【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及钻井液的生物毒性评价,具体地说是利用海洋微藻快速评价钻井液急 性毒性的方法。
技术介绍
钻井液是一种由水以及各种化学处理剂组成的极其复杂的多相稳定胶态悬浮体, 其生物毒性主要来源于钻井液各组分。对于钻井液的生物毒性评价的研究始于20世纪60 年代,已发展了包括96h急性毒性和慢性毒性等多种评价方法,所采用的受试生物体多种 多样,包括糠虾、发光细菌、海洋微藻(如Skeletonema costatum,即本工作所选用的中肋 骨条藻)、桡脚类、蚤类和鱼类以及双贝类软体动物、片脚类动物。美国等国家主要检测钻井 液的毒性,以欧洲经济合作与发展组织(OECD)为代表的组织和国家则要求同时检测钻井 液及其组分的毒性。目前国内外对废弃钻井液的毒性检测及分级评价方法尚无统一标准。20世纪70年代中期美国环保局(EPA)和石油工业协会(API)共同制订了巴西拟 糠虾(Mysidopsis bahia)%h急性毒性实验法,是美国环保局批准的钻井液毒性评价的唯 一方法,也是美国试验与材料学会(ASTM)和美国石油工业协会推荐的钻井液毒性的评价 标准。由于美国EPA推荐使用的巴西拟糠虾在我国无分布,我国学者致力于寻找新的可以 替代糠虾的受试生物。与美国EPA糠虾法的96h急性毒性试验时间相比,发光细菌法和发光海藻法测量 时间大大缩短。其中发光细菌法是根据发光细菌的发光度随样品毒性总体浓度的增高而呈 线性降低的特性,测定发光细菌在接触样品15min后的发光量,得出样品的毒性水平。该检 测方法具有简易、快速、实时的特点,但由于多数钻井液的黑褐色在发光细菌的发光波段有 ...
【技术保护点】
利用海洋微藻快速评价钻井液急性毒性的方法,其特征在于:1)按体积比取1份钻井液加入9份海水,搅拌静置后取上层混悬液做为贮备液;2)选择对钻井液敏感的海洋微藻进行培养至平稳期,得到进入平稳生长期后的海洋微藻藻液;3)取锥形瓶10个或10个以上,将藻液与储备液于锥形瓶中进行混合培养3~8小时;以每个锥形瓶中液体体积为140mL计,藻液体积为100mL,所加入的储备液体积从0至40mL梯度变化,每个浓度设置2个平行样;若混合容器中藻液与储备液的体积不足的,以过滤灭菌后的天然海水补充至140mL;4)从锥形瓶中取样,采用荧光分光光度计测定发射荧光光谱,得到678~685nm处的活体藻叶绿素荧光强度;5)以未加储备液的藻荧光强度作为对照,计算微藻的相对死亡率:微藻的相对死亡率=(未加钻井液的藻荧光强度-加钻井液的藻荧光强度)/未加钻井液的藻荧光强度;6)半数有效浓度EC↓[50]的计算根据微藻的相对死亡率,利用Curveexpert或Microsoft Excel 2003软件分别绘制微藻死亡率与钻井液浓度关系曲线,得出微藻致死率为50%所对应的钻井液储备液的体积V(mL),根据EC↓[50]= ...
【技术特征摘要】
1.利用海洋微藻快速评价钻井液急性毒性的方法,其特征在于1)按体积比取1份钻井液加入9份海水,搅拌静置后取上层混悬液做为贮备液;2)选择对钻井液敏感的海洋微藻进行培养至平稳期,得到进入平稳生长期后的海洋微 藻藻液;3)取锥形瓶10个或10个以上,将藻液与储备液于锥形瓶中进行混合培养3 8小时; 以每个锥形瓶中液体体积为140mL计,藻液体积为IOOmL,所加入的储备液体积从0至40mL 梯度变化,每个浓度设置2个平行样;若混合容器中藻液与储备液的体积不足的,以过滤灭 菌后的天然海水补充至140mL ;4)从锥形瓶中取样,采用荧光分光光度计测定发射荧光光谱,得到678 685nm处的活 体藻叶绿素荧光强度;5)以未加储备液的藻荧光强度作为对照,计算微藻的相对死亡率微藻的相对死亡率 =(未加钻井液的藻荧光强度-加钻井液的藻荧光强度)/未加钻井液的藻荧光强度;6)半数有效浓度EC5tl的计算根据微藻的相对死亡率,利用Curveexpert或Microso...
【专利技术属性】
技术研发人员:张前前,梁生康,薛玉志,闫学平,刘丽萍,李公让,张妍,
申请(专利权)人:中国海洋大学,
类型:发明
国别省市:95[中国|青岛]
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