治疗炎症的方法技术

ＩＬ－１０和类固醇的组合物在制备用于治疗或预防炎症性疾病，特别是脓毒性休克和由自身免疫性疾病引起的炎症性疾病如炎症性肠疾病、类风湿性关节炎、多发性硬化症、葡萄膜炎和牛皮癣的药物中的用途。同时提供药用组合物和含有ＩＬ－１０加至少一种类固醇，例如倍他米松或其衍生物的试剂盒。（*该技术在2017年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利
本专利技术涉及治疗炎症疾病或与炎症有关的疾病，包括脓毒性休克的方法。本专利技术背景免疫系统正常调节自身的机制之一包括称之为细胞因子的蛋白质的产生。细胞因子介导多种免疫/炎症应答。有几种细胞因子，如α-肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-6(IL-6)是由刺激的单核细胞/巨噬细胞产生的，并且与发生于感染和组织损伤期间的许多炎症的、免疫的、血液的和代谢的变化有关[见如Hart等，Proc.Natl.Acad.Sci.86:3803(1989)]。脓毒性休克是以产生炎症性细胞因子为特征的疾病状态的一个实例。它通常是由革兰氏阴性菌血症引起的一种常见的致命的疾病，尽管应用了大量抗生素并加强护理，脓毒症仍同引起脓毒性休克的革兰氏阴性菌血症一样有很高的死亡率[见如Ziegler等，New Eng.J.Med.324:429(1991)；Bone等，New Eng.J.Med.317:653页(1987)；和Kreger等，Am.J.Med 68:344(1980年)]。据报道每年约有近10-30万脓毒症引起的革兰氏阴性菌血症的病例，估计导致3到10万病例死亡[Wolff,New Eng.J.Med.324:486(1991年)]。由于病人状况常很快恶化，脓毒症需要及时治疗。它是住院病人中发病率和死亡率的首要原因。脓毒性休克的症状包括发热或低温、心动过速、呼吸急促、低血压、外周灌注不良或系统性中毒(Ziegler等，Supra)。对脓毒性休克目前探索性的治疗是给予直接对抗肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)和脂多糖(LPS)的抗体。不幸的是，在临床追踪中，这些治疗被证实令人失望，显示出不一致或微不足道的结果[见如Gibaldi,Pharmacotherapy(美国)13:302(1993年)和Colletti等，Crit.Care Nurs.North Am.5:345(1993年)]。因此，需要有效治疗炎症疾病特别是脓毒性休克的方法。本专利技术可治疗或可预防的其它炎症疾病是那些表现出炎症症状的自身免疫性疾病引起的疾病，如炎症性肠疾病、类风湿性关节炎、多发性硬化症、葡萄膜炎、牛皮癣等等。本专利技术概述本专利技术通过提供治疗和预防哺乳动物炎症疾病的方法满足上述需要，所述方法包括给予需要此类治疗的哺乳动物白细胞介素-10和至少一种类固醇的组合物的有效量。具体地讲，本专利技术为哺乳动物的脓毒性休克或自身免疫性疾病，如炎症性肠疾病、类风湿性关节炎、多发性硬化症、葡萄膜炎和牛皮癣的治疗和预防提供了一种方法，该方法包括给予需要此类治疗的哺乳动物白细胞介素-10和至少一种类固醇的组合的有效量。本专利技术也涉及白细胞介素-10和类固醇的组合在生产哺乳动物炎症疾病治疗药物中的用途。本专利技术的另一个方面是包含白细胞介素-10和至少一种类固醇的组合物以及生理上可接受的载体的药用组合物。本专利技术的再一方面是用于治疗和预防哺乳动物炎症疾病的试剂盒，该试剂盒包含与药用载体混合物的白细胞介素-10的有效剂量和与药用载体混合的类固醇有效剂量的组合。插图简述图l说明小鼠灌注小棒杆菌(C.parvum)后，重组白细胞介素-10和/或类固醇倍他米松磷酸盐对体内由LPS(脂多糖)诱导的血清白细胞介素-1的影响。标有双星记号的数据表示其与PBS/Tween/MSA相比，p≤0.05。图2说明小鼠灌注小棒杆菌后，重组白细胞介素-10和/或类固醇倍他米松磷酸盐对体内由LPS诱导的血清白细胞介素-6的影响。标有双星记号的数据表示其与PBS/Tween/MSA相比，p≤0.01。图3说明小鼠灌注小棒杆菌后，重组白细胞介素-10和/或类固醇倍他米松磷酸盐对体内由LPS介导的血清TNF-α的影响。标有双星记号的数据表示与PBS/Tween/MSA相比，p≤0.01。图4说明小鼠灌注小棒杆菌后，重组白细胞介素-10和/或类固醇倍他米松磷酸盐对体内由LPS诱导的血清INF-γ的影响。标有双星记号的数据表示与PBS/Tween/MSA相比，p≤0.01。图5说明了另一个实验的结果，即应用倍他米松磷酸盐和重组人白细胞介素-10组合(本专利技术)、单用白细胞介素-l0和单用倍他米松磷酸盐对小鼠四种血清细胞因子的抑制平均值。本专利技术详述此处所有引证的参考资料通过引用结合到全文中。此处所用的“白细胞介素-10”或“IL-10”被定义为一种蛋白质，该蛋白(a)如美国专利第5231012号中所公开的成熟白细胞介素-10的氨基酸序列(如缺乏一段分泌前导序列)，和(b)具有与天然白细胞介素-10相同的生物学活性。同时也包括突变蛋白和其他类似蛋白，包括保留有白细胞介素-10生物学活性的埃-巴二氏病毒蛋白BCRF1(病毒白细胞介素-10)。适于本专利技术中应用的白细胞介素-10能够从可分泌该蛋白的活性细胞的条件培养基中获得，并通过标准方法纯化。此外，可用本领域中已知的标准技术化学合成白细胞介素-10或其活性片段(参见Merrifield,Science 233:341(1986)以及Atherton等Solid Pllase PeptideSynthesis:A Practical Approach,1989年，I.R.L.出版，牛津)。也可参见美国专利第5231012号)。更优选的方法是通过分离的编码白细胞介素-10多肽的核酸的重组技术获取所述蛋白质或多肽。分子生物学的通用方法在如Sambrook等的Molecular Cloning,A Laboratory Mallual(冷泉港，纽约，1989年第二版)和Ausubel等(编辑)的Current Protocols in Molecular Biology(Greern/woley，纽约，(1987年和增刊))中均有记载。利用标准技术可自基因组文库或cDNA文库中获得合适的序列。可以应用聚合酶链反应(PCR)技术(参见PCR Protocol:Guide to Methods and Applications,1990年，Innis等(编辑)，纽约学术出版社，纽约)。基因文库由提取自合适细胞中的核苷酸构成(参见美国专利第5231012号，它公开了制备白细胞介素-10的重组方法)。蛋白质的有用的基因序列可在如各种序列数据库中发现，如GenBank和BMPL或核苷酸和PIR和Swiss-Prot,c/o intelligenetics,Mountain View，加里福尼亚，或Genetics Computer Group University Wisconsin BiotechnologyCenter Madison Wisconsin。含有编码人白介素-10序列的克隆株被贮存于American TypeCulture Collection(ATCC),Rockville,Maryland，编号为68191和68192。如果应用表达载体，对含有编码白介素-10序列的其它克隆的鉴定，可以通过核酸杂交或可采用编码蛋白的免疫学检测来完成。以美国专利号5231012公开的贮存序列为基础制备的寡核苷酸探针是非常有用的。寡核苷酸探针序列也可以从其它种属的相关基因的保守区获得。或者可采用以白介素本文档来自技高网...

【技术保护点】
ＩＬ－１０和类固醇组合在生产治疗或预防哺乳动物炎症性疾病的药物中的用途。

【技术特征摘要】
US 1996-5-3 08/642,8161．IL-10和类固醇组合在生产治疗或预防哺乳动物炎症性疾病的药物中的用途。2．权利要求1的用途，其中所述炎症性疾病是脓毒性休克或自身免疫性疾病。3．权利要求1或2的用途，其中所述炎症性疾病是脓毒性休克。4．权利要求1-3中任一项的用途，其中IL-10为人IL-10。5．权利要求1-4项中任一项的用途，其中所述类固醇是糖皮质激素。6．权利要求1-5项中任一项的用途，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：SR史密斯，SK纳鲁拉，
申请(专利权)人：先灵公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]