一种以腺病毒表达系统产生的人逆转录泡沫病毒载体技术方案

本发明专利技术公开了一种以腺病毒表达系统产生的人逆转录泡沫病毒载体，来源于人泡沫病毒ＨＦＶ，仅包含：１）ＨＦＶ病毒复制装配所必需的顺式序列ＣＡＳ；２）ＨＦＶ病毒的长末端重复序列ＬＴＲ；３）改造的增强型绿色荧光蛋白ｅＧＦＰ的编码序列；该病毒载体还包括ＡｄＶ－ＨＦＶ嵌合载体，这些嵌合载体包括：１）对ＨＦＶ病毒基因组进行精减，仅保留ＨＦＶ?ＬＴＲ和其复制装配所必需的顺式序列ＣＡＳ，并插入ｅＧＦＰ序列作为报告基因，构建的ｐＡｄＶ－ＨＦＶｃｉｓ嵌合质粒载体；２）ＨＦＶ的结构蛋白基因插入ＡｄＶ载体质粒中构建的ｐＡｄＶ－Ｇａｇ、ｐＡｄＶ－Ｐｏｌ和ｐＡｄＶ－Ｅｎｖ，ＨＦＶ的结构蛋白基因包括ｇａｇ、ｐｏｉ和ｅｎｖ基因。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种以腺病毒表达系统产生的人逆转录泡沫病毒载体。
技术介绍
基因治疗作为常规药物治疗的替代或(和)补充疗法，正以日新月异的速度发展。 基因治疗对象已从单基因遗传病扩展到多基因遗传病、恶性肿瘤、心血管疾病、艾滋病以及 神经系统疾病，目前全球已有1，340种基因治疗方案用于临床。基因治疗的载体主要有非 病毒性载体和病毒性载体。非病毒性载体虽然制备简单、拥有较大的外源基因携带容量，但 是其转染效率较低、外源基因不能长期表达并常有细胞毒性。病毒性载体的优点是转导效 率高、外源基因能够实现长期表达，但是其安全性、免疫原性是主要问题。因此构建安全、有 效的基因载体一直是基因治疗的瓶颈。腺病毒载体(Adenovirus Vector，AdV)是已经进入人类基因治疗临床实验的载体 之一。与其他病毒载体相比较，腺病毒载体显著的优点是1)能非常容易地获得高滴度的 病毒载体，未经浓缩的病毒载体即可达到lX109pfu/ml ；2)能在体外体内有效地转导各种 组织来源细胞；3)其介导的基因转移不依赖细胞是否分裂。腺病毒载体也存在明显缺点， 病毒基因组不能整合到宿主细胞基因组中导致转移基因不本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种以腺病毒表达系统产生的人逆转录泡沫病毒载体，其特征在于，来源于人泡沫病毒ＨＦＶ，仅包含：　　１）ＨＦＶ病毒复制装配所必需的顺式序列ＣＡＳ；　　２）ＨＦＶ病毒的长末端重复序列ＬＴＲ；　　３）改造的增强型绿色荧光蛋白ｅＧＦＰ的编码序列；该病毒载体还包括ＡｄＶ－ＨＦＶ嵌合载体，这些嵌合载体包括：　　１）对ＨＦＶ病毒基因组进行精减，仅保留ＨＦＶ　ＬＴＲ和其复制装配所必需的顺式序列ＣＡＳ，并插入ｅＧＦＰ序列作为报告基因，构建的ｐＡｄＶ－ＨＦＶｃｉｓ嵌合质粒载体；　　２）ＨＦＶ的结构蛋白基因插入ＡｄＶ载体质粒中构建的ｐＡｄＶ－Ｇａｇ、ｐＡｄＶ－Ｐｏｌ和ｐＡｄＶ－Ｅｎｖ，ＨＦＶ的结构蛋白基因包括ｇａｇ、...

【技术特征摘要】
一种以腺病毒表达系统产生的人逆转录泡沫病毒载体，其特征在于，来源于人泡沫病毒HFV，仅包含1)HFV病毒复制装配所必需的顺式序列CAS；2)HFV病毒的长末端重复序列LTR；3)改造的增强型绿色荧光蛋白eGFP的编码序列；该病毒载体还包括AdV HFV嵌合载体，这些嵌合载体包括1)对HFV病毒基因...

【专利技术属性】
技术研发人员：李治，孙燕，李文鑫，何小华，刘万红，杨频，魏琳岚，
申请(专利权)人：陕西师范大学，
类型：发明
国别省市：87[]