制备气体和气体前体填充的微球体的方法技术

一种制备温度活化的气体前体填充的微球体的方法，此方法包括摇荡含水溶液，包括在气体前体存在下，低于类脂凝胶态向液晶体相转变温度下，振荡含类脂的水溶液。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
相关申请本申请是美国系列号为08/160,232和08/159,674，其中申请日皆为1993年11月30日的共同未决申请的部分继续，后两个申请是美国系列号为076,239，申请日为1993年6月11日的共同未决的申请的部分继续，后者是美国系列号为717,084和716,899的共同未决的申请的部分继续，后两个申请的申请日皆为1991年6月18日，它们依次又是美国系列号为569,828，申请日为1990年8月20日的申请的部分继续，后者依次是美国系列号为455,707，申请日为1989年12月22日申请的部分继续。每一申请的公开在此整体结合作为参考。
技术介绍
专利
本专利技术涉及制备气体前体填充的脂质体的新的方法和设备。通过这些方法制备的脂质体特别有用，例如，用于超声显像和治疗剂传递系统。专利技术背景各种各样的技术已用于检查和诊断人和动物的疾病。X—射线是用于诊断显像的首要技术之一。通过此技术获得的影像反映了被显像物体的电子密度。在过去的年代里，对比剂，例如钡或碘已用于增强或阻断X—射线，结果增加了不同结构间的对比度。但是，已知X—射线有一定的危害性，因为在X—射线中产生的辐射正在电离，电离辐射的损害作用是可以累积的。另一个重要的显像技术是磁共振显像(MRI)。然而这种技术有各种各样的缺陷，如花费高和不便于进行移动检查。此外，MRI在许多医疗中心不实用。用于核医学的核素，提供了进一步的显像技术。使用此技术时，将核素，例如标记锝的化合物注射进患者体内，并从γ照相机中获得影像。然而，核医学技术受到空间小的限制并且使动物或患者暴露于辐射的损害作用之下。因此，核素的操作和处理成问题。超声是另一种诊断显像技术，它不同于核医学和X—射线，因为它不使患者暴露于电离辐射的有害作用之下。而且，不象磁共振显像，超声相对廉价并可进行移动检查。使用超声技术，通过传感器声波可传入患者或动物体内。当声波传过身体时，在组织和组织液中界面，依赖于体内组织和组织液的声学特性，超声波部分或全部地反射或吸收。当声波通过界面反射时，可通过传感器中的接收器检测它们并处理形成影像。体内组织和组织液中声学特性决定了产生影像的对比度。近年来，超声技术取得了进展。然而，尽管取得了各种各样的技术进步，在许多方面超声仍然是不完美的工具，特别是关于肝脾、肾、心血管疾病的检查和显像，包括测定血流量。检测这些区域的能力依赖于组织或组织液与周围的组织或组织液间的声学特性的差异。结果，找到了对比剂，它们可提高组织或组织液与周围的组织或组织液之间的声学特性的差异，以改善超声显像和疾病检查。产生超声影像形成的原理指导研究者们探索气体对比剂。不同物质密度或声学阻抗大大不同导致在其界面上声学特性或声学阻抗的改变，特别是固体、液体和气体之间界面。当超声波遇此界面，在超声显像中声学阻抗的改变导致更强的声波反射和更强的信号。影响声效率或反射的另一个因素是反射界面的弹性。这种界面的弹性越大，声反射的效率越高。因此，鉴于上述原理，研究者们着重发展了基于气泡或含气剂体的超声对比剂及制备其有效方法。Ryan等在美国专利4,544,545中，公开了有化学上修饰的胆固醇包被的磷酯脂质体。胆固醇包被可以是单层或双层。含水介质包含示踪物，治疗剂或细胞毒性剂，限定于脂质体内。脂质体直径为0.001微米至10微米，经搅拌和超声振动制备。D′Arrigo在美国专利4,684,479和5,215,680中提出了一种含液包气乳化剂和从表面活性剂混合物中生产其方法。美国专利4,684,479公开了通过振荡在空气中液体介质中表面活性剂溶液的脂质体的生产。美国专利5,215,680旨在大量生产类脂包被的微气泡的方法，此方法包括振荡空气中液体介质中表面活性剂溶液或其它气体混合物和过滤灭菌产生的溶液。WO80/02365公开了含不活泼气体，如氮气或二氧化碳的微气泡的生产，不活泼气体包封于可凝胶化的膜中。脂质体可于低温保藏并在用于人体之前或期间加温。WO82/01642叙述了微气泡前体及生产其方法。通过溶解固体材料在液体中形成微气泡。气体填充空隙，其中气体产生于1)从固体前体聚集体微粒间空隙存在的气体中生产的；2)在前体颗粒的表面吸收的；3)前体颗粒内部结构的整合部分；4)当前体与液体发生化学反应时形成的；及5)溶于液体中的和前体溶入其中时释放的。此外，Feinstein在美国专利4,718,433和4,774,958中提出了针对超声目的的白蛋白包被的微气泡的使用。Widder在美国专利4,572,203和4,844,882中公开了一种超声显像方法和一种微气泡型超声显像剂。Quay在WO93/05819中描述了形成了基于已知物理常数标准含特别挑选的气体的微气泡试剂的用途，物理常数包括1)气泡大小；2)气体密度；3)环境介质中气体的溶解性；4)气体进入介质的分散度。Kaufman等在美国专利5,171,755中公开了一种乳化剂，包括高度氟化的有机化合物，基本上没有表面活性或水溶性的油和表面活性剂。Kaufman等也提供了在医疗上使用乳化剂的方法。另一个致力于研究的重要领域是靶定位药物传送领域。靶传送装置是特别重要的，其中毒性是一个问题。特定的治疗剂传送方法有效地用于降低毒副作用为最低水平，降低要求的剂量，减少患者的花费。根据本领域现有的方法和材料，引入遗传物质，例如进入活细胞受到限制而且无效。目前已发现几种不同的机理使遗传物质传送进活细胞。这些机理包括如磷酸钙沉淀和电穿孔、以阳离子聚合体和充水脂质体为载体的技术。这些方法在体内所有都相对无效，只限于用在培养细胞的转染。这些方法中无一有效于定点释放、传送和遗传物质整合于靶细胞。传送治疗药物，例如遗传物质较好的方法，因需要用于治疗各种各样的人和动物疾病。在定性遗传疾病和理解蛋白转录方面已取得长足的进步，但为治疗人和动物疾病在传送遗传物质进入细胞方面进展很小。主要的问题是传送遗传物质从细胞外空间进入细胞内空间或甚至有效地将遗传物质定位在选择的细胞膜表面。在体内已尝试了各种各样的技术，但没有大的成功。例如病素，如腺病素和逆转录病毒用作转送遗传物质进入细胞的载体。已用了整个病素，但能置入病毒囊内的遗传物质的量受到限制，并且有可能由活病毒引起相关的有害作用。可以分离病毒囊中的基本成分并用于携带遗传物质进入选择的细胞。然而在体内，不但传送载体必须识别某种细胞，而且也必须传送至这些细胞。尽管在病毒载体方面做了广泛的工作，但是在体内为传送遗传物质发展一种成功靶定位病毒介导的载体是困难的。通常，含液体的脂质体用于传送遗传物质至培养的细胞内，但是在体内遗传物质的细胞传递基本上是无效的。例如阳离子脂质体转染技术在体内不能有效地发挥作用。需要更有效的方法改善治疗药物，如遗传物质的细胞传送。本专利技术目的如前述，以及超声显像的对比剂和治疗剂有效靶定位传递领域的其它重要需求。专利技术梗概本专利技术提供了制备温度活化的气体前体填充的适用于作超声显像对比剂或药剂传送物的脂质体的方法和设备。本专利技术的方法提供的益处，如在制造温度活化的气体前体填充的脂质体过程中简单、费用很低。制备温度活化的气体前体填充的脂质体的优选方法包括在温度活化的气体前体存在时，温度低于类脂的从凝胶态向液晶态相转变的温度，振荡含类脂的水溶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：艾文C·安格尔，托马斯A·弗里兹，特里·马斯安纳格，瓦瑞德瑞简·拉马斯瓦米，大卫·耶柔赫尔，吴冠礼，
申请(专利权)人：ImaRx药物公司，托马斯A·弗里兹，特里·马斯安纳格，瓦瑞德瑞简·拉马斯瓦米，大卫·耶柔赫尔，吴冠礼，
类型：发明
国别省市：