白细胞的光照治疗制造技术

公开了一种治疗除逆转录病毒感染之外的单核血细胞感染的方法。也公开了一种调节单核细胞功能的方法。该方法包括用光可激活的化合物处理病人的血，任何紫外光激活光可激活的化合物。在体外照射时，将这样处理的血回注病人。通过这样的处理调节单核细胞的功能。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术背景体外光照治疗(Extracorporeal photopheresis)是如下的一种方法，治疗前两小时，口服给予8-甲氧基补骨脂素(8-MOP，一种天然产生的光敏化合物)，然后抽取患者的血液并抗凝，经离心分离白色血细胞并收集富含白细胞的部分。用紫外A光(UVA)照射含有这些8-MOP的白细胞使得8-MOP与DNA中的嘧啶碱结合或与细胞内或细胞外的蛋白质结合。将所处理的白细胞注回到患者体内，产生免疫调节作用，已发现在临床上对于许多疾病来说都有益处1。有许多认为主要涉及T-细胞或由T-细胞介导的疾病。认为由T-细胞介导的疾病如皮肤T-细胞淋巴瘤、移植后器官同种移植排斥、进行性全身性硬皮病(PSS)、肠炎(IBD)、类风湿关节炎和青少年发作的糖尿病(JODM)。皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)是进行性恶性疾病。治疗方法受到了限制。Edelson等进行了多中心试验2，显示29个红皮病患者中有24个(83％)在其疾病有显著改善。这些阳性反应是在治疗开始后22.4周的中间时间被观察到的。这在临床上是有重要意义的，因为这些病人是患有对以前治疗耐受的疾病的病人，认为这种治疗的预后是差的。另外，可见外周血相关细胞(Sezary细胞)的量减少。统计数据表明与历来少于30个月的存活中值相比，此存活中值有所增加，从治疗开始计超过了60个月。在最初的病人组中，有8个白血病受试者持续减轻。很少有与光照治疗有关的副作用。自身免疫疾病以免疫系统失调为特征，其特征是特异细胞或体液介导病人的特异性器官或组织破坏。所述疾病的例子是类风湿性关节炎和进行性全身硬皮病。类风湿关节炎(R.A.)是一种最终导致关节破坏的炎性疾病并且是涉及许多器官系统的具有普遍性的疾病。有许多用于R.A.的药物，然而需要对疾病具有减轻能力的并有好的耐受力的药物，因为这种疾病是终身的。特别是，在许多开始对R.A.第二次治疗后的病人中可见效力丧失并且疾病发展。许多第二系列的药物是免疫抑制性的并且本身有严重的副作用如感染。极为需要开发更具特异性的、无毒的免疫调节治疗剂3。进行性全身性硬皮病(PSS)是一种结缔组织疾病，其特征是在皮肤和内脏中有炎性和纤维性变化。治疗是困难的。抗炎药物和皮质类固醇对于疾病的早期阶段是有帮助的，但似乎不影响疾病的进展。用D-青霉胺、氨甲喋呤、环孢菌素、钙通道阻滞剂和前列腺素进行试验，但这些药物似乎不影响疾病的总的进展状况。由于认为该疾病是由T-细胞介导的，Rock和同事们用光照来治疗患有PSS的病人4。在该试验中，将56名病人选入随机的非盲临床试验中。与D-青霉胺(对照)组(32％反应率)相比，可见光照治疗组(68％的反应率)明显具有高的反应率。认为青少年发作的糖尿病(JODM)是由免疫系统介导的，它使得胰腺中起产生胰岛素作用的细胞破坏。患有该疾病的病人不仅失去对其血糖浓度的调节，而且该疾病以血管疾病为特征，导致特异性的器官损伤，产生明显的病态并导致死亡。IBD或者限于结肠(溃疡性结肠炎)或影响结肠和小肠。另外，有肠内表现的疾病包括坏疽性脓皮病、结节性红斑(eryythema nodosum)、硬化的胆管炎、类风湿性脊椎炎、肝炎、关节炎、眼色素层炎。IBD包括免疫调节机制的机能障碍，下调对消化产物的免疫反应，同时保持了发展对病原菌产生免疫反应的能力。与UV光激活的氧化补骨脂素(Methoxsalen)接触调整免疫调节功能，使得粘膜T-细胞对常规的微生物抗原的增殖反应的增加比外周(perifeual)T-细胞低。其它T-细胞介导的现象包括宿主对外来组织的排斥。在器官同种移植时，需要预防对移植器官的这种排斥，然而又需要维持免疫系统的功能，以便使身体能抵御感染并具有其它正常的身体防御能力。移植后的常规治疗被局限于免疫抑制法，用来产生常规的免疫抑制状态，对这种治疗产生最常规的副作用，再次感染，其可以是微生物或机会致病菌感染。没有广泛免疫抑制特性的免疫调节应当是更理想的。显示光照治疗是有效的，Loyola大学的研究者们能够用光照方法成功地治疗常规免疫抑制剂无作用的14例中13位心脏排斥顽症。作为这种情况的变化形式，光照方法成功地用于治疗患有慢性移植物与宿主之间的疾病的患者5。这种疾病的特点是产生基因内诱导的免疫机能不全的宿主，具有免疫能力的细胞(骨髓或外周干细胞)被输入这种病人体内以治疗各种恶性肿瘤和白血病。移植的有免疫能力的细胞攻击病人(“宿主”)，并且结果是调节有免疫能力的细胞而没有引起进一步的广泛的免疫抑制及其副作用。光照治疗包括外周血白细胞与紫外A光光照激活的8-甲氧基补骨脂素(8-MOP)在体外接触，然后将处理的白细胞再输回到体内。血中的8-甲氧基补骨脂素分子进入白细胞核并插入双链DNA螺旋中。在体外环境中，长波紫外光直射到UVAR光照系统中的富含白细胞的血液部分。光激活的药物(对光能产生反应)连接到DNA螺旋中的胸苷碱基上。产生交联的胸苷碱基，预防DNA在转录期间的解旋。然后，将血浆和改变的白细胞再输入病人体内。光照损伤的白细胞的回输导致对这些损伤的白细胞的免疫攻击延迟，而另一方面未改变白细胞显示有相同的细胞表面抗原。氧化补骨脂素是一种在Ammi majus(伞形科植物)种子中发现的天然光活性物质。属于补骨脂素类或呋喃骈香豆精类化合物。化学名称为9-甲氧基-7H-呋喃并〔3,2-g〕-苯并吡喃-7-酮。药物制剂是在10ml小瓶中的浓度为20mcg/ml的灭菌液体。氧化补骨脂素的药物代谢动力活性可从研究者的小册子得知6。体外光照化疗的毒性和小猎兔犬中UVADEX和紫外光的不同剂量在研究者的小册子中。UVAR系统治疗由三个阶段构成，包括1)收集血沉棕黄层部分(富含白细胞)，2)照射收集的血沉棕黄层部分，和3)将处理的白细胞回注到体内。收集阶段有血液抽取、离心和回注步骤的6个周期。在每一周期期间，全血在pediatric pheresis bowl中离心并分离。分离后，在各收集周期中贮存血浆(通过UVAR仪器操作员确定每一周期中的体积)和40ml血沉棕黄层。在开始下一收集周期之前，将红细胞和所有其它血浆回注到病人体内。最后，分离总量为240ml血沉棕黄层和300ml的血浆并贮存用于UVA照射。在第一收集周期的血沉棕黄层收集期间开始在照射环境中照射富含白细胞的血液。收集的血浆和血沉棕黄层与200ml肝素化的生理盐水和200mg的UVADEX(水溶性8-甲氧基补骨脂素)混合。该混合物流过层厚1.4mm的PHOTOCEPTOR光活化室，它被插在两边有PHOTOSETTEUVA灯的中间。PHOTOSETTEUVA灯照射UVA透过的PHOTOCEPTOR室的双侧，允许在紫外A光中暴露180分钟，使得每个淋巴细胞平均照射1-2J/cm2。最终血沉棕黄层制剂中估计含有20-25％的总外周血单核细胞并且血细胞比容为2.5％-7％。光活化期后，将其在30-45分钟的时间内回注到病人体内。用于这些技术的系统是已知的，靠它们来体外处理病人的血液。例如，在美国专利4573960-Goss中，给予病人需要光敏化的药物，然后抽取病人的血液并分离其成分。未处理的成分(血红细胞、某些血浆等)被返回病人体内。然后，将病人与治疗装置分离本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗患有单核血细胞感染，非逆转录病毒感染病人的方法，包括 ａ）将光可激活的化合物给予至所述病人的血中，和 ｂ）用能激活所述光可激活化合物波长的光处理至少一部分ａ）步中的所述病人的血。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：SN麦劳林，BC斯托奇，JB泽尔迪斯，
申请(专利权)人：特拉科斯有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]