5,10-亚甲四氢叶酸-环糊精包合物制造技术

本发明专利技术涉及新颖的５，１０－亚甲四氢叶酸的环糊精包合物。这些化合物的惊人的良好稳定性首次使它们药用成为可能。本发明专利技术还涉及该物质的制备方法及它们在制药中的用途。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及(6R)-，(6S)和(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸的α-，β-，γ-，羟丙基-β-，羟丙基-γ-，二甲基-β-，二甲基-γ-环糊精包合物。这些化合物惊人的良好稳定性首次使它们应用为药物成为可能。本专利技术还涉及该物质的制备方法以及它们在制药中的用途。下面提到的羟丙基环糊精在每一种情况下可理解为指的是羟丙基环糊精(0.6)，羟丙基环糊精(0.9)，3-羟丙基环糊精，2，3-二羟丙基环糊精，特别是2-羟丙基环糊精。下面提到的5，10-亚甲四氢叶酸也可理解为指的是5，10-亚甲四氢叶酸盐，特别是碱金属和碱土金属盐。四氢叶酸盐是叶酸的生物活性形式(叶酸辅助因素)。作为药物，四氢叶酸主要以5-甲酰-5、6、7、8-四氢叶酸(甲酰四氢叶酸)的钙盐形式使用，例如，用于提高5-氟尿嘧啶的治疗效果，或当氨甲蝶呤用于治疗癌症时作为补救物质。在体内，(6s)-5-甲酰四氢叶酸被转化为(6R)-5，10-亚甲四氢叶酸，后者作为辅助因素，形成了一种细胞抑制剂共价三元配合物，5-F-dUMP/TS/5，10-亚甲四氢叶酸，这种三元配合物包括由5-氟尿嘧啶形成的(5-F-dUMP)和胸苷酸合成酶(TS)。参见W.A.Bleyer，Cancer，March 15 Supplememt 1989PP.995-1007和F.L.RStokstad，Folic Acid Metabolism in Health and Disease 1990(Wiley-Liss Inc)，Page 9.所以最好直接应用辅助因素亚甲四氢叶酸而不用甲酰四氢叶酸(5-甲酰四氢叶酸)参见WO91/17660 Page5，24-35行。到目前为止，这项工作由于5，10-四氢叶酸及其盐的纯度和稳定性不足而失败。为此对比EPO，409，125;其中所描述的(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸的纯度一般在85%到95%之间。仅由(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸的钙盐和镁盐可制得纯度为96.5-98.8%的样品。但是盐溶液的稳定性是非常关键的。在pH值为9时，6小时后只有占起始量约85%的5，10-亚甲四氢叶酸仍然存在。参见EP0，409，125，表，P14。溶液中的5，10-亚甲四氢叶酸与甲醛和四氢叶酸相平衡。参见L.J.Machlin，Handbook of Vitamins，2nd Ed.(Marcel Decker Inc.，N.Y./Basle)，T.Brody Page 457;M.J.Osborn等，J.Am.Chem.Soc.82，4921(1960)，R.G.kallen等，J.Biol.Chem.，241，5851(1966)，Moran等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 76，1456-1460(1979)。这个平衡妨碍了5，10-四氢叶酸的胃肠外用。同时在WO 91/17660中，较深入细致地研究了应用5，10-亚甲四氢叶酸较之应用其它四氢叶酸衍生物的优越性，但结果没有显示5，10-亚甲四氢叶酸稳定的可能性。然而，这种稳定性正是首先使5，10-四氢叶酸的药用成为可能的基础。以往已知的工艺，比如通过加入抗坏血酸，对羟基苯甲酸酯类、巯基醇类或者氨基丁三醇来稳定5-甲酰四氢叶酸，参见EP0，416，232，或者通过加入碱土金属离子的络合剂来稳定5-甲酰四氢叶酸的钙盐，参见EP0，401，895，这些已知的工艺对5，10-亚甲四氢叶酸不适用或者说只能起有限的作用，例如，可以延迟四氢叶酸及其衍生物的氧化降解。但上述这些方法都不能影响5，10-亚甲四氢叶酸与四氢叶酸和游离甲醛之间的平衡。显然，以β-环糊精稳定二氢叶酸〔可用作在氨甲蝶呤(JP58-48933 昭)的生物化学分析中的基质物〕和以环糊精稳定甲酰四氢叶酸(EP0，427，078)也明显基于抑制氧化降解的目的。目前令人惊喜的发现是四氢叶酸在环糊精的存在下还和甲醛发生缩合反应，特别是在水溶液中反应之后得到了5，10-亚甲四氢叶酸在相应的环糊精中的稳定包合物，因而，5，10-亚甲四氢叶酸在水溶液中发挥治疗作用首次成为可能。稳定性的提高格外引人注目，因为以往的实验结果给出的结论是实际上在四氢叶酸和环糊精之间没有相互作用。参见D.W.Armstrong等，Science，232，1132-5，(1986)，尤其是P134，2栏，2行。通过内部测量可能证实环糊精不与5-甲酰四氢叶酸相互作用，而只与5-亚甲四氢叶酸发生极弱的相互作用。就化学降解而言，但是还就在游离甲醛和四氢叶酸的平衡中间5，10-亚甲四氢叶酸转移而言，5，10-亚甲四氢叶酸的稳定因而未被预料。环糊精包合物优选通过在相应环糊精存在下与甲醛反应，从(6S)-，(6R)-和(6R，S)-四氢叶酸的硫酸盐或磺酸盐制得，而这些盐依照欧洲专利申请EP-0，495，204可以就地或经预先分离之后或释出并纯化之后而容易地制得。对于四氢叶酸的定量反应，只需甲醛至多10-20%的较少摩尔过量。反应优选在PH值在8到9之间的范围内进行。但是，该包合物也可以通过将(6R)-，(6S)-，或(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸引入环糊精溶液或环糊精悬浮液中而制得，或者也可以通过将固态的(6R)-，(6S)-，或(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸和环糊精研成粉末来制得。得到的产物在室温下在溶液中是稳定的。这些产物适于用作胃肠外药剂的组分或者作为生产口服药剂的原材料。口服和非胃肠的药物形式都是适合的，例如，用于癌症的治疗，用于治疗某些形式的贫血症，自身免疫的疾病以及神经紊乱。本专利技术涉及新颖的(6R)-，(6S)-和(6R，S)-5，10-亚甲四氢叶酸的α-，β-，γ-，羟丙基-β-，羟丙基-γ-，二甲基-β-和二甲基-γ-环糊精的包合物。这些产物在水溶液中是稳定的。它们也适合于非胃肠用药的制备，比如用于治疗癌症。由于其高溶解度和生理上良好的承受能力，5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐，尤其是钠、锂、钙或镁盐，特别适合于这些化合物的制备。在与钙盐相近的纯度下，5，10-亚甲四氢叶酸的镁盐具有的溶解度大约高出10倍，而钠盐和锂盐的溶解度还要高一些。所以尤其要强调这些物质在制药中的应用。优选的化合物是(6R)-和(6S)-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和β-环糊精(6R)-和(6S)-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和羟丙基-β-环糊精(6R)-和(6S)-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和羟丙基-γ-环糊精(6R)-和(6S)-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和γ-环糊精(6R)-和(6S)-5，10-亚甲四氢叶酸的碱金属或碱土金属盐和二甲基-β-环糊精其中在每一种情况下，5，10-亚甲四氢叶酸的天然的(6R)-型更适于此种包合物的制备。本专利技术进一步涉及5，10-亚甲四氢叶酸的稳定的环糊精包合物的制备方法，其特征在于5，10-亚甲四氢叶酸或5，10-亚甲四氢叶酸的一种衍生物与α-，β-或γ-环糊精或α-，β-，γ-环糊精的一种衍生物反应，或者四氢叶酸或四氢叶酸的一种盐优选与相应的环糊精反应，如果需要的话可以转化为另一种盐或该酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
稳定的含水组合物，包括：ｉ）（６Ｒ）－，（６Ｓ）－或（６Ｒ，Ｓ）－５，１０－亚甲四氢叶酸或（６Ｒ）－，（６Ｓ）－或（６Ｒ，Ｓ）－５，１０－亚甲四氢叶酸的一种盐，和ｉｉａ）α－，β－或γ－环糊精或α－，β－或γ－环糊精的一种衍生物，或者ｉｉｂ）α－，β－或γ－环糊精的混合物，或者α－，β－或γ－环糊精的衍生物的混合物，或者α－，β－或γ－环糊精和α－，β－或γ－环糊精的一种衍生物的混合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：HR马勒，M厄尔曼，J康迪，
申请(专利权)人：阿泼洛发公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]