一种改进的合成6,9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5,10-二酮及其二马来酸盐的方法技术

在寻求新的蒽二酮杂环类似物时，６，９－双［（２－氨乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮二马来酸盐（ＢＢＲ，２７７８）被选作最有前途的化合物。新的合成方法产生的这种化合物的纯度大于９９％。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
一种改进的合成6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮及其二马来酸盐的方法背景专利技术的领域Mitoxantrone(Mitox)，一种1，4-双(氨基烷基氨基)蒽-9，10-二酮抗肿瘤药剂，目前在临床治疗白血病、淋巴瘤以及联合治疗晚期乳腺癌和卵巢癌方面占有重要的位置。虽然Mitox与doxorubicim(DX)及其它蒽环类药剂相比较具有改地的耐受特性，但这种药物仍未避免明显的毒性副反应，特别是那些与骨髓抑制和使心脏中毒相关的毒副反应。具体地说，充血性的心力衰竭对以前曾用蒽环类药物治疗过的病人是一种严重的临床影响(近期对Mitoxantrone的治疗和毒理的综述可参见：Faulds，D；Balfour，J.A.；Chrisp，P.；Langtry，H.D.等在Drugs 1991，41，400-449)发表的题为“Mitoxantrone，它的药效学和药物动力学性质以及在癌症化疗中的治疗潜力的综述”的论文。Mitox对细胞破坏的机理从它们的性质上说可能是多种模式的：许多研究工作提出插入DNA内是主要的细胞活动。带有DNA拓扑异构酶II活性的核酸紧贴和干扰导致蛋白质缔合的DNA股的拆开也被提出作为导致Mitox诱导细胞死亡的关键事件。细胞被抗肿瘤的蒽-9，10-二酮类药物毁坏，包括Mitox在内，也被归因于氧化代射。后者导致形成能使DNA烷基化和/或DNA分裂的游离基，产生非蛋白质缔合的DNA股的破碎。然而，一般相信醌部分的还原氧化循环可能对Mitox的心脏中毒副反应比它的抗肿瘤活性的机理更有关系。Mitox和DX的心脏毒性也和邻近的羟基和醌基的金属螯合能力结合在一起。形成药物-金属络合物可通过金属催化型反应而增进氧化还原循环(参看Shipp，N.G.；Dorr，R.T.；Alberts，D.S.；Dawson，B.V.；Hendrix，M.等人在Cancer Res.1993，53，550-556页发表的题为“实验的Mitoxantrone心脏毒性及它在培养的新生老鼠心脏细胞中可被ICRF-187部分抑制的特征”的论文)。Mitox明显的临床活性使得开发第二代蒽二酮类似物成为有吸引力的研究领域。到目前为止，已经进行了许多研究来探索侧链性质的变化-->以及重新布置羟基取代基和/或外侧的侧链。在蒽醌生色团中引入杂原子是相对说来尚未被探索的课题，但这一变化可能明显地影响分子与生物标靶的相互作用。具体地说，蒽醌的杂环类似物；a)应基本保留与母体药物同样的立体的和平面的特征以便于宿主分子识别，诸如DNA嵌入；b)可引入另外的氢键或碱性部位，这两者可能增加药物对DNA亲合力和/或影响与拓扑异构酶II的相互作用。此外，杂环类似物可被赋予改变了的氧化还原性质。已经制备并筛选过一些氮杂类似物(krapcho，A.P.，″6，9-双(取代的氨基)苯并[g]异喹啉-5，10-二酮.PCT Int l.WO92/15300，Sept.17，1992，在此引入作为参考)；A.P.Krapcho等人：″6，9-双[(2-氨基烷基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮，一类新的修筛生色团的抗肿瘤蒽-9，10-二酮类：合成和抗肿瘤评估；J.Med.Chem.(1994)，印刷中。(在此引入作为参考)。在这些化合物中6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮二马来酸盐在抗肿瘤实验模型中表现出最大的活性。6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮二马来酸盐经分别用大鼠和小鼠进行单次和多次治疗后还未发现对心脏组织有任何明显的毒性效应。在用近似于LD10和LD50的剂量对大鼠进行一次治疗以后，化合物6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮二马来酸盐比Mitox诱导出较少的红细胞减少和血小板减少症状。这一有益特性经过对小鼠作重覆治疗并在等活性剂量水平上基于鼠性白血病模型与Mitoxantrone进行对比而得到证实。不幸，这一化合物的化学开发由于该化合物低的纯度(纯度低至96％)而面临着未曾预料到的问题。这种化合物的分析进展指出在制备过程的最后一步中形成了未知的杂质，而且不能通过现今可使用的提纯方法从这种化合物中除去。因为未知杂质的量大于2％，并且这些未知杂质中有一种单独含量就达1.3％，从而使这种化合物的开发受到严重危害，因为按规章的授权要求对未知的杂质进行广泛的研究，如果这后一杂质以这样明显的含量存在的话。本专利技术的概要申请人已经发现新的改进的合成6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮及其二马来酸盐的方法。用本专利技术的这种新-->的改进的合成方法，可以获得纯度大于99％的这种化合物。附图的简单描述图1：HPLC分析，报告本专利技术化合物的-种混合物，有6个峰，以及经鉴定的杂质。图2：用J.Med.Chem或WO92/15300的方法中合成双马来酸盐的先有技术制得的本专利技术化合物的实际样品的HPLC分析。具有长保留时间的峰，即第7，8和9号峰是未知杂质。图3：按照本专利技术的方法A制备的本专利技术化合物的HPLC分析结果。图4：按照本专利技术的方法B制备的本专利技术化合物的HPLC分析结果。本专利技术化合物的合成本专利技术的化合物，6，-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮或它的二马来酸盐可用两种改进的方法来制得，这些方法能生产出纯度很高的化合物。6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮作为游离碱是不稳定的，因为它在溶液中很快地环化而形成化合物1a和1b，由于这两种化合物而在HPLC中形成两个不同的峰(参见图1)。进一步，游离碱很易溶解于水中；这样，它就很难用有机溶剂来提取并且很难操作和提纯。 还有，6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮的其它盐，诸如二盐酸盐，由于固有的酸性太强而在放置时分解。事实上，化合物6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮在酸性pH条件下(低于2.5)即分解而形成化合物2a和2b，即分子中的一个侧链丢失了。化合物2a和2b在HPLC中不能被区分并形成一个单峰(参见图1)。所有上面报告的分解产物都以杂质形式存在于6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮中(参见图2，第3，4和5号峰)。相反，二马来酸盐却被赋予优良的固有稳定性。-->报导合成6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮及其二马来酸盐的先有技术方法可参见：1)WO92/15300和2)A.P.Kr apcho等人“6，9-双[(2-氨基烷基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮类。一类新的生色团改性的抗肿瘤蒽-9，10-二酮类：合成和抗肿瘤评定”，J.Med.Chem.(1994)，印刷中。    所报告的合成方法中是用6，9-二氟苯并[g]异喹啉-5，10-二酮作为关键性的中间体。这种化合物与乙二胺反应产生所需的6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮。另一种报告的方法涉及把6，9-二氟苯并[g]异喹啉-5，10-二酮与单一叔丁氧羰基-乙二胺(BOC-乙二胺本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种合成纯度大于９９％的６，９－双［（２－氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮的方法，该方法包括：ａ）于２．５小时内往温热的（５５℃）乙二胺在ＴＨＦ中形成的溶液中分批加入６，９－二氟苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮；ｂ）混合物在同一温度下搅拌３小时，这时逐渐形成蓝色沉淀；ｃ）在２５℃搅拌过夜之后，在氮气层保护下过滤悬浮液，用ＴＨＦ洗涤并在真空下干燥即产生粗的６，９－双［（２－氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮的二氢氟酸盐；的混合物中以得到深蓝色的溶液，其ｐＨ值约为５，把它在玻璃纤维滤器上过滤；ｅ）滤液在室温逐渐用经过滤的３Ｍ马来酸水溶液处理，使ｐＨ值达到３．５；ｆ）在４０℃放置约３０分钟后，把悬浮液在室温搅拌过夜；ｇ）蓝色沉淀用另外的水和ＥｔＯＨ洗涤，在真空下干燥即给出粗的６，９－双［（２－氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮二马来酸盐；ｈ）把粗的二马来酸盐悬浮在水中并加热到５０℃，保持３０分钟；ｉ）在２５℃搅拌一夜，把悬浮液再次过滤，蓝色沉淀用另外的水洗涤，湿的物料重新悬浮在水中，并在搅拌下于室温保持大约４０小时；ｊ）过滤二马来酸盐，用另外的水和ＥｔＯＨ洗涤，然后在真空下干燥，即产生６，９－双［（２－氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮二马来酸盐。２、一种合成纯度大于９９％的６，９－双［（２－氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０二酮的方法，该方法包括：ａ）把三氟醋酸加到６，９－双［（２－Ｎ－叔丁氧羰基氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮在二氯甲烷中形成的悬浮液中；ｂ）在室温搅拌大约１６小时之后，把反应混合物用ＥｔＯＨ稀释并在真空下浓缩；ｃ）残留的油状物重新用乙醇稀释并再次浓缩到小的体积；水溶液把溶液ｐＨ值调节到４．２单位；ｅ）把得到的深蓝色溶液在玻璃纤维滤器上过滤并与３Ｍ马来酸水溶液混合；把溶液的ｐＨ值重新调节到３．４单元，并在室温混合物搅拌大约４０小时；ｇ）过滤收集粗的马来酸盐并把它重新悬浮在无离子水中，温热到５０℃１小时并在搅拌下于室温保持另外１６小时；ｈ）过滤出深蓝色的固体，用水和乙醇洗涤并在真空下干燥以产生６，９－双［（２－氨基乙基）氨基］苯并［ｇ］异喹啉－５，１０－二酮二马来酸盐。...

【技术特征摘要】
US 1994-3-28 08/220,0071、一种合成纯度大于99％的6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮的方法，该方法包括：a)于2.5小时内往温热的(55℃)乙二胺在THF中形成的溶液中分批加入6，9-二氟苯并[g]异喹啉-5，10-二酮；b)混合物在同一温度下搅拌3小时，这时逐渐形成蓝色沉淀；c)在25℃搅拌过夜之后，在氮气层保护下过滤悬浮液，用THF洗涤并在真空下干燥即产生粗的6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮的二氢氟酸盐；d)把粗产物直接溶解在水和AcOH的混合物中以得到深蓝色的溶液，其pH值约为5，把它在玻璃纤维滤器上过滤；e)滤液在室温逐渐用经过滤的3M马来酸水溶液处理，使pH值达到3.5；f)在40℃放置约30分钟后，把悬浮液在室温搅拌过夜；g)蓝色沉淀用另外的水和EtOH洗涤，在真空下干燥即给出粗的6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮二马来酸盐；h)把粗的二马来酸盐悬浮在水中并加热到50℃，保持30分钟；i)在25℃搅拌一夜，把悬浮液再次过滤，蓝色沉淀用另外的水洗涤，湿的物料重新悬浮在水中，并在搅拌下于室温保持大约40小时；j)过滤二马来酸盐，用另外的水和EtOH洗涤，然后在真空下干燥，即产生6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮二马来酸盐。2、一种合成纯度大于99％的6，9-双[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10二酮的方法，该方法包括：a)把三氟醋酸加到6，9-双[(2-N-叔丁氧羰基氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮在二氯甲烷中形成的悬浮液中；b)在室温搅拌大约16小时之后，把反应混合物用EtOH稀释并在真空下浓缩；c)残留的油状物重新用乙醇稀释并再次浓缩到小的体积；d)往油状残留物中加入去离子水并用20％...

【专利技术属性】
技术研发人员：S施平奈利，R迪多曼尼科，
申请(专利权)人：诺瓦斯制药公司，
类型：发明
国别省市：IT[意大利]