用于预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物制造技术

本发明专利技术提供了具有组织保护活性但具有极少或不具有潜在的不希望的造血作用的肽和肽类似物。所述肽和肽类似物可用于预防和治疗各种组织损伤相关疾病和病症。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于预防和治疗组织损伤相关疾病和病症的组织保护肽和肽类似物本申请对2008年1月22日提交的美国临时申请号61/062，012，2008年1月 22日提交的61/062,022 ；2008年1月22日提交的61/062,045 ；2008年7月3日提交的 61/133,912 ；和2008年12月30日提交的61/203，890主张优先权，所述申请的内容通过参 考被完整并入本文。1.引言本专利技术提供了用于预防或治疗组织损伤相关疾病或病症和/或其损伤、效应或症 状(包括但不限于癌症、炎症和暴露于毒性剂)的组织保护肽和肽类似物。特别地，本专利技术 提供了与I型细胞因子受体配体的片段具有一致序列的组织保护肽和肽类似物，其具有很 少或不具有全长配体的可能不希望的造血效应。这些肽还包括设计用于模拟组织保护受体配体(例如ΕΡ0)内关键氨基酸残基的 空间位置的片段、嵌合体和肽。本专利技术进一步提供了使用这些肽调节由组织损伤相关疾病 或病症导致的个体应答和/或症状的方法和用途，以治疗、预防或改善该疾病或病症。另外，本专利技术提供了用于在有此需要的个体中治疗组织损伤相关疾病或病症或其 损伤、效应或症状(包括但不限于癌症、炎症和暴露于毒性剂)的药物组合物，其包含肽和 药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。2.
技术介绍
组织损伤可因为缺血性、创伤性、毒性或炎症性损伤造成的组织的实质性损失而 引起，其中组织内的细胞通过凋亡或坏死而被破坏。组织损伤可发生在许多急性和慢性疾 病和状况中。发生组织损伤的程度被许多因素调节，包括疾病或伤害的类型、疾病或伤害相 关炎症或创伤的水平或严重程度、组织损伤的位置、和组织的血管充足性。最近的证据提出，1型细胞因子家族成员——通常与维持血细胞比率相关的促红 细胞生成素(EPO)可能也通过与其受体EPOR的相互作用在减轻组织损伤中发挥重要作用 (Brines 等，2004，Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 101(41) :14907-12)。尽管假设 EPO 可能提供 补偿性应答，所述能够改善缺氧的细胞环境并调节由代谢应激造成的程序性细胞死亡，基 础的分子机制尚待清楚的理解。基于该观察，研究者已经探索了 EPO在各种适应症中的用途。例如，基于观察到 用于在肿瘤患者中治疗贫血的EPO不仅改善了贫血还改善了肿瘤患者的健康状况，研究者 已经探索EPO作为癌症的潜在疗法的用途。(参见美国专利号6，579，525和Blau C. A.， 2007，Stem Cells 25(8) :2094-7)。Haran-Ghera 等的美国专利号 6，579，525 涉及将重组 EPO用于治疗多发性骨髓瘤的用途并假设EPO诱发对肿瘤的免疫应答。另外，美国专利申请 号11/093，177(公开号US 2005/0267027)公开了 EPO通过降低肿瘤中的HIF-I α和/或 VEGF的表达来抑制肿瘤中的血管生成的用途。但是，由于其红细胞生成效应，作为潜在的组织保护剂的EPO存在严重的问题。尤 其对于长期给药(例如在诸如癌症和炎症的适应症中所预见的)，频繁使用治疗剂量的EPO 可能显著地增加个体的血细胞比率，这可能导致高血压、癫痫和血管栓塞。22此外，对于癌症，还没有认识到EPO作为治疗剂的潜能。已经确定，数种类型的癌 症(例如乳腺癌)表达而且倾向于过度表达促红细胞生成素受体。这导致了这样的担忧 将EPO治疗性地用于治疗癌症会导致肿瘤的进一步生长，而非导致肿瘤发展的衰退(参见 Blau, 2007,同上，和美国专利申请号10/432，899，作为US 2005/0260580公开)。随着EPO 在各种癌症适应症中的数次试验由于肿瘤生长导致死亡率升高(Blau)而被停止，这一担 忧已经在临床被证实(Blau)。鉴于这些不良的临床结果，FDA已经在已批准的EPO产品上 附上了一个黑框，警告不得将它们用于未经批准的癌症适应症。另外，成熟人体的EPO蛋白是165个氨基酸的蛋白，经质谱测量具有约30. 4kDa的 分子量。重组的蛋白可以通过高度规范的、昂贵的且劳动强度大的工艺在中国仓鼠卵巢细 胞中生产。此外，EPO必须在严格条件下贮存以维持其活性。考虑到这些限制，EPO不是解 决公共紧急事件(例如，毒性剂(例如辐射或化学药剂)的释放，无论由于工业事故还是 恐怖主义行动或战争)的理想候选物，公共紧急事件需要快速大量生产治疗剂以供广泛分 发。因此，对具有很少或不具有潜在有害效应且可以被公众方便获得的组织保护治疗 存在需要。3.概述本专利技术提供了分离的肽和肽类似物，其在应答细胞、组织或器官中具有组织保护 活性。在某些实施方案中，肽和肽类似物具有很少或不具有可能不被期望的造血效应。特 别地，本专利技术提供了与EPO和I型细胞因子受体配体的一部分具有一致序列的组织保护肽 和肽类似物。在某些实施方案中，分离的肽或肽类似物包含9到四个残基的氨基酸序列， 其特征在于核心结构基序选自(1)两个带负电荷的氨基酸和(2) —个带正电荷的氨基酸 和一个带负电荷的氨基酸。核心带电荷的氨基酸如下所述通过7到27个氨基酸侧翼连接。 在某些实施方案中，核心带电荷的氨基酸直接彼此相邻。在某些实施方案中，带电荷的氨基 酸被1到5个氨基酸或被单个极性氨基酸分开。在某些方面，本专利技术提供了分离的肽和肽类似物，其具有至少一种组织保护活性。 示范性的组织保护活性包括但不限于保护、维持、增强和恢复应答的哺乳动物细胞、组织或 器官的功能或活力。因此，一方面，本专利技术提供了本专利技术的分离的肽和肽类似物在制备用于 保护、维持、增强或恢复应答的哺乳动物细胞及其相关的细胞、组织和器官的功能或活力的 药物组合物中的用途。在相关的实施方案中，将组合物施用给有此需要的个体。在其它方面，本专利技术的分离的肽和肽类似物也具有很少的或不具有红细胞生成活 性，例如它们不会显著地增加个体的血红蛋白或血细胞比率，或更一般地，具有很少的或不 具有造血活性，例如它们不会显著地增加血细胞成分例如红系、淋巴样和髓细胞。在具体实 施方案中，分离的肽和肽类似物具有很少的或不具有选自以下的活性血管活性作用(例 如血管收缩)、过度活化的血小板、促凝血活性、和刺激血小板或红细胞生成依赖性细胞的 增殖或产生(参见 Coleman 等，2006，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103 :5965-5970)。本专利技术也提供了药物组合物，其包含这些组织保护肽和肽类似物、和药学上可接 受的载体赋形剂或稀释剂，以及制备这些组合物的方法和它们在治疗组织损伤相关疾病和 病症中的用途。在其它方面，本专利技术提供了使用本文描述的分离的肽或肽类似物制备药物 组合物的方法，该药物组合物用于在有此需要的个体中针对应答性组织损伤进行保护或预防，恢复或复原应答组织或应答组织功能。在一具体方面，应答哺乳动物细胞及其相关的细 胞、组织或器官凭借紧密的内皮细胞屏障位于血管远端。在另一具体方面，细胞、组织、器官 或其它身体部分(例如准备用于移植的那些)是从哺乳动物身体分离的。在本专利技术的某些 方面，可兴奋组织是中枢神经系统组织、外周神经系统组织、心脏组织或视网膜组织。在另 一方面，应答细胞或其相关细胞、组织或器官不是可兴奋细胞、组织或本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的肽，其包含：　　（ｉ）１０到２８个残基的肽或肽类似物，其在应答细胞、组织或器官中具有组织保护活性且其包含结构式（Ⅱ）：　　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］－Ｘ↓［１０］－Ｘ↓［１１］－Ｘ↓［１２］－Ｘ↓［１３］－Ｘ↓［１４］－Ｘ↓［１５］－Ｘ↓［１６］－Ｘ↓［１７］－Ｘ↓［１８］－Ｘ↓［１９］－Ｘ↓［２０］－Ｘ↓［２１］－Ｘ↓［２２］－Ｘ↓［２３］－Ｘ↓［２４］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２５）　　其中：　　Ｘ↓［１］是Ｓｅｒ（Ｓ）；　　Ｘ↓［２］是Ａｒｇ（Ｒ）；　　Ｘ↓［３］是Ｖａｌ（Ｖ）；　　Ｘ↓［４］是Ｌｅｕ（Ｌ）；　　Ｘ↓［５］是Ｇｌｕ（Ｅ）；　　Ｘ↓［６］是Ａｒｇ（Ｒ）；　　Ｘ↓［７］是Ｔｙｒ（Ｙ）；　　Ｘ↓［８］是Ｌｅｕ（Ｌ）；　　Ｘ↓［９］是Ｌｅｕ（Ｌ）；　　Ｘ↓［１０］是Ｇｌｕ（Ｅ）；　　Ｘ↓［１１］是Ａｌａ（Ａ）；　　Ｘ↓［１２］是带正电荷的氨基酸；　　Ｘ↓［１３］是带负电荷的氨基酸；　　Ｘ↓［１４］是Ａｌａ（Ａ）；　　Ｘ↓［１５］是Ｇｌｕ（Ｅ）；　　Ｘ↓［１６］是Ａｓｎ（Ｎ）；　　Ｘ↓［１７］是Ｉｌｅ（Ｉ）；　　Ｘ↓［１８］是Ｔｈｒ（Ｔ）；　　Ｘ↓［１９］是Ｔｈｒ（Ｔ）；　　Ｘ↓［２０］是Ｇｌｙ（Ｇ）；　　Ｘ↓［２１］是Ｃｙｓ（Ｃ）；　　Ｘ↓［２２］是Ａｌａ（Ａ）；　　Ｘ↓［２３］是Ｇｌｕ（Ｅ）；　　Ｘ↓［２４］是Ｈｉｓ（Ｈ）；或　　（ｉｉ）结构式（Ⅱ）的删除形式，其中残基Ｘ↓［１］、Ｘ↓［２］、Ｘ↓［３］、Ｘ↓［４］、Ｘ↓［５］、Ｘ↓［６］、Ｘ↓［７］、Ｘ↓［８］、Ｘ↓［９］、Ｘ↓［１０］、Ｘ↓［１１］、Ｘ↓［１２］、Ｘ↓［１３］、Ｘ↓［１４］、Ｘ↓［１５］、Ｘ↓［１６］、Ｘ↓［１７］、Ｘ↓［１８］、Ｘ↓［１９］、Ｘ↓［２０］、Ｘ↓［２１］、Ｘ↓［２２］、Ｘ↓［２３］和Ｘ↓［２４］中的至少一个且最多１４个残基被删除；或　　（ｉｉｉ）结构式（Ⅱ）的改变形式或其删除形式，其中残基Ｘ↓［１］、Ｘ↓［２］、Ｘ↓［３］、Ｘ↓［４］、Ｘ↓［５］、Ｘ↓［６］、Ｘ↓［７］、Ｘ↓［８］、Ｘ↓［９］、Ｘ↓［１０］、Ｘ↓［１１］、Ｘ↓［１２］、Ｘ↓［１３］、Ｘ↓［１４］、Ｘ↓［１５］、Ｘ↓［１６］、Ｘ↓［１７］、Ｘ↓［１８］、Ｘ↓［１９］、Ｘ↓［２０］、Ｘ↓［２１］、Ｘ↓［２２］、Ｘ↓［２３］和Ｘ↓［２４］中的至少一个且最多八个残基被另一...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：安东尼赛拉米，迈克尔布莱尼，
申请(专利权)人：阿拉伊姆药品公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]