脂质酰基转移酶可以从一或多种 下列属的生物体获得气单胞菌、链霉菌、酵母菌、乳球菌、分枝杆菌、链球菌、乳 杆菌、脱亚硫酸菌、芽胞杆菌、弯曲杆菌、弧菌科、木杆菌、硫化叶菌、曲霉、裂殖酵 母、李司忒氏菌、奈瑟氏球菌、Mesorhizobium、雷尔氏菌、黄单胞菌和念珠菌。8.前述权利要求任意一项所述的方法,其中所述脂质酰基转移酶包含一种或多种以 下氨基酸序列(i) SEQ ID Νο.2所示氨基酸序列;(ii) SEQ ID No.3所示氨基酸序列; (iii) SEQ ID No.4所示氨基酸序列;(iv) SEQ ID No.5所示氨基酸序列;(v) SEQ ID Νο.6 所示氨基酸序列;(vi) SEQ ID No. 12所示氨基酸序列;(vii) SEQ ID No.20所示氨基酸序 列;(viii) SEQ ID No.22所示氨基酸序列;(ix) SEQ ID No.24所示氨基酸序列;(x) SEQ ID Νο.26所示氨基酸序列;(xi) SEQ ID Νο.28所示氨基酸序列;(xii) SEQ ID No.30所 示氨基酸序列;(xiii) SEQ ID No.32所示氨基酸序列;(xiv) SEQ ID No.34所示氨基酸序 列,或者与 SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQIDNo.6、 SEQ ID No. 12, SEQ ID No.20、SEQ ID No.22、SEQ ID No.24、SEQIDNo.26、SEQ ID No.28、SEQ ID No.30、SEQ ID ...
【专利技术属性】
技术研发人员:阿尔诺D克赖杰,苏珊M马德里德,乔恩D米克尔森,乔恩B索伊,
申请(专利权)人:丹尼斯科公司,
类型:发明
国别省市:DK[丹麦]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。