胸腺蛋白口服液制造技术

本发明专利技术涉及的是一种用以治疗胃溃疡、十二指肠球部溃疡的药物－胃安素口服液，它是从乳猪胸腺中提取出一组分子量５万以下的水溶性胸腺混合蛋白，它是由主要活性为３～５万的中分子量水溶性胸腺蛋白，加上具有部分活性的３万以下的小分子量水溶性胸腺蛋白组成，另外还含有多种微量元素和１７种氨基酸，本发明专利技术所述的胃安素口服液对胃溃疡、十二指肠球部溃汤的治疗有非常明显的效果。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及的是一种用以治疗胃溃疡、十二指肠球部溃疡的药物-胃安素口服液；本专利技术也是CN92105643.5的后续专利。在CN92105643.5中，我们已提出了大约在七十年代初期，Goldstein等人从小牛胸腺中分离出一组能调节免疫系统的多肽，生化分析表明，上述胸腺肽是具有活性的单一肽类，其分子量均小于15000道尔顿。七十年中期，Hooper等人在小牛胸腺肽的制备中第一次采用超滤技术截留分子量小于15000道尔顿的胸腺肽组份；在以后的几年中，许多学者对小牛胸腺肽的生物活性大量的工作，并从胸腺肽组织中分离的具有免疫活性成份的分子量如如77年Goldstein提出的分子量为3108道尔顿的制品α；79年Ahmed提出的分子量为2500道尔顿的制品α7；以及81年Low提出的分子量为4982道尔顿的制品α。92年，我们提出了从乳猪胸腺中提取出一组中分子量水溶性胸腺蛋白，并对其进行促细胞增殖活性的研究。对在先专利所述的中分子量水溶性胸腺蛋白的各种物化参数的进一步研究所得出的本专利技术所述的胃安素口服液为分子量5万以下的水溶性胸腺蛋白，其主要活性为3～5万的中分子量水溶性胸腺蛋白，本专利技术所述的胃安素口服液胃溃疡、十二指肠球部溃疡的治疗有非常明显的效果。本专利技术的主要目的是提供一种用于治疗胃溃疡、十二指肠球部溃疡的药物-胃安素口服液，它是由主要活性为3～5万的中分子量水溶性胸腺蛋白，加上具有部分活性的3万以下的小分子量水溶性胸腺蛋白组成。本专利技术所述的胃安素的制备方法简述如下选用40-60天健康乳猪(或其它幼龄脯乳动物)的胸腺，拔除胸腺上的脂肪组织，将胸腺低温高速捣碎，将捣碎后的匀浆在80-90℃之间保持10-30分钟，然后，离心分离去沉淀，留上清液，进行透析，截留分子量为5万以下的水溶性胸腺蛋白，再经过除菌、分装，冻干等常规处理，就得到了胃安素口服液。附图说明图1是不同浓度的胃安素口服液对内皮细胞(EC)的增殖状况。图2是不同浓度的胃安素口服液对小鼠3T3成纤维细胞(FC)的增殖状况。图3是胃安素口服液、成猪胸腺蛋白(TP)、胸腺肽注射液(TF)、肝细胞生长素注射液(HGF)对内皮细胞的增殖效应。图4是胃安素口服液、成猪胸腺蛋白(TP)、胸腺肽注射液(TF)、肝细胞生长素注射液(HGF)对成纤维细胞的增殖效应。图3、图4中1是胃安素口服液、2是成猪胸腺蛋白(TF)、3是胸腺肽注射液(TF)、4是肝细胞生长素注射液(HGF)；方框中空白是试样，阴影为对照。图5是本专利技术所述的胃安素口服液单独或和其它药物组合以及本专利技术所述的胃安素口服液不同剂量互相或和盐水对照下愈合率的比较；图6、7是胃安素口服液在不同条件下的高效液相色谱图；图8是胃安素的紫外扫描图谱，由中山医科大学分析测试中心测试；将上述方法制备的胃安素口服液进行各项试验，具体内容如下。样品包括胃安素口服液；胸腺肽注射液(TF)，由广东省生物制品研究所提供；促肝细胞生长素注射液，由广东省阳江制药厂提供。内皮细胞(EC)的制备与在先专利相同。传代培养时，用D-Hanks'液轻洗细胞单层2-3遍。用0.06%胰蛋白酶在室温下消化1-2分钟，弃消化液，加入内皮细胞培养液，用吸管吹打20-30次，制成细胞悬液。以12-3比率传代。用于实验的为2-3代细胞，经V因子相关抗原(VR.Ag)的抗体检测，确认为血管内皮细胞后方作为生物效应测定用细胞。小鼠3T3成纤维细胞(FC)由第一军医大学珠江医院提供(培养基为1640培养基加20%小牛血清)。本专利技术的胃安素口服液生物效应测定和CN92105643.5相同，即将各检测样品，按不同浓度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml)分别加入3孔细胞中平行检测。每份样品设立3孔空白对照(与盐水做对照)。不同浓度的胃安素口服液对内皮细胞(EC)、小鼠3T3成纤维细胞(FC)增殖状况见图1.图2.图1、图2提示，本专利技术的胃安素口服液对内皮细胞(EC)、小鼠3T3成纤维细胞(FC)均有明显的促增殖生物效应，与对照组比较有显著性差异(P＜0.01)，而且增殖效应与乳猪胸腺蛋白(TP)的最佳浓度有关(0.2mg-0.4mg/ml)。各种不同检测样品对内皮细胞(EC)、小鼠3T3成纤维细胞(FC)增殖效应的影响比较，结果见图3，图4。图3、4表明本专利技术的胃安素口服液有明显促进内皮细胞(EC)、小鼠3T3成纤维细胞(FC)增殖的作用；而成年猪胸腺蛋白、胸腺肽注射液(TF)、促肝细胞生长素注射液(HGF)三种被检样品均无明显促内皮细胞(EC)、小鼠3T3成纤维细胞(FC)增殖活性，与对照组比较无明显差异(P＞0.05)；另外，促肝细胞生长素注射液(HGF)对内皮细胞(EC)虽然有低水平的刺激现象，但与胃安素口服液相比仍有显著性差异，与成年猪胸腺蛋白、胸腺肽注射液(TF)结果比较无明显意义。说明其中确存在着一组能提高内皮细胞(EC)、小鼠3T3成纤维细胞(FC)增殖的活性组份。正如图6、7以及相应的表1和表2中所给出的数据，本专利技术述的胃安素口服液经高效液相色谱分析共有6个组份峰、6条电泳带，这是在波长261nm的条件下测定的六个主要吸收峰；其具体测定值见表1、2，图谱见图6、7。表1本专利技术的胃安素口服液高效液相色谱(图6)9310:30:23261nmNo.RTMatchAreaLefttimeRighttimetimePeakPurePeakPurePeakPure12.7133.560.3327710.1116831.972.634.792.7925.1475.210.0387920.0291754.794.986.075.2736.4583.290.0092980.0077446.106.236.956.6647.5958.500.0586970.0343376.957.469.147.75610.1399.940.0010070.0010079.789.8110.5310.53711.4310.280.0156310.00160610.5311.4111.6511.46811.8631.330.0375610.01176711.6511.8112.2911.89912.4734.720.0103920.00360812.2912.4512.8212.531012.9884.480.0365780.03090212.7712.9313.1713.111114.0593.250.2034580.18972913.2513.7014.6914.211216.2995.860.6255590.59963214.7115.4616.5516.501318.1870.120.0018030.00126417.7818.0518.3718.291418.9544.650.0050320.00224718.3718.8519.1719.171519.3860.270.0030610.00184519.1719.2219.8619.54表2BASELINE(C)1987DynamioSolution.DivisionofMilliporeBASELINE810PEAKINTEGRATIONREPOSAMPLE:KV-61Type:UNK本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种胃安素口服液，它是从乳猪（或其它哺乳动物）胸腺中提取出的一组分子量５万以下的水溶性胸腺混合蛋白，它是由主要活性为３～５万的中分子量水溶性胸腺蛋白，配合具有部分活性的３万以下的小分子量水溶性胸腺蛋白组成；另外，胃安素口服液还含有多种微量元素和１７种氨基酸，本专利技术所述的胃安素口服液经高效液相色谱在波长２６１ｎｍ的条件下分析共有６个主要吸收（组份）峰、６条电泳带；胃安素口服液在波长２９７. ７ｎｍ的紫外扫描中有一主要吸收峰；其使用剂量为５～１５ｍｇ（蛋白）／ｋｇ／日。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈光明，谢汝锦，杨富强，王东晓，张宜俊，黄英，邵岩，
申请(专利权)人：通化欣洛维药业有限公司，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]