病毒疫苗佐剂制造技术

本发明专利技术涉及含有效量佐剂的哺乳动物疫苗组合物，其中佐剂含角鲨烯或角鲨烷、甘油和表面活性剂。非强制性地，这些组合物也含铝盐和一种或多种可药用缓冲剂。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于增加哺乳动物疫苗抗原性的新的佐剂。尤其，本专利技术涉及利用角鲨烯或角鲨烷或其混合物、甘油和表面活性剂的新的佐剂。利用四类主要的疫苗来增加哺乳动物，尤其是人的抗疾病抗体。它们是活疫苗、死疫苗或灭活疫苗、亚单位疫苗和类毒素。其中，活疫苗使宿主产生最强的免疫应答。通常将这些活疫苗减毒，使得它们能够增加其对抗原免疫应答的时间，并且不产生通常相关的疾病。通过化学或其它方法来灭活死疫苗，其中所述方法不灭活宿主免疫系统中存在的抗原因子。百日咳和索尔克脊髓灰质炎疫苗是死疫苗的实例。就某些疾病媒介体而言，即使杀伤机体也不能阻止它引起受体不需要的作用。在这种情况下，必须将试剂分裂成本身不是病原体的亚单位或亚部分。这种亚单位疫苗的实例包括某些流感疫苗和某些实验性疱疹病毒和肝炎疫苗。最后，类毒素疫苗是将机体排泄的毒素变成无毒性的，然后用作任何其它抗原因子来刺激对毒素的免疫应答。破伤风类毒素是这种疫苗的实例。不幸的是，亚单位和类毒素疫苗难以提供足够的抗原来触发宿主产生长期的免疫性。因此，由非活性疫苗，尤其是高度纯化的亚单位疫苗诱导的免疫性仅持续1-2年。已经描述了各种佐剂来加强非活性设苗的致免疫性。其中有弗氏完全佐剂。它包含矿物油、水、乳化剂和死结核菌。在有效地用于哺乳动物的很多佐剂中，只有很少一部分，包括氢氧化铝和磷酸铝已广泛地用于人类。由于几种佐剂引起严重的局部反应和全身反应，已拒绝将它们用于人类。其中一些，如含矿物油的弗氏完全佐剂是不能代谢的并且由于可引起实验室动物癌症，被认为可能致癌。因此，需要有效并安全的佐剂，它能够加强疫苗，尤其是目前有效并且可以开发的亚单位型疫苗的作用。本专利技术提供哺乳动物疫苗组合物，它包括灭活的完全或亚单位疫苗或类毒素和佐剂。本专利技术佐剂包含角鲨烯、甘油和表面活性剂的混合物。尤其，第一个佐剂包含这些组分与哺乳动物疫苗的混合物，其中角鲨烯占混合物总量的约1％-40％，甘油占混合物总量的约5％-40％，并且表面活性剂占混合物总量的约0.1％-4.0％。本文所列出的百分数为每种组分的体积百分数并且已知总混合物的剩余百分数由疫苗本身或由疫苗和可有可无的铝盐及本文所述的缓冲剂产生。本专利技术更优选的方面是，佐剂的角鲨烯组分占混合物总量的约2％-20％，甘油占混合物总量的约10％-30％，并且表面活性剂占混合物总量的约0.15％-1.6％。本专利技术进一步更优选的方面是佐剂的角鲨烯组分占混合物总量的约3％-7％，甘油组分占混合物总量的约15％-25％，并且表面活性剂占混合物总量的约0.18％-0.22％。术语角鲨烯是指Merck Index，11th Edition第1383页中所述的化合物，称作(全-E)-2，6，10，15，19，23-六甲基-2，6，10，14，18，22-二十四碳烯，也称为Sinacene和Supraene。角鲨烷也在Merck Index，11th Edition第1383页中提到，称作2，6，10，15，19，23-六甲基二十四碳烷；全氢角鲨烯；十二氢角鲨烯，和Spinacane，可用于代替本文所述的佐剂混合物的角鲨烯组分或与之混合。可用于本配方中的表面活性剂包括但不限制于聚山梨醇酯20(聚氧乙烯20失水山梨糖醇单月桂酸酯)，聚山梨醇酯60，司盘80失水山梨糖醇油酸酯，ICI Americas，Wilmington，DE的产品，由BASF Corporation，Parsippany，NJ生产的CremophorO表面活性剂，和聚山梨醇酯80，已知又称作失水山梨糖醇单-9-十八碳烯酸酯聚(氧-1，2-乙二基)衍生物、聚氧乙烯(20)失水山梨糖醇单油酸酯、失水山梨糖醇单油酸酯聚氧乙烯、Sorlate、吐温80，其中并且表明为每摩尔山梨糖醇或山梨糖醇酐与大约20摩尔环氧乙烷共聚化的山梨糖醇和其酐的油酸酯。聚山梨糖醇酯80是本专利技术优选使用的表面活性剂。本领域技术人员应该理解这些佐剂中的甘油组分是指通过商业渠道可购得的醇，已知也称作1，2，3-丙三醇；glycerin；glycerine；或三羟基丙烷。非强制性地，本专利技术佐剂也可以含有一种或多种可药用的铝盐，如氢氧化铝、磷酸铝或硫酸铝，其重量/体积浓度约为0.1％-2.0％，优选约0.3％-0.7％，最优选约0.5％。氢氧化铝是优选的铝盐。非强制性地，本专利技术佐剂也可以含有一种或多种可药用PH缓冲剂，如磷酸盐缓冲盐水(PBS)、Tris-HCl、枸橼酸盐-磷酸盐缓冲剂、Tricine缓冲剂、Hepes和马来酸盐缓冲剂。如果最终溶液保持在基本等渗条件下，那么，其它的盐如KCl可代替PBS缓冲剂中的氯化钠。优选使用这些缓冲剂来保持佐剂混合物的PH在6.0-8.0之间。优选用灭菌组分来制备本专利技术佐剂或通过已知的热方法或过滤方法来灭菌。佐剂混合物可在4℃下贮存。如果佐剂是非灭菌的，那么要求在4℃下贮存不超过3天。本专利技术微流体化、声处理或均匀化的佐剂的贮备液可在优选-20℃的温度下或更低温度下贮存。本专利技术组合物中所使用的佐剂表现出显著的免疫调节性并且假定这些化合物的辅助作用是其调节免疫应答能力的直接结果。而且，由于这些佐剂组分缺乏产生反应的能力，因此，它们用作疫苗佐剂的适应性甚至进一步加强。也应该注意到，这些佐剂由已知的可注射物质组成并且在商业渠道购得的注射剂中可见到。可通过对所使用的特定疫苗所指定的任何方式来施用本专利技术组合物中所使用的疫苗，优选通过肌肉或皮下注射。所述疫苗可作为兽医用或人用疫苗，并且包括灭活的完全疫苗和亚单位疫苗以及类毒素。而且，使用的疫苗是那些用于抗细菌、立克次氏体和病毒病原体的免疫疫苗。例如，适宜的人用疫苗可包括流感、脊髓灰质炎、虫媒病毒(arbovisus)感染、伤寒和副伤寒、ekolcra、鼠疫、百日咳、斑疹伤寒、Rocky Mountain SpottedFever、B型流感嗜血杆菌、多价肺炎球菌多糖、C组脑膜炎双球菌和新产生的人二倍体细胞狂犬病疫苗和肝炎疫苗的完全疫苗和亚单位疫苗。例如，适宜的兽医用疫苗包括马流感病毒、马疱疹病毒、马脑脊髓灰质炎病毒、疣病毒、足口病病毒、狂犬病、猫总白细胞减少、猫鼻气管炎、猫萼状病毒、传染性牛鼻气管炎、副流感-3、牛病毒性腹泻、牛腺病病毒、假性狂犬病，传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒、犬腺病毒、犬温热病毒和犬副流感的完全疫苗和亚单位疫苗。Strangles、布鲁杆菌病、弧菌病、钩端螺旋体病、梭状芽胞杆菌感染、沙门菌病、大肠杆菌病、微粒孢子虫病、巴斯德菌感染、嗜血杆菌感染、丹毒丝菌等的完全疫苗和亚单位疫苗、菌苗和类毒素。进一步，充分考虑到，由于未来的疫苗(尤其是病毒和细菌亚单位型)可能类似地减弱免疫原，因此要求通过适宜的并且可接受的佐剂来强化，并且可以发现，本专利技术体系是非常适宜的。使用所公开的有效佐剂和疫苗的好处是明显的。通过调节免疫系统的某区域，佐剂可增加体液免疫的免疫反应性，结果在给予受体佐剂和疫苗制剂时，疫苗制剂中所含的抗原物质的抗体的产生增加。当然，这种增加将获得更强和更长久的免疫水平，甚至即使免疫试剂可能是弱的免疫原，如，在很多灭活的完全疫苗、尤其是亚单位疫苗和类毒素中可以看到该作用。这种对抗原免疫应答的加强直接产生这种作用，进一步的好处是可通过使用较少的免疫抗原本文档来自技高网...

【技术保护点】
哺乳动物疫苗组合物，该组合物含灭活完全或亚单位疫苗和有效量佐剂，其中佐剂含角鲨烯的量占组合物总体积的约１％－４０％，含甘油的量占组合物总体积的约５％－４０％，并且含表面活性剂的量占组合物总体积的约０．１％－４．０％。２．权利要求１的哺乳动物疫苗组合物，其中佐剂含角鲨烯的量占组合物总体积的约２％－２０％，含甘油的量占组合物总体积的约１０％－３０％，并且含表面活性剂的量占组合物总体积的约０．１５％－１．６％。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：RN希约思，
申请(专利权)人：美国家用产品公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]