本发明专利技术公开了一种芹菜提取物的制备方法，该方法依次包括如下过程：芹菜打浆、加热、复合酶酶解、胰酶酶解、固液分离、ＤＥＡＥ层析柱进行吸附、超滤。这种提取方法简单、快速、安全、无污染，而且收率高、生产成本低，得到的产品营养丰富，适合大规模工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品、生物医药的生产工艺，具体地说是芹菜提取物 的制备方法。
技术介绍
芹菜有水芹和旱芹之分，为伞形科植物。也是我们餐桌上的日常 佳肴。它不仅可以作菜，又可供药用，药用以早芹为主，旱芹香气较 浓，也称"香芹"。由于它们的根、茎、叶和籽都可当药用，故又有"厨房里的药物"、"药芹"之称。的确，芹菜的药理作用非常广， 有较高的使用价值。芹菜含有的营养成分对人体是非常重要的，其中的活性物质也是 保证肌体健康所不可缺少的，其药理作用是多种成分作用的结果，例 如芹菜中的黄酮类物质、丁基苯酞类、氨基酸、不饱和脂肪酸等活性 物质都具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、降血脂等多种药理活性的生理功 能，所以芹菜提取物具有的降压降脂疗效是多成分共同作用的结果。
技术实现思路
本专利技术的目的是提出一种从芹菜原料中分离提取芹菜提取物的 方法，采用酶解和层析方法，以尽可能地将芹菜中有益的黄酮类化合 物、小分子肽、活性多糖类、微量元素、氨基酸等提取出来。本专利技术的提取方法依次包括如下过程(l)取芹菜，洗净加入一定量的水打浆，浆液加热至85。C 100°C，加热时间为10min以上，降温至室温，浆液备用；(2) 浆液温度保持在30。C 55。C，用酸调pH至3.0 5.5，加 入含有纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的复合酶，搅匀后，维持pH 至3. 0 5. 5，在30。C 55。C的条件下酶解；(3) 用碱将酶解后的浆液调pH至8.0 9.5，加入胰酶，搅匀 后，维持pH至8.0 9.5， 45。C 55X:的条件酶解，酶解结束后加热 升温进行酶灭活，降温至室温；(4) 用酸调步骤(3)中酶灭活后酶解液的pH至6.0 7.2，进 行固液分离，除去芹菜残渣，收集滤过液，备用；(5) 将滤过液用DEAE层析柱进行吸附，用酸性磷酸盐缓冲液洗脱；(6) 洗脱液用滤膜进行超滤，收集滤出液，即得芽菜提取物浓縮液。所述的复合酶中纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的重量比例为 1 3: 1 3: 1 2，优先为2: 2: 1，复合酶中还可以含有淀粉酶，复合酶使芹菜的营养成分充分的被提取出来，使^菜的利用率更高， 全面的保留芹菜的营养成分。所述的调pH值用的碱可以用氢氧化钠、氢氧化钙、氢氧化钾、碳酸氢钠或氨水。所述的调pH值用的酸可以用盐酸、磷酸、柠檬酸或硫酸。用酶进行酶解的过程，可以通过控制酶解时间来掌握酶解进程， 酶解时间短，酶解不充分造成收率低，但酶解时间过程又会延长生产周期，增加成本及增加受污染的机会。所述的步骤(2)中酶解时间以60 210分钟为宜。所述的步骤(3)中酶解时间以150 240分钟 为宜。所述步骤(3)中酶灭活温度为90。C 10(TC，灭活时间为5 15分钟。所述的步骤(4)中的固液分离可以是先抽滤得上清液，残渣用 离心机离心，收集上清液，合并抽滤和离心所得的上清液，进行过滤， 分离出清液。所述的酸性磷酸盐缓冲液优选为pH6. 0 6. 8磷酸盐缓冲液。 所述的超滤优选截留分子量为50 100KD的超滤膜。 浓縮液可以作为液态提取物直接灌装，或者进一步干燥处理。 本专利技术还提供了 一种由上述方法提取得到的芹菜提取物，是含有黄酮类化合物、小分子肽、活性多糖类、微量元素、氨基酸等活性物质。本专利技术具有如下优点1、 由于芹菜中纤维素含量较高，本专利技术芹菜直接经两步酶解提 取^菜提取物，第一步先用含纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的复合 酶进行酶解，可以将芹菜的纤维素、果胶酶解，可以使斧菜的水溶性 纤维和黄酮类化合物等被充分提取出来。第二步采用胰酶酶解，可以 得到小分子肽和小分子多糖。2、 两步酶解后芹菜匀浆液，采用抽取、残渣离心获得上清液， 经过滤、上EDAE层析柱吸附分离纯化，超滤等生产工艺，酶解完全， 可除去大分子杂质，得到营养丰富的提取液，其中含有黄酮类化合物、小分子肽、活性多糖类、微量元素、氨基酸等活性物质。3、 采用两步酶解，抽取、残渣离心获得上清液，经过滤、上DEAE 层析柱吸附分离纯化，超滤等生产工艺，优点是收率高、生产成本低、 生产环境要求低，减少了产品受微生物污染、变质的机会。4、 芹菜直接经两步酶解等生产工艺提取芹菜提取物，最大限度 地将芽菜的营养物质提取出来。获得的提取物中主要含有黄酮类化合 物、小分子肽、活性多糖类、微量元素、氨基酸等活性物质，药用价 值高、营养物质更丰富、更易被人体所吸收，更易被市场和消费者所 接受。具体实施例方式下面通过具体实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例取2. 0kg的芹菜，洗净，加入18. 0 kg的水打浆，称重得20. 0kg。 浆液加热至85。C 100。C，最好控制为95°C，保持15min。降温至50 °C，浆液备用。用4. 5% (w%)盐酸调pH3. 0 5. 5，最好调至3. 8±0. 2，按每kg 芹菜加入10万国际单位(比活力)复合酶的比例，加入20万国际单 位(比活力)复合酶，复合酶中纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的重 量比例为2: 2: 1，搅匀后，维持pH在3.8士0.2以保持其稳定酶解 环境，50°C ±0. 5°。的条件下酶解90min。酶解温度可以控制在30°C 55"C条件下，在该范围内酶解时间可以适当调整，温度高时间可以适 当縮短，温度低时间适当延长。用浓度为18g/ml的NaOH将酶解后的浆液调pH至8. 0 9. 5，最 好控制pH至9. 0±0. 2，按每kg芹菜加入5万国际单位(比活力) 胰酶的比例，加入10万国际单位(比活力)胰酶，搅匀后，维持pH 至9. 0±0. 2， 45。C 55。C的条件酶解，最好控制在50°C ±0. 5°C的条 件酶解，酶解结束后加热升温至IO(TC，保温10分钟进行酶灭活， 降温至室温。用4. 5%(w%)盐酸调pH至6. 0 7. 2，最好控制pH至6. 5±0. 2， 抽滤得上清液14. 0kg，残渣用离心机离心，收集上清液得3.0kg，合 并上清液，共17.0kg。进行粗过滤，收集滤出液得16.0kg。用注射用水将DEAE调成糊状，采用淤浆式法装柱，装柱压力 0. 5Mpa。装柱后先用400mmol/L pH6. 5磷酸盐缓冲液清洗，再用 20mmol/L p服.5磷酸盐缓冲液平衡，将上述滤出液上DEAE层析柱进 行吸附，用20mmol/L p朋.5磷酸盐缓冲液洗脱。收集目标物得15. Okg， 用对分子截留为100K的滤膜进行超滤，收集滤出液得13. Okg，即得芹菜提取物浓縮液，取样进行检测。通常磷酸盐缓冲液可以选择 pH6. 0 6. 8。 检验结果1. 多糖鉴别苯酚一硫酸试剂反应(阳性)2. 多肽鉴别取本品lml，加茚三酮试液数滴，加热，显紫色，说明本品为含多肽溶液。3. pH值为6. 5 (中国药典2005年版二部附录VI H)4. 黄酮类化合物含量测定0.28mg/ml (以芦丁为对照品测定芹菜提取物中总黄酮的含量，加入铝离子试剂，同时控制适宜pH值， 使黄酮化合物与铝盐形成络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收 峰。)5.微量元素Zn: 0. 1083mg/ml ; Fe : 0. 0112mg/ml ; Mn : 0. 0037mg/ml; Cu: 0. 0021本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种芹菜提取物的制备方法，其特征在于该方法依次包括如下过程： （１）取芹菜洗净，加入一定量的水打浆，浆液加热至８５℃～１００℃，加热时间为１０ｍｉｎ以上，降温至室温，浆液备用； （２）浆液温度保持在３０℃～５５℃，用酸调ｐＨ至３ ．０～５．５，加入含有纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的复合酶，搅匀后，维持ｐＨ至３．０～５．５，在３０℃～５５℃的条件下酶解； （３）用碱将酶解后的浆液调ｐＨ至８．０～９．５，加入胰酶，搅匀后，维持ｐＨ至８．０～９．５，４５℃～５５℃的 条件酶解，酶解结束后加热升温进行酶灭活，降温至室温； （４）用酸调步骤（３）酶灭活后酶解液的ｐＨ至６．０～７．２，进行固液分离，除去芹菜残渣，收集滤过液，备用； （５）将滤过液用ＤＥＡＥ层析柱进行吸附，用酸性磷酸盐缓冲液洗脱； （６）洗脱液用滤膜进行超滤，收集超滤后得到的滤出液，即得芹菜提取物浓缩液。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：韩金光，
申请(专利权)人：韩金光，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。