一种灵芝多糖的制备方法技术

本发明专利技术涉及真菌发酵领域。由于食用菌等微生物是在液体培养液里生长发育的，因此深层培养又名沉没培养或液体发酵。发酵法生产是在大型发酵罐内进行，可通过调节培养基组成、发酵温度和时间等，在短时间内得到大量的真菌菌丝体。本发明专利技术将灵芝菌种进行种子培养、摇瓶培养及发酵罐培养后，取发酵液在高速离心，发酵液离心后所得滤液进滤膜过滤，浓缩后，加入无水乙醇，４℃过夜沉淀，高速离心醇沉液，收集沉淀即为灵芝多糖。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及真菌发酵领域。由于食用菌等微生物是在液体培养液里生长发育 的，因此深层培养又名沉没培养或液体发酵。与传统的农业法栽培真菌实体的方法不 同，发酵法生产是在大型发酵罐内进行，可通过调节培养基组成、发酵温度和时间等， 在短时间内得到大量的真菌菌丝体。
技术介绍
食用真菌的深层发酵是在抗生素发酵技术基础上发展起来的。1948年，美国的 汉姆非特首先提出了用深层法来培养蘑菇菌丝体。1948-1卯4年汉姆非特和他的同事们 选出了三株适合深层培养的蘑菇菌株。1953年，美国的布洛克博士用废柑汁深层培养了 野生蘑菇。1958年，沙克斯第一个在发酵罐内培养出了羊肚菌菌丝球，并作了 25000加 仑规模的生产试验。从此食用菌的培植开始从农业生产跨进了工业生产的领域。我国从 60年代末开始大规模采用深层发酵法生产食用或药用菌，主要用在医药工业上。近20年 来，随着这方面技术的日益成熟，已逐渐开始用来生产功能性食品。目前，国内外对液态培养灵芝菌丝体都有文献报道。Tang Yajie[3]等人对碳源 影响灵芝菌丝体发酵产量进行了研究，他们研究发现通过分批补料培养可以获得高产量 的多糖和灵芝酸，他们的研究证明了碳源和糖的初始浓度对灵芝酸和多糖产量的影响较 大，另外蔗糖可以作为碳源用于胞外多糖的生产，但是蔗糖对灵芝菌丝体的生长不利， 乳糖也可以作为碳源用于灵芝菌丝体生长，而且乳糖对灵芝菌丝体的生长没有影响，灵 芝酸和胞内多糖的产量也较高；当乳糖的初始浓度超过35g/L时，灵芝酸的产量就会下 降，但当乳糖的残存量在10-5g/L时，进行脉冲补给乳糖可以显著提高灵芝酸的产量； 在发酵过程中，将溶解氧控制在20-35%之间，可以得到最高的灵芝菌丝体产量；搅拌 培养和摇瓶培养得到的灵芝菌丝体、胞内外多糖以及灵芝酸的量是不一样的。随着灵芝液体深层发酵技术的发展，用大型发酵罐和廉价的培养基进行灵芝菌 丝体的发酵法生产可大大降低灵芝的生产成本，用发酵法培养获得的产品生产多种灵芝 保健食品和药品，有望使灵芝成为大众的日常保健品。
技术实现思路
本专利将灵芝菌种进行种子培养、摇瓶培养及发酵罐培养后，取发酵液在高速 离心，发酵液离心后所得滤液进滤膜过滤，浓缩后，加入无水乙醇，4°C过夜沉淀，高速 离心醇沉液，收集沉淀即为灵芝多糖。具体实施方式1、种子培养液体种子培养方法将斜面菌种分割成蚕豆粒大小的小块接种2-3块到液体种 子培养基中，250mL三角瓶装液量50mL，置于旋转式摇床上，160r/min、30°C培养3_4d32、摇瓶培养培养好的种子液以接种量10^-15% (ν/ν)接种于500mL摇瓶，装液量150mL， 160r/min,发酵时间5d、温度30°C及初始pH6.0。通过实验优化，最大多糖含量培养基 组成为葡萄糖 47.4g/L，KH2P043.76g/L,蛋白胨 4.39g/L。3、5L发酵罐培养装料系数为0.7，接种量为10%，发酵罐培养温度30°C和初始pH6.0，通气量和 搅拌转速根据需要确定。4、获取灵芝多糖取发酵液在4 °C以lOOOOr/min高速离心lOmin，发酵液离心后所得滤液进 0.45 μ m滤膜过滤，浓缩后，加入3倍体积无水乙醇，剧烈搅拌，4°C过夜沉淀，高速离 心醇沉液，收集沉淀，即为灵芝多糖。本文档来自技高网...

【技术保护点】
液体种子培养方法：将斜面菌种分割成蚕豆粒大小的小块接种２－３块到液体种子培养基中，２５０ｍＬ三角瓶装液量５０ｍＬ，置于旋转式摇床上，１６０ｒ／ｍｉｎ、３０℃培养３－４ｄ备用。

【技术特征摘要】
1.液体种子培养方法将斜面菌种分割成蚕豆粒大小的小块接种2-3块到液体种子 培养基中，250mL三角瓶装液量50mL，置于旋转式摇床上，160r/min、30°C培养3_4d备用。2.摇瓶培养方法培养好的种子液以接种量10%-15% (ν/ν)接种于500mL摇瓶， 装液量150mL，160r/min。发酵时间5d、温度30°C及初始pH...

【专利技术属性】
技术研发人员：毛健，姬中伟，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]