单体胰岛素类似物制剂制造技术

一种具有长效的非胃肠道药物制剂，它主要由约２０Ｕ／ｍｌ－约５００Ｕ／ｍｌ胰岛素类似物的无菌含水悬浮液，约５ｍｇ／ｍｌ－约１０ｍｇ／ｍｌ氯化钢，约０．２－约２．０ｍｇ／ｍｌ生理上容许的缓冲剂，约０．０４ｍｇ／ｍｌ－约２０．０ｍｇ／ｍｌ的锌离子和生理上容许的防腐剂组成，ｐＨ为约６．５－约７．８；这使得悬浮液中存在的类似物处于溶解状态的不到５％。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及人胰岛素单体类似物。更具体地说，本专利技术涉及长效的各种单体类似物非胃肠道制剂。这些制剂延长了药物的作用时间。多年来就知道可以成功地将胰岛素与锌离子共结晶，得到许多种稳定的晶体，它们的药效时间比可溶性或无定形的非晶态胰岛素长。在50年代初期，研制出一种新的牛胰岛素晶体制剂，该制剂在中性pH的乙酸盐缓冲剂中只含胰岛素和锌。Hallas-Mller等，科学(Science)-，116，394-398(1952)。这种胰岛素制剂避免了能与锌离子强烈作用形成不溶性磷酸锌衍生物的磷酸根离子。在乙酸盐缓冲剂中只含晶态胰岛素的制剂被称作Ultralente(超长效的)。用这种方式制得的晶体在本文中称作Ultralente(超长效)晶体。近来，已研制出单体胰岛素类似物，它们保持着天然人胰岛素的生物活性，但是不容易二聚和自缔合成更高分子量的形式。自缔合的减小造成了活性发作更快。这些胰岛素类似物能够迅速吸收，使得注射时间和胰岛素的峰值药效与随用餐而伴生的饭后葡萄糖浓度偏差更为接近。本专利技术提供了具有持久作用的一种单体胰岛素类似物的制剂。因为单体胰岛素类似物不像胰岛素那样聚集的缔合，所以可以形成稳定的类似物晶体这一点相当出乎意料。令人惊奇的是，本专利技术的制剂提供了可预测的延长的作用时间。本专利技术提供了一种长效的非胃肠道药物制剂，它基本上由约20-约500U/ml胰岛素类似物的灭菌水悬浮液，约5-约10mg/ml氯化钠，约0.2-约2.0mg/ml生理上容许的缓冲剂，约0.04-约20.0mg/ml锌离子和一种生理上容许的防腐剂组成，pH约为6.5-约7.8；这使得悬浮液中存在的胰岛素类似物处于溶解状态的不到5％。本专利技术还提供了一种由溶液中沉淀晶体制备的胰岛素类似物晶体，该溶液基本上由约200-约1200U/ml的胰岛素类似物、约50-约100mg/ml的氯化钠、约20-约20.0mg/ml生理上容许的缓冲剂和摩尔量过剩的锌离子组成，pH为约5.0-约6.0。本申请中使用的所有氨基酸缩写均为美国专利与商标局所认可的缩写，如在37C.F.R.§1.822(b)(2)中列出的那些。本文中使用的术语“胰岛素类似物”或“单体胰岛素类似物”是一种二聚或自缔合倾向小于人胰岛素的胰岛素类似物。单体胰岛素类似物是一种其中B28位的Pro被Asp、Lys、Leu、Val或Ala取代，且B29位的Lys是赖氨酸或脯氨酸；去(B28-B30)；或去(B27)的人胰岛素。在Chance等的美国专利申请07/388,201(EPO公布号383 472)和Brange等的EPO申请214 826中有对单体胰岛素类似物的说明，上述文献在本申请中引用作为参考。本领域的技术人员会认识到，可以对这种单体胰岛素类似物进行其它修饰。这些修饰是本领域中广泛采用的，包括在B1位用天冬氨酸代替苯丙氨基酸；用丙氨酸代替B30位的苏氨酸残基；用天冬氨酸代替B9位处的丝氨酸残基；只去掉B1位的或是一并去掉B2位的氨基酸，以及去掉B30位处的苏氨酸。特别优选的单体胰岛素类似物是LysB28ProB29-人胰岛素(B28是Lys；B29是Pro)和AspB28-人胰岛素(B28是Asp)。术语“Utralente胰岛素”是指其中含有胰岛素晶体的制剂，该晶体基本上按照Hallas-Mller等，在科学(Science)，116，394-398(1952)中的叙述在乙酸盐缓冲液中制得。用这种方式制得的晶体以后称作Ultralente(超长效)胰岛素晶体。术语“胰岛素类似物晶体”是指用本文所述方法制得的胰岛素类似物晶体。术语“U”是指胰岛素活性的标准国际单位。本文中所用的“基本上”一词意味着大于约95％，优选大于约98％。例如，基本上晶态意味着结晶度大于95％的物质。本文中的“治疗”一词，描述了为战胜疾病、症状或失调而对患者采取的措施和护理，它包括施用本专利技术化合物以防止症状或并发症的发作，减轻症状或并发症，或消除疾病、症状或失调现象。术语“生理上容许的防腐剂”是指间甲酚、对羟基苯甲酸甲酯、间苯二酚、苯酚或本领域认可的其它防腐剂。术语“生理上容许的缓冲剂”是本领域已知的。生理上容许的缓冲剂包括乙酸 钠或乙酸铵，或者与锌无强烈作用的其它缓冲剂。术语“锌离子”是本领域技术人员所了解的。锌离子的来源优选为锌盐。锌盐的代表性实例包括乙酸锌、溴化锌、氯化锌、氟化锌、碘化锌和硫酸锌。熟练的技术人员会认识到，很多其它的锌盐也可以用来制备本专利技术的制剂。如上面所指出的，本专利技术提供了胰岛素类似物晶体和长效的胰岛素类似物制剂。胰岛素类似物晶体是从溶液中沉淀晶体制得的，所述溶液中基本上由约200-约1200U/ml胰岛素类似物、约50-约100mg/ml的氯化钠、约2.0-约20.0mg/ml的生理上可接受的缓冲剂和摩尔量过剩的锌离子组成，溶液的pH为胰岛素类似物的等电点，通常pH为约5.0-约6.0。胰岛素类似物晶体优选用自溶液中沉淀晶体法制备，该溶液中基本上由约400-约1000U/ml胰岛素类似物、约65-约75mg/ml氯化钠、5.0-约10.0mg/ml乙酸钠和约0.1-约0.5mg/ml锌离子组成，pH约为5.5-约5.9。最好是，胰岛素类似物晶体用从溶液中沉淀晶体法制备，该溶液基本上由400U/ml胰岛素类似物、约70mg/ml氯化钠、约8.0mg/ml乙酸钠和0.15mg/ml锌离子组成，pH约为5.5-约5.6。当把pH调节到胰岛素类似物的等电点时，晶体形成。利用生理上容许的碱(如氢氧化钠)调节溶液的碱度，将pH由较酸性调节到5.0-6.0。类似地，利用生理上容许的酸(如盐酸)调节溶液的酸度，将pH由较碱性调节到5.0-6.0。优选配制两种溶液，它们在合并时形成一种溶液，该溶液基本上由约200-约1200U/ml胰岛素类似物、约50-约100mg/ml氯化钠、约2.0-约20.0mg/ml生理上容许的缓冲剂和摩尔量过剩的锌离子组成，其pH为类似物的等电点。第一种溶液下文称为胰岛素类似物部分，它含有约300-约2000U/ml胰岛素类似物和摩尔量过剩的锌离子，其pH为酸性，约2.0-约3.0。第二种溶液下文称作缓冲剂部分，含有约130-约270mg/ml氯化钠、约5.0-约55.0mg/ml生理上容许的缓冲剂，pH为碱性，约10.5-约12.5。在合并后，溶液的pH平衡到胰岛素类似物的等电点，pH约为5.0-6.0。晶体自溶液中沉淀出来。此溶液下文称作晶体部分。在约5.0-6.0的pH下，晶体在搅拌下于约6-72小时内沉淀。但是，完成晶体生长的准确时间取决于所选择的胰岛素类似物和所采用的条件。所形成的要求保护的晶体是轮廓分明的，形状为菱形。优选向溶液中加入种晶以形成大小分布更均匀的晶态物质并加速晶化。种晶的制备是本领域已知的，可以由人胰岛素、牛胰岛素、猪胰岛素或胰岛素类似物衍生得到。因为单体胰岛素类似物不发生自缔合，故其物理性质和特征与胰岛素不相似。例如，各种单体类似物很少或者不发生Zn诱导的缔合。这与胰岛素显著不同，后者在锌存在下几乎完全是六聚体构型。因为要形成合适的Ultralente胰岛素晶体，每个胰岛素六聚体内至少需要络合两个锌原子，所以在与制备Ultral本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：M·R·德费利皮斯，B·H·弗兰克，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：