治疗真菌感染的方法技术

本发明专利技术提供了增强真菌细胞对抗真菌剂敏感性的方法，该方法包括将一种抗真菌剂与一种加强剂结合使用。此外，本发明专利技术还提供了检测一种药物加强抗真菌化合物活性能力的方法。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
严重地威胁到生命的真菌感染的发生率正以惊人的速率增加。1980到1990年期间在非教学医院中白色假丝酵母血流感染的病例数增加370%。同时，这一时期在教学医院中白色假丝酵母血流感染的发生率增加487%。除凝固酶阳性的葡萄球菌外，根据统计结果，在血流感染有关的医院中白色假丝酵母代表了相关的最快的生长领域(Banerjee等，1991，AmericanJournalofMedicine91(3B)86S-89S)。由于变化的医疗操作，包括关节置换和切开心脏外科手术的侵入性外科手术过程，增加使用的癌症化疗以及爱滋病的流行刺激了医院真菌感染发生率的上升。所有这些过程危及到免疫系统并提供了真菌感染的环境。大约90%的医院真菌感染是以假丝酵母属为代表的。其余的真菌感染大部分是由曲霉属、隐球酵母属、以及卡氏肺囊虫为代表的。不幸的是，诊断真菌感染是困难和耗时的。不能等待诊断检测的结果，必须经常用如化合物两性霉素B(有高度毒性不利条件)或一种吡咯类化合物(真菌属快速地对该化合物产生抗性)开始经验医学的抗真菌治疗。于是，具有广谱活性并具有低毒性的抗真菌药是非常需要的。对特异性真菌属的抗真菌化合物的发现及开发已获得了某种程度的成功。由于假丝酵母属代表了大部分真菌感染，设计筛选新抗真菌化合物的方案以发现抗假丝酵母的化合物。在产品开发期间，以抗白色假丝酵母属的活性为基础，抗真菌活性通常是最佳的。结果，这些抗假丝酵母属化合物通常不具有临床意义上的抗其他真菌属的活性。然而，有趣的是任意到其中某些化合物在较高浓度时能杀死其他真菌属，这提示在这些真菌中也存在着抗真菌药的靶标。回想一下，这些结果表明这些真菌具有天然的抗性机理，从而使它们在某些抗真菌化合物的临床使用浓度时能存活。这种真菌对抗真菌化合物的抗性的基本机理几十年来一直未曾描述。在制定癌症化疗方式的过程中开始认识到由mdr(对多种药物具有抗性)基因介导的对多种药物的抗性问题。一种对多种药物具有抗性的癌细胞系显示出对高剂量的各种各样的细胞毒性化合物具有抗性。通常这些细胞毒性化合物没有共同的结构特征，也不与细胞内的共同靶标相互作用。对这些细胞毒性药物的抗性是由明显受控制的ATP依赖性泵介导的。由于该机理，特定化合物不可能在细胞中积累达到毒性剂量。除了向胞外流出外，还有证据证明在细胞中内流也降低了，这表示对多种药物具有抗性(mdr)(GottesmanandPastan，1993，AnnualReviewofBiochemistry62∶385-427)。已对相当大的mdr基因族(包括大量的完全歧异的有机体)进行了定性。至今为止具有类似于mdr功能的生物体包括许多细菌，果蝇(黑猩猩果蝇)、恶性疟原虫、智人、酵母(低发酵度酿酒酵母)、新杆状线虫(Caenorhabditiseleqans)、杜氏利什曼原虫、海蟹卵块，以及植物拟南芥菜。为了描述人癌细胞对多种药物具有抗性表观型，已进行了几十年的研究。大量的研究结果表明有几个类别的化合物能逆转对多种药物具有抗性的癌细胞系的mdr表现型，结果使得它们对细胞毒性化合物(例如钙离子通道抑制剂、抗心律失常药、抗高血压药、抗菌素、抗组织胺药、免疫抑制剂、甾类激素、变化的甾类、亲脂阳离子、二萜类、去污剂、抗抑郁药、抗精神病药，以及许多其他疏水的两性化合物及其类似物)的作用敏感(GottesmanandPastan，1993，AnnualReviewofBiochemistry62∶385-427)。将这些化合物称为mdr抑制剂。将人mdr抑制剂临床上用于癌症化疗已成为研究的集中焦点。近来，已经发现，既在非致病的也在关键的致病真菌中存在对多种药物抗性(mdr)相关的基因。由于这些基因编码的蛋白质和人mdr-1基因产物之间存在同源性，因此将这些基因称作为“mdr-类似物”。由于在各种各样真菌(包括主要的致病真菌如黄曲霉、烟曲霉和新型隐球酵母)中发现了mdr类似基因，因此使用包括一种具有被证实的对某些真菌有效的抗真菌药和真菌的mdr抑制剂进行结合治疗的期望成为现实。使用结合治疗方法可以将以前证实仅有相应有限临床抗真菌活性的某些抗真菌化合物的抗真菌活性谱扩大。同样，由一种真菌mdr抑制剂也能加强具有被证实的抗真菌活性的化合物，这样这些化合物的抗真菌活性扩大到以前所述的具有抗性的真菌属。本专利技术的一个方面是提供提高真菌细胞对抗真菌剂敏感性的方法，该方法包括给所述细胞施用有效剂量的各种(ⅰ)抗真菌剂和(ⅱ)加强剂。另一方面，本专利技术提供了含有有效剂量的各种(ⅰ)抗真菌剂和(ⅱ)加强剂以及药物学上可接受的赋形剂的药物制剂。再一个方面，本专利技术提供了测定在抗真菌剂与真菌细胞接触时一种化合物的抗真菌效果加强作用的试验方法，该方法包括a)在所述真菌细胞对其有抗性的一种抗真菌化合物(ⅰ)存在下，以及推测有加强抗真菌特性的一种化合物(ⅱ)存在下培养所述真菌细胞；以及b)检测所述化合物对抗真菌剂的抗真菌效果的加强作用。在本文中术语“试验对象”是指一种其中具有活存的真菌细胞系的生物体，器官，器官系统或一种生物体的细胞系。照此，可对试验对象进行体内或体外治疗。令人满意的试验对象是一种哺乳动物，包括正接受体内治疗的病人。在本文中术语“抗真菌剂”或“抗真菌化合物”是指对真菌细胞具有抑制真菌细胞生长作用或对真菌细胞具有细胞毒性的化合物或组合物。在本文中术语“加强剂”，“加强性”，“加强”或“被加强”等等是指一个化合物，一类化合物或组合物，它们具有增强抗真菌剂或抗真菌化合物的抗真菌细胞活性的特性。术语“增强的活性”和“增强活性”是指一种抗真菌剂或抗真菌化合物在低于无加强剂时的浓度下所显示的抑制细胞作用或细胞毒性作用的能力，或者是指在无所述加强剂时对所述抗真菌剂或抗真菌化合物具有抗性的真菌细胞显示的细胞抑制作用或细胞毒性作用的能力。术语“抗性的”或“抗性”是指一种生物体在对有关生物体具有细胞毒性的药物存在时的生长能力。术语“抗真菌活性”或“抗真菌作用”是指一种抗真菌剂或抗真菌化合物对真菌细胞的细胞抑制作用或细胞毒性作用。在本文中术语“给药”等等是指体外或体内适当地给予细胞一定剂量的抗真菌剂或抗真菌化合物或其组合物，以便产生治疗或预防效果。“给药”可以是仅将这些成分与细胞系接触，或者就哺乳动物试验对象而言，给药可用常规剂型进行。常规剂型包括口腔或舌下给药剂型如粉剂，珠状样品，片剂，胶囊剂，糖浆剂，静脉溶液注射剂或胶体混合物，应用的经皮或其他外用制剂有例如溶液，奶液剂，霜剂，凝胶剂或其他软膏剂，和/或速效或长效的植入制剂。抗真菌剂和加强剂可以(a)同时给药(或者有选择地将两者用常用载体配制在一起)，或(b)在常规的治疗安排期间内在不同的时间给药。对于后一种情况，服用二种化合物在时间上要充分地接近以使加强剂增强抗真菌药对真菌细胞的抗真菌活性。另外，也可以使一种或多种抗真菌剂以及一种或多种加强剂共存于一个制剂中。加强剂的服用剂量要能使真菌细胞对服用的抗真菌剂敏感从而有效地降低所需的抗真菌药的剂量。在本专利技术方法中使用的抗真菌化合物的剂量依据需控制的特定真菌生物体，服用药物的具体情况，所选定的抗真菌剂，以及所使用的具体加强剂而定。根据已知的制备药用组合物的方法，可以配制单剂的抗真菌剂和加强剂或配本文档来自技高网...

【技术保护点】
增强真菌细胞对抗真菌剂敏感性的方法，该方法包括给所述细胞施用有效剂量的各个（ｉ）抗真菌剂和（ｉｉ）加强剂。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：RB皮里，PL施卡特鲁德，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]