IL-12对新生儿免疫的刺激制造技术

本发明专利技术涉及一种诱导产生抵抗新生儿宿主的病原体的类Ｔｈ１应答的方法，其包括给药新生宿主有效量的ＩＬ－１２和病原体的抗原。本发明专利技术也包括一种克服暴露于病原体或抗原的新生宿主中干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）表达抑制的方法，其包括给药新生宿主有效量的ＩＬ－１２和抗原。本发明专利技术也涉及一种增强细胞因子表达抵抗或在新生宿主中对病原体进行应答的方法，其包括给药新生宿主有效量的ＩＬ－１２和病原体的抗原。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
Il－12对新生儿免疫的刺激的制作方法相关申请本申请是一个基于申请日为1998年3月5日的美国专利09/035，593的部分继续申请，该在先申请的全部内容在此通过引用被合并于本文。
技术介绍
传统上新生儿的免疫系统被认为是未发育完全的且在功能上依赖母亲的抗体来用于保护以抵抗致病生物。事实上，伯涅特和芬乃尔(Burnet，F.M.and Fenner，F.，Macmillan，Melbourne)在《抗体的生产》中[The Production of antibodies，102-105(1949)]认为对人类新生儿接触包括传染性因子在内的抗原，将诱导产生一种对这些抗原的特殊的免疫耐受状态。在后来麦德瓦尔和其同事[Medawar and colleagues，Billingham，R.E.et.al，Nature，172603(1952)]通过暴露于外源白细胞的新生小鼠能够如同成年鼠一样从相同的供体中接受外源组织从而为这个假说提供了实验证据。在新生儿的免疫系统中诱导对病原体的免疫性的有效的方法是急切需要的。专利技术的概述本专利技术涉及一种增强新生宿主(例如诱导)的免疫应答的方法，在一个实施例中，本专利技术涉及一种在新生宿主(哺乳动物，包括人类)中诱导免疫反应的方法，其包括向宿主给药有效量的IL-12和病原体的抗原(例如蛋白，碳水化合物，脂类，重组DNA，所有的生物，毒素，有机分子)。在另一个实施例中，本专利技术涉一种新生宿主增强对病原体免疫应答的方法，其包括给药宿主有效量的IL-12和病原体的抗原。如同这里所述，新生儿的被诱导或增强的免疫应答可以是，例如一种细胞因子免疫应答和/或一种体液免疫应答(例如抗原-特异性)。本专利技术也涉及一种在宿主中诱导细胞因子应答抵抗病原体的方法，其包括给宿主给药有效量的IL-12和病原体的抗原。本专利技术也包括一种克服干扰素-γ(IFN-γ)在新生宿主中表达的抑制的方法，其包括给宿主给药有效量的IL-12和病原体的抗原。本专利技术也涉及一种增强新生宿主的细胞因子表达或对病原体的应答的方法，其包括给宿主给药有效量的IL-12和病原体的抗原。在新生宿主中诱导对病原体的免疫应答的方法和组合物是急切需要的。本专利技术提供了在新生宿主中增强免疫性和诱导保护应答的方法及组合物。 附图说明图ⅠA-ⅠC是血清稀释度相对于光密度(O.D.)的对数曲线，其显示IL-12对新生儿DNP结合不完全Freund｀s佐剂(IFA)中的DNP-OVA加上IL-12(黑色三角形)或IFA中的DNP-OVA加上磷酸盐缓冲液生理盐水(PBS)载体(空心的环)或仅在PBS载体(空心的方形)中的DNP-OVA注射的小鼠中的接触卵清蛋白(DNP-OVA)后的血清抗-二硝基半抗原(DNP)水平的影响；每一曲线代表来自各自小鼠的血清的集合；小鼠在5-6周龄后用带有DNP-OVA的完全Freund佐剂(CFA)攻击，然后七天后通过ELISA检测血清的抗DNP抗体；用DNP-OVA和IL-12接触抗原与用DNP-OVA和PBS接触抗原的小鼠的IgG2a以及IgG2b在p＜0.05时的差别是显著的。图1D-1F是血清稀释度相对于O.D的对数曲线。显示了在用带有HEL的IFA加上IL-12(实三角)，带有HEL的IFA加上PBS载体(空圆环)或仅PBS载体(空方形)感染的小鼠的接触+/-IL-12的HEL后，其IL-12对血清抗-鸡白蛋溶菌酶(HEL)的影响；每一曲线代表来自各自小鼠的血清的集合；小鼠5-6周龄后用带有HEL的CFA攻击然后七天后通过ELISA检测血清的抗HEL抗体；用HEL与IL-12和用HEL与PBS接触过抗原的小鼠之间的集合的差异其IgG1在p＜0.05是显著的。图2A-2C是血清稀释度相对于O.D的对数曲线。显示了在用带有DNP-OVA的明矾加上IL-12(实三角)，带有DNP-OVA的明矾加上PBS载体(空圆环)或仅PBS载体(空方形)感染的小鼠的DNP-OVA经过接触+/-IL-12后，其IL-12对血清抗-DNP水平的影响；每一曲线代表来自各自小鼠的血清的集合；小鼠5-6周龄后用带有DNP-OVA的CFA攻击然后七天后通过ELISA检测血清的抗-DNP抗体；用DNP-OVA与IL-12和用DNP-OVA与PBS接触过抗原的小鼠之间的集合的差异对于所有的同位型在p＜0.05是显著的。图3A-3B是血清稀释度相对于405nm O.D.的对数曲线。显示了皮下在用带有DNP-OVA的明矾加上IL-12(实三角)，带有DNP-OVA的明矾加上PBS载体(空圆环)或仅PBS载体(空钻石形)感染怀孕的小鼠的影响；小鼠9-10周龄后用带有DNP-OVA的明矾攻击，七天后通过ELISA检测血清的抗-DNP抗体；每一曲线代表来自各自小鼠的血清的集合。图4A-4B是血清稀释度相对于405nm O.D.的对数曲线。显示了在新生儿HANA接触+/-IL-12后，IF-12对得自流感病毒(HANA)的血清抗-纯化血球凝集素和神经氨酸苷酶的水平的影响，小鼠在1天龄时用带有HANA的明矾加上IL-12(实三角)，带有HANA的明矾加上PBS载体(空圆环)或仅PBS载体(空方形)注射；所有的小鼠5-6周龄后用带有HANA的明矾攻击然后七天后通过ELISA检测血清的抗-HANA抗体；每一曲线代表来自各自小鼠的血清的集合。图5A-5D曲线显示了在用带有H1N1的明矾加上IL-12(实三角)，带有H1N1的明矾加上PBS载体(空圆环)或仅PBS载体(空方形)感染的小鼠的H1N1经过接触+/-IL-12后，IF-12对血清抗-H1N1水平的影响；所有的小鼠5-6周龄后用带有H1N1的明矾攻击，然后七天后使用H1N1包被的微滴度平板通过特异性同型ELISA来检测血清。血清稀释液的相应滴度给出了50％的最大集合。每一符号代表各自小鼠的结果。出生时用H1N1±IL-12接触抗原的小鼠与仅用PBS载体接触抗原的小鼠在p＜0.05时其总Ab，IgM，IgG1和IgG2的差异是很明显的。出生时用H1N1和IL-12接触抗原的小鼠与用H1N1与PBS载体接触抗原的小鼠在p＜0.05时的IgG2的差异是很明显的。图6A-6B曲线显示在出生时用流感亚疫苗加IL-12共同给药增强了随后流感病毒感染的保护。一天龄的小鼠用带有H1N1的明矾加上IL-12(实三角)、疫苗加上PBS载体(空圆环)或仅PBS载体(空方形)免疫。所有的小鼠(每组7-8只)用103 pfu的MPRI8/345流感病毒鼻内攻击4-5周。每天监测小鼠精神和体重的减轻。在出生后即严格共同给药带有H1N1的明矾加上IL-12h和那些严格的在出生后只给H1N1或只给PBS载体的小鼠相比其生存力的差别在p＜0.05时是显著的。图7曲线显示了从出生时即用流感病毒亚基加IL-12对小鼠进行免疫的血清进行被动转移增强了对流感病毒攻击的保护。收集分别用带有H1N1的流感病毒疫苗亚基加IL-12(闭三角)，疫苗加PBS(闭环)或只用PBS载体(空心方形)免疫小鼠的血清。混合血清用无菌PBS进行1∶5的稀释，然后用0.1ml/每鼠的剂量i.p.注射。所有的小鼠(每组8只)用A/PR/8/34的103 pfu流感病毒鼻内攻击6小时本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种诱导在新生动物宿主中诱导对病原的免疫反应的方法，包括给药新生动物宿主有效量的白介素－１２和病原抗原。

【技术特征摘要】
US 1998-3-5 09/035,5931．一种诱导在新生动物宿主中诱导对病原的免疫反应的方法，包括给药新生动物宿主有效量的白介素-12和病原抗原。2．根据权利要求1的方法，其中的抗原选自细菌，病毒，寄生物，真菌和酵母。3．根据权利要求2的方法，其中的细菌选自；芽孢杆菌属(bacillus)，B群链球菌(Group B streptococcus)，博代菌属(Bordetella)，李斯特菌属(Listeria)，Bacillus anthaacis，肺炎链球菌(S.pneumoniae)，脑炎病菌(N.Meningiditis)和流感病毒(H.Influenza)。4．根据权利要求1的方法，其中的免疫应答是细胞因子反应。5．根据权利要求4的方法，其中的细胞因子反应导致干扰素-γ和白介素-10的增强表达。6．根据权利要求1的方法，其中的免疫反应是体液反应。7．根据权利要求6的方法，其中的体液反应导致宿主IgG1、IgG2a和IgG2b抗体水平的增强表达。8．一种在新生动物宿主中增强免疫反应的方法，包括给药新生动物宿主有效量的白介素-12和病原抗原。9．权利要求8的方法，其中的抗原选自细菌，病毒，寄生物，真菌和酵母。10．权利要求9的方法，其中的细菌选自；芽孢杆菌属(bacillus)，B群链球菌(Group B streptococcus)，博代菌属(Bordetella)，李斯特菌属(Listeria)；Bacillus anthaacis，肺炎链球菌(S.pneumoniae)，脑炎病菌(N.Meningiditis)和流感病毒(H.Influenza)。11．根据权利要求8的方法，其中的免疫反应是细胞因子反应。12．根据权利要求11的方法，其中的细胞因子反应导致干扰素-γ和白介素-10的增强表达。13．根据权利要求8的方法，其中的免疫反应是体液反应。14．根据权利要求13的方法，其中的体液反应导致宿主IgG1、IgG2a和IgG2b抗体水平的增强表达。15．一种在新生动物宿主中诱导对于抗原的细胞因子反应的方法，包括给予新生动物宿主有效...

【专利技术属性】
技术研发人员：丹尼斯W梅特泽杰，伯纳德P阿鲁兰达姆，
申请(专利权)人：俄亥俄医学院，
类型：发明
国别省市：US[美国]