ＲＮＡｉ介导的脾酪氨酸激酶相关炎性病症的抑制制造技术

提供用于抑制脾酪氨酸激酶（Ｓｙｋ）ｍＲＮＡ表达的ＲＮＡ干扰，具体而言，用于治疗患有Ｓｙｋ相关炎性病症（Ｓｙｋ－ｒｅｌａｔｅｄ?ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）或具有形成Ｓｙｋ相关炎性病症的危险的患者，所述Ｓｙｋ相关炎性病症例如变应性结膜炎、眼部炎症（ｏｃｕｌａｒ?ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）、皮炎、鼻炎、哮喘、变态反应或肥大细胞病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及干扰RNA组合物的领域，所述干扰RNA组合物用于沉默脾酪氨酸激酶 (Syk)和用于治疗Syk相关炎性病症(Syk-relatedinflammatory condition)。所述病症 例如包括变应性结膜炎、眼部炎症(ocularinflammation)、皮炎、鼻炎、哮喘、变态反应或肥 大细胞病。
技术介绍
变应性结膜炎、眼部炎症、皮炎、鼻炎、哮喘、变态反应和肥大细胞病历史上是以下 述方法治疗口服、鼻内或局部施用抗组胺剂，或者口服或鼻内施用类固醇，或者在变态反 应情况下注射变应原治疗。全身疗法通常需要施用更高浓度的药物化合物，以提供到达所 需治疗位点的有效浓度。抗组胺类化合物已知具有中枢神经系统的活性；困倦和粘膜干燥 通常是抗组胺剂使用的副作用。通过免疫受体例如IgE受体(Fe ε RI)的信号传导包括募集和激活信号传导级联 的多个组分，包括非受体酪氨酸激酶，Syk。Syk激活导致PLC γ和PI3K途径的激活并且最 终导致肥大细胞脱颗粒作用和激活。靶向SykmRNA会降低Syk蛋白水平并且中断Fc ε RI途 径。这种作用会干扰IgE介导的肥大细胞脱颗粒作用以及组胺和其他的促炎介质的释放。在气道内使用气溶胶化反义Syk激酶来抑制过敏性炎症由Stenton，G. R.等报道 (J Immunol. 169 1028-1036 (2002))。通过在支气管上皮细胞系HS-24中和卵清蛋白(OA) 诱导哮喘的大鼠模型中的短干扰RNA的方法来抑制Syk表达，据报道其抑制了所诱导的炎 性应答的标志的表达(在国际专利申请第WO 2005007623号中公布)。使用靶向FC ε RlA 的短发夹RNA抑制包括在IgE产生中的基因表达，和治疗IgE介导的疾病例如哮喘和过敏 性鼻炎在公布的国际专利申请第WO 2005085443号中报道。这些文献中没有一个公开了本 专利技术的干扰RNA。22219v. 1 45263/P022W02关于靶向Syk酪氨酸激酶需要额外试剂和治疗方法，以此阻断内源性肥大细胞脱 颗粒作用，并且释放组胺和其他的促炎介质而避免全身性抗组胺剂治疗的副作用。本专利技术 的实施方式解决了本领域对这种试剂和治疗方法的需求。
技术实现思路
通过提供强有力的和高效的治疗、预防或介入Syk相关炎性病症，本专利技术的实施 方式克服了现有技术的这些和其他缺点。在一方面，本专利技术的方法包括治疗患有Syk相关6炎性病症或具有形成Syk相关炎性病症的危险的患者，所述方法是通过施用沉默Syk mRNA 表达的干扰RNA，因而干扰PLC γ和PI3K的信号传导途径、并且预防与肥大细胞脱颗粒作用 相关的级联事件，以及在Syk相关炎性病症中组胺和其他的促炎介质的释放。本专利技术是直接关于靶向Syk mRNA并且因此干扰Syk mRNA表达的干扰RNA。本发 明的干扰RNA用于治疗患有Syk相关炎性病症或具有形成Syk相关炎性病症的危险的患 者ο本专利技术的一个实施方式是一种在受治疗者中弱化Syk mRNA表达的方法，所述方法 包括施用一种组合物到受治疗者，所述组合物包括有效量的具有19至49个核苷酸长度的 干扰RNA、以及药学上可接受的载体。SykmRNA表达由此而弱化。本专利技术的另一个实施方式是一种在需要对其治疗的受治疗者中治疗Syk相关炎 性病症的方法。所述方法包括施用一种组合物到受治疗者，所述组合物包括有效量的具有 19至49个核苷酸长度的干扰RNA、以及药学上可接受的载体。Syk相关炎性病症由此而治 疗。在一个实施方式中受治疗者是人并且所述人患有Syk相关炎性病症以及，在另一个实 施方式中，受治疗者是人并且所述人具有形成Syk相关炎性病症的危险。对于上述引用的实施方式，所述的干扰RNA包括一个至少13个连续核苷酸的区 域，所述13个连续核苷酸与mRNA 3’端次末端的13个核苷酸具有至少90%的序列互补性， 或至少90%的序列同一性，所述mRNA相应于SEQ ID NO :2、SEQ ID N0:13_40和SEQ ID NO 44-47 中任一个。上述引用方法的另外的实施方式中，所述组合物进一步包括具有19至49个核苷 酸长度以及包括至少13个连续核苷酸的区域的第二种干扰RNA，所述13个连续核苷酸具有 与第二种mRNA3'端次末端的13个核苷酸至少90%的序列互补性，或至少90%的序列同一 性，所述第二种 mRNA 相应于 SEQ ID NO :2、SEQ ID NO 13-40 和 SEQ ID NO 44-47 中任一 个。在本专利技术的另一个实施方式中，提供一种在受治疗者中弱化SykmRNA表达的方 法，所述方法包括施用一种组合物到受治疗者，所述组合物包括有效量的具有19至49个核 苷酸长度的干扰RNA、以及药学上可接受的载体，并且所述干扰RNA包括有义核苷酸链，反 义核苷酸链，和具有至少是近乎完全的连续互补性(contiguous complementarity)的至少 19个核苷酸的区域，其中所述反义链在生理条件下与mRNA的一部分杂交，所述mRNA与SEQ ID NO 1 相应，包括第 642、789、791、860、861、862、867、868、1009、1273、1394、1436、1471、 1472、1533、1535、1547、1680、1738、1739、1766、1880、1947、2022、2036、2328、2329、2473、 2509、2520、2524、2558、或2613位核苷酸。所述Syk mRNA的表达由此而弱化。在另一个实 施方式中，所述组合物包括有效量的具有19至49个核苷酸长度的干扰RNA，其中所述反义 链在生理条件下与mRNA的一部分杂交，所述mRNA与SEQ ID NO :1相应，包括第1007、1698 或1769位核苷酸。在一个实施方式中，所述反义链与mRNA的一部分杂交，所述mRNA与SEQ ID NO 1相应，以第1007、1698或1769位核苷酸起始，并且所述反义链具有19或20个核 苷酸长度。本专利技术的一个实施方式是在需要对其治疗的受治疗者中治疗Syk相关炎性病症 的方法，所述方法包括施用一种组合物到受治疗者，所述组合物包括有效量的具有19至49 个核苷酸长度的干扰RNA、以及药学上可接受的载体，所述干扰RNA包括有义核苷酸链，反7义核苷酸链，和具有至少是近乎完全的连续互补性的至少19个核苷酸的区域；其中所述反 义链在生理条件下与mRNA的一部分杂交，所述mRNA与SEQ ID NO 1相应，包括第642、789、 791、860、861、862、867、868、1009、1273、1394、1436、1471、1472、1533、1535、1547、1680、 1738、1739、1766、1880、1947、2022、2036、2328、2329、2473、2509、2520、2524、2558、或 2613 位核苷酸。所述Syk相关炎性病症由此而治疗。在另一个实施方式中，所述组合物包括有 效量的具有19至49个核苷酸长度的干扰RNA，其中所述反义链在生理条件下与mRNA的一 部分杂交，所述mRNA与SEQ ID NO :1相应，包括第100本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
US 2006-4-13 60/791,847制备用于弱化受治疗者的Syk mRNA表达的药物的组合物的用途，所述组合物包括有效量的具有19至49个核苷酸长度的干扰RNA(iRNA)、以及药学上可接受的载体，所述干扰RNA包括选自下述组的区域一个至少13个连续核苷酸的区域，所述13个连续核苷酸与相应于SEQ ID NO2、SEQ ID NO13 40和SEQ ID NO44中任一个的mRNA 3’端次末端的13个核苷酸具有至少90％的序列互补性，或至少90％的序列同一性；一个至少14个连续核苷酸的区域，所述14个连续核苷酸与相应于SEQ ID NO2、SEQ ID NO13 40和SEQ ID NO44中任一个的mRNA 3’端次末端的14个核苷酸具有至少85％的序列互补性，或至少85％的序列同一性；以及一个至少15、16、17或18个连续核苷酸的区域，所述15、16、17或18个连续核苷酸分别与相应于SEQ ID NO2、SEQ ID NO13 40和SEQ ID NO44中任一个的mRNA 3’端次末端的15、16、17或18个核苷酸具有至少80％的序列互补性，或至少80％的序列同一性，其中所述Syk mRNA的表达由此而弱化。2.根据权利要求1所述的用途，其中所述组合物进一步包括具有19至49个核苷酸长 度并包括一个至少13个连续核苷酸的区域的第二种干扰RNA，所述13个连续核苷酸具有与 相应于 SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:13_40 和 SEQ ID NO :44 中任一个的第二种 mRNA 3'端次 末端的13个核苷酸至少90%的序列互补性，或至少90%的序列同一性。3.根据权利要求1所述的用途，其中所述干扰RNA是shRNA。4.根据权利要求1所述的用途，其中所述的组合物经由气雾剂、含服、皮肤、皮内、吸 入、肌内、鼻内、眼内、肺内、静脉内、腹膜内、鼻、眼、口、耳、胃肠外、贴片、皮下、舌下、局部或 透皮途径施用。5.根据权利要求1所述的用途，其中所述干扰RNA通过能够表达所述干扰RNA的表达 载体的体内表达而被施用。6.根据权利要求1所述的用途，其中所述干扰RNA是miRNA或siRNA中的至少一种。7.根据权利要求1所述的用途，其中受治疗者是人并且所述人患有Syk相关炎性病症 或具有形成Syk相关炎性病症的危险。8.制备用于治疗需要对其治疗的受治疗者的SykmRNA相关炎性病症的药物的组合物 的用途，所述组合物包括有效量的具有19至49个核苷酸长度的干扰RNA、以及药学上可接 受的载体，其中所述干扰RNA包括选自下述组的区域一个至少13个连续核苷酸的区域，所述13个连续核苷酸与相应于SEQ ID NO :2、SEQ ID N0:13-40和SEQ ID NO 44中任一个的mRNA 3，端次末端的13个核苷酸具有至少90% 的序列互补性，或至少90%的序列同一性；一个至少14个连续核苷酸的区域，所述14个连续核苷酸与相应于SEQ ID NO :2、SEQ ID N0:13-40和SEQ ID NO 44中任一个的mRNA 3，端次末端的14个核苷酸具有至少85% 的序列互补性，或至少85%的序列同一性；以及一个至少15、16、17或18个连续核苷酸的区域，所述15、16、17或18个连续核苷酸分 别与相应于 SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:13_40 和 SEQ ID NO 44 中任一个的 mRNA 3，端次末 端的15、16、17或18个核苷酸具有至少80%的序列互补性，或至少80%的序列同一性，其中所述Syk相关炎性病症由此而治疗。9.根据权利要求8所述的用途，其中所述组合物进一步包括具有19至49个核苷酸长 度并且包括一个至少13个连续核苷酸的区域的第二种干扰RNA，所述13个连续核苷酸具有 与相应于 SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:13_40 和 SEQ ID NO :44 中任一个的第二种 mRNA 3'端 次末端的13个核苷酸至少90%的序列互补性，或至少90%的序列同一性。10.根据权利要求8所述的用途，其中所述干扰RNA是shRNA。11.根据权利要求8所述的用途，其中所述的组合物经由气雾剂、含服、皮肤、皮内、吸 入、肌内、鼻内、眼内、肺内、静脉内、腹膜内、鼻、眼、口、耳、胃肠外、贴片、皮下、舌下、局部或 透皮途径施用。12.根据权利要求8所述的用途，其中所述干扰RNA通过能够表达所述干扰RNA的表达 载体的体内表达而被施用。13.根据权利要求8所述的用途，其中所述干扰RNA是miRNA或siRNA中的至少一种。14.根据权利要求8所述的用途，其中所述受治疗者是人并且所述人患有Syk相关炎性 病症或具有形成Syk相关炎性病症的危险。15.制备用于弱化受治疗者的SykmRNA表达的药物的组合物的用途，所述组合物包括 有效量的具有19至49个核苷酸长度的干扰RNA、以及药学上可接受的载体，所述干扰RNA 包括有义核苷酸链，反义核苷酸链，和具有至少是近乎完全的连续互补性的至少19个核苷 酸的区域；其中所述反义链在生理条件下与选自下述组的mRNA的一部分杂交与 SEQ ID NO 1 相应的 mRNA,其包括第 642、789、791、860、861、862、867、868、1394、 1436、1471、1472、1535、1547、1680、1738、1739、1766、1880、1947、2022、2036、2328、2329、 2473、2509、2520、2524、2558、或 2613 位核苷酸，以及，与SEQ ID NO 1相应的mRNA，其包括第1007、1698或1769位核苷酸，其中所述Syk mRNA的表达由此而弱化。16.根据权利要求15所述的用途，其中所述受治疗者是人并且所述人患有Syk相关炎 性病症或具有形成Syk相关炎性病症的危险。17.根据权利要求15所述的用途，其中所述组合物进一步包括第二种干扰RNA，所述干 扰RNA具有19至49个核苷酸的长度并且包括有义核苷酸链，反义核苷酸链，和具有至少是近乎完全的互补性的至少19个核苷酸的 区域；其中所述第二种干扰RNA的反义链在生理条件下与选自下述组的mRNA的第二个部分 杂交与 SEQ ID NO 1 相应的 mRNA,其包括第 642、789、791、860、861、862、867、868、1394、 1436、1471、1472、1535、1547、1680、1738、173...

【专利技术属性】
技术研发人员：约翰M雅尼，乔恩E查特顿，丹尼尔A葛玛奇，史蒂文T米勒，
申请(专利权)人：爱尔康研究有限公司，
类型：发明
国别省市：US