用于传染病检测和诊断的方法和组合物技术

提供了用于传染病检测和诊断的方法和组合物。特别是提供了用于活动期分枝杆菌疾病检测的有效和灵敏的方法和组合物，用于区分患有活动期疾病的个体与已经在免疫学上接触过的个体，例如被分枝杆菌感染过但没有活动期疾病的个体或已经进行过ＢＣＧ疫苗接种的个体。该方法包括将用于透皮释放的抗原组合物局部用药。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
用于传染病检测和诊断的方法和组合物有关申请的交叉引用本申请要求1998年2月6日提交的美国临时申请60／073911和1998年8月11日提交的美国临时申请60／096140的优先权。专利
本申请涉及用于检测和诊断传染病的方法和组合物。确切地说，本专利技术涉及包含分枝杆菌抗原的透皮释放系统或装置，其中该系统或装置的用药刺激产生免疫应答，后者对活性分枝杆菌感染的检测和诊断来说是足够的。专利技术背景传染病的检测通常是利用监测免疫应答的试验来完成的。不过在很多情况下，这些试验是麻烦的，经常得出不一致的结果。另外，对生活在不发达地区的个人来说，缺少高级实验室设备，通常降低了试验的有效性，不相称的是在这些地区传染病的发病率可能较高。传染病的准确诊断和检测不仅对于治疗、而且对于预防发病和疾病传播来说也是重要的。对于灵敏和准确的检测方法的需求目前已经变得特别明确，尤其根据由分枝杆菌等引起的感染不断增加来说更是如此。分枝杆菌感染通常表现为结核等疾病。由分枝杆菌引起的人感染自古已经广为传播，结核在今天仍是一个引起死亡的原因。尽管至少自从十九世纪中叶以来发病率随着生活水平的提高而下降，不过分枝杆菌感染仍然构成医学资源有限的国家一个引起发病和死亡的原因，可导致无免疫应答患者压倒多数的广为传播的疾病。尽管世界上多数卫生组织都作出了努力，也从没有实现分枝杆菌疾病的根除，或者接近根除。世界人口几乎三分之一被结核分枝杆菌复合物感染，普遍称-->之为结核(TB)，每年新增大约八百万患者，并且每年有三百万患者死于TB。经过几十年的下降，TB又在上升。在美国，多达一千万人据信被感染。据报道1990年新增近28000例，比1989年增长9．4％。从1985年到1990年增长了16％。生活状况和分享空间过于拥挤更有助于TB的传播，例如在美国观察到在监狱囚犯和大城市的无家可归者当中发病增加。所有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者的大约一半将会感染分枝杆菌，其中TB是尤其具有毁灭性的并发症。AIDS患者临床发展为TB的风险更高，并且抗TB治疗似乎没有对非AIDS患者那么有效。因此，感染通常发展为致命的广为传播的疾病。在折磨AIDS患者的机会感染中逐渐发现了除结核分枝杆菌以外的分枝杆菌。来自胞内鸟分枝杆菌复合物(MAC)的生物体、尤其是第四和第八血清型，占来自AIDS患者的分枝杆菌隔离种群的68％。发现了庞大数量的MAC(多达1010个耐酸杆菌每克组织)，因此，感染的AIDS患者预后不良。世界卫生组织(WHO)继续支持对抗TB的战斗，推荐了主动预防措施，例如“致免疫法的扩展程序”(EPI)，和主动治疗应变性措施，例如“接观察的短期治疗”(DOTS)。对TB的根除来说，诊断、治疗和预防是同等重要的。活动期TB患者的快速检测有利于早期治疗，而通过早期治疗，治愈率预期为90％。因此，早期诊断对于对抗TB的战斗来说是关键的。另外，治疗应变性不仅确保消除感染，而且减少耐药菌株的出现。耐药性结核分枝杆菌的出现是极为令人不安的现象。新增TB病例证实耐受至少一种标准药物的速度从二十世纪八十年代的10％增加到1991年的23％。因此，治疗方案的应变性在为消除TB和防止耐药菌株的出现所作的努力中也起决定性作用。尽管已经鉴别出37种以上的分枝杆菌，不过所有人感染的95％以上都是由六种分枝杆菌引起的：结核分枝杆菌、胞内鸟分枝杆菌、堪-->萨斯分枝杆菌、偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌和麻风分枝杆菌。最普遍的人分枝杆菌疾病是结核(TB)，引起结核的分枝杆菌菌种包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌或非洲分枝杆菌(Merck Manual 1992)。感染通常开始于吸入传染性粒子，它能够到达肺内末端路径。在被肺泡巨噬细胞吞噬后，杆菌能够自由地复制，最后破坏吞噬细胞。继而发生级联效应，其中，吞噬细胞被破坏，导致另外的巨噬细胞和淋巴细胞移行到感染部位，在这里它们也最终被消除了。在最初阶段，疾病通过被感染的巨噬细胞进一步传播，因为被感染的巨噬细胞游走到局部淋巴结，以及进入血流和其他组织，例如骨髓、脾、肾、骨和中枢神经系统(参见Murray等《医学微生物学》The C．V．Mosby Company 219-230(1990))。对引起分枝杆菌毒性的因素尚不清楚。很多研究暗示，细胞壁脂质和细菌表面是引起菌落形态和毒性的因素。有证据表明，在某些分枝杆菌细胞表面上的C-分枝菌糖苷脂具有重要的促进巨噬细胞内生物体存活的作用。对于其他分枝杆菌，暗示为海藻糖-6，6’-二分枝菌酸酯，它是一种索状因子。菌落形态与毒性的相互关系在鸟分枝杆菌中特别明显。鸟分枝杆菌以几种显著的菌落形式存在。在常规实验室培养基上长成透明或粗糙菌落的杆菌能够在组织培养物中的巨噬细胞内繁殖，在被注射到易感小鼠体内后是有毒性的，对抗生素是耐受的。保持在实验室培养基上的粗糙或透明杆菌通常自发地呈现不透明的菌落形态，此时它们不能在巨噬细胞内生长，对小鼠是无毒的，对抗生素是高度易感的。透明、粗糙和不透明的鸟分枝杆菌菌株之间的菌落形态差异几乎肯定是由一种糖脂的存在而引起的，该糖脂包被在透明和粗糙生物体的表面上，起到保护荚膜的作用。这种荚膜或包被主要是由C-分枝菌糖苷脂组成的，它显然保护了毒性鸟分枝杆菌生物体不受溶菌酶和抗生素的作用。相形之下，鸟分枝杆菌的无毒的不透明形式在其表面几乎不含有C-分枝菌糖苷脂。对抗生素的耐受性和对被巨噬细胞杀死的耐受性都已被认为是鸟分枝杆菌表-->面上的糖脂屏障。分枝杆菌感染的诊断是通过病原体的分离和鉴别而得以确认的，不过常规诊断是基于唾液涂片、胸部X-射线检查(CXR)和临床症状的。培养基上分枝杆菌的分离需要长达四至八周的时间。菌种鉴别进一步需要两周。另有其他若干用于检测分枝杆菌的技术，例如聚合酶链反应(PCR)、结核分枝杆菌直接试验或放大的结核分枝杆菌直接试验(MTD)，以及利用放射性标记物的测定法。一种广泛用于检测由结核分枝杆菌引起的感染的诊断试验是结核菌素皮肤试验。尽管可以得到多种版本的皮肤试验，不过通常使用这两种结核菌素抗原制剂之一：旧结核菌素(OT)或纯化蛋白衍生物(PPD)。将抗原制剂皮内注射到皮肤内，或者局部用药，然后利用一种多叉接种器侵入性地转运到皮肤内(Tine试验)。皮肤试验诊断方法存在几个问题。例如，Tine试验一般是不被推荐的，因为注射到皮内层的抗原量不能精确地加以控制(参见Murray等《医学微生物学》TheC．V．Mosby Company 219-230(1990))。尽管结核菌素皮肤试验是广泛使用的，不过它们通常需要2-3天才能产生结果，很多时候结果是不准确的，因为已经接触分枝杆菌但仍健康的受试者有时见到假阳性。另外，经常发生误诊，这是由于不仅活动期TB患者观察到阳性结果，而且BCG-疫苗接种过的人员和已经被分枝杆菌感染但还没有发展为疾病的人员也观察到阳性结果。因此，通过结核菌素皮肤试验难以区分活动期TB患者和其他人，例如家庭TB接触人。此外，结核菌素试验通常引起被除结核分枝杆菌以外的其他分枝杆菌(MOTT)感染的个体的交叉反应。目前可得到的利用皮肤试验所进行的诊断经常引起误差和错误。需要有效的试验，用于检测分枝杆菌感染的存在。特别是不需要侵入受试者皮肤表面的试验，将减少对本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于诊断传染病的透皮释放装置，包括一种组合物的局部用药，该组合物包含抗原和生理学上有效的溶液。

【技术特征摘要】
US 1998-2-6 60/073,911;US 1998-8-11 60/096,1401、用于诊断传染病的透皮释放装置，包括一种组合物的局部用药，该组合物包含抗原和生理学上有效的溶液。2、权利要求1的装置，其中的装置包括一种选自由医用胶带、医用橡皮膏、纱布、TORII绷带、Finn-chamber和Perm-aide S．组成的组中的材料。3、权利要求2的装置，其中的抗原是来源于分枝杆菌菌种的，包括结核分枝杆菌复合物、胞内鸟分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌、麻风分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌。4、权利要求3的装置，其中的抗原包含MPB44、MPB45、MPB51、MPB59、MPB64、MPB70、MPB80或MPB83。5、权利要求1的装置，其中的生理学上有效的溶液包含表面活性剂、缓冲剂或溶剂。6、权利要求5的装置，其中的生理学上有效的溶液包含磷酸盐缓冲溶液，其中包含吐温20、吐温40、吐温60或吐温80。7、权利要求2的装置，其中的抗原包含MPB64，生理学上有效的溶液包含磷酸盐缓冲溶液和吐温80。8、权利要求7的装置，其中的传染病包括结核。9、检测活动期疾病的方法，包括通常将透皮释放装置施用到皮肤上，其中所述的装置包含一种抗原组合物；在预定时间阶段后除去所述的透皮释放装置；观察皮肤的免疫应答；和使免疫应答的存在与活动期疾...

【专利技术属性】
技术研发人员：中村玲子，
申请(专利权)人：日本BCG制造株式会社，中村玲子，
类型：发明
国别省市：JP[日本]