流行性造血器官坏死病毒的ＰＣＲ检测试剂盒及检测方法技术

流行性造血器官坏死病毒的ＰＣＲ检测试剂盒及检测方法。涉及病毒的检测方法，提供一种特异性高，简便快捷的针对流行性造血器官坏死病毒的ＰＣＲ检测试剂盒及检测方法。流行性造血器官坏死病毒的ＰＣＲ检测试剂盒包括：裂解液，吸附液，洗涤液，ＰＣＲ反应液，阳性对照，阴性对照。检测方法包括：ＰＣＲ模板制备，ＰＣＲ反应，ＰＣＲ产物检测。该试剂盒的检测灵敏度相当于３１个病毒粒子，模板制备时间约３０ｍｉｎ，半个工作日即可得到准确的结果，无非特异性扩增带，适用于ＥＨＮＶ病毒感染的苗种和水产品的检疫及水质环境的监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒的检测方法，特别涉及流行性造血器官坏死病毒(Epizootic hematopoieticnecrosis virus, EHNV)的 PCR 检测试剂盒及检测方法。
技术介绍
近年来，由病毒引起的水产动物病害给水产养殖业造成了重大的经济损失。随 着经济的全球化，世界各地水产贸易日益增加，病毒的传播也逐渐蔓延开来，病毒造成的 病害已经成为影响世界水产养殖业发展的严重问题(l.Murm CB. Viruses as pathogens of marineorganisms—from bacteria to whales. J Mar Biol Assoc UK,2006,86 (3) 453-467)。其中虹彩病毒的危害比较严重，危害分布范围较为广泛，并且鱼类一旦同时感染 虹彩病毒和寄生虫，致死率可达90%以上(2.萧枫，张奇亚.水生动物虹彩病毒的分子生物 学.水生生物学报，2004，28 (2) :202-206)。^^ftiitifil^'B'if^E^I^ (Epizootic hematopoietic necrosis virus, EHNV) 是虹彩病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
流行性造血器官坏死病毒的ＰＣＲ检测试剂盒，其特征在于设有盒体、裂解液、吸附液、洗涤液、ＰＣＲ反应液、阳性对照和阴性对照。

【技术特征摘要】
流行性造血器官坏死病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于设有盒体、裂解液、吸附液、洗涤液、PCR反应液、阳性对照和阴性对照。2.如权利要求1所述流行性造血器官坏死病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于所述裂 解液的配方为5mol/L盐酸胍，0. lmol/LEDTA,去离子水定容至1L，pH为8. 0。3.如权利要求1所述流行性造血器官坏死病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于所 述吸附液的组成为玻璃粉、浓硝酸与水，所述玻璃粉、浓硝酸与水的配比为lg (5 6) mL (10 12)mL，其中玻璃粉以质量计算，浓硝酸和水以体积计算，所述浓硝酸的质量分 数可为55% 70%。4.如权利要求1所述流行性造血器官坏死病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于所述洗 涤液的组成为0. lmol/L氯化钠，lmmol/L EDTA, 10mmol/L Tris_HCl，去离子水定容至1L， PH为7. 5，再加入等体积的无水乙醇。5.如权利要求1所述流行性造血器官坏死病毒的PCR检测试剂盒，其特征在于所述 PCR反应液的配方为每23iiL中包含10XPCR缓冲液2. 5iiL，正向引物P1 0. 5yL，反向 引物P20. 5iiL，dNTP 2uL, Taq酶0. 25 y L，双蒸水17. 75 y L ；所述正向引物PI和反向引 物P2的序列为正向引物 P1 :5，-CAGCTGGGAGACAACGGCACA-3’ ；反向引物 P2 :5’ -ACGAATTCGAGCTCGGTACC-3，。6.如权利要求1所述流行性造血器...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈新华，敖敬群，黄辉三，胡国海，
申请(专利权)人：国家海洋局第三海洋研究所，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]