FSH和FSH变体制剂,产品和方法技术

本发明专利技术涉及包含于制剂和制成品中的含有α亚基和β亚基的ＦＳＨ和ＦＳＨ变体。本发明专利技术提供了优越的新的蛋白和核酸，蛋白和核酸的多用途的药用溶剂，制剂，现有的商售制品没有被证明有如此长期的用途的性能。该产品特别适用于一段时间的治疗后，提高ＦＳＨ和ＦＳＨ变体的血液浓度。因此本发明专利技术满足了ＦＳＨ和ＦＳＨ变体的便利产品的需求。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及到该领域已知的促卵泡激素(FSH)或促卵泡激素变体(FSH变体)的新制剂，制成品和使用制剂的方法。本专利技术还提供了有益的、多用途和稳定的溶液、制剂和医药产品，它们以前从未用于医疗。这些制剂和产品对于以在一段治疗时期增加FSH或FSH变体的血清含量为目的的治疗服法尤其有用。这样，本专利技术尤其满足了在不育治疗中对于含有FSH或FSH变体的方便稳定和防腐的溶液，制剂和产品以及对它们的使用的需求。
技术介绍
FSH可用于不育症。患者通过每天或两天一次的肌肉(IM)或皮下(SC)注射给药，注射量随其反应而调整，通常为75-300IU/天。FSH的半衰期很短，使得患者必须连续进行几天注射，视其卵巢和睾丸反应每天或两天一次。一种更稳定的FSH或FSH变体的制剂可提高其在治疗中的应用。尽管FSH从未通过除IM或SC以外的获准给药方式进行给药，其他的药用蛋白可在较长的一段时期内给药。包括常规IM或SC注射、透皮贴剂(transdermal patches)、植入物、渗透泵、微型泵、药筒(cartridge)、肺送递系统及其它方式在内的送递方法均可在诸如辅助患者适应，降低不适或辅助给药等方面具有作用。这些长期的治疗服法通常需要稳定的溶液或制剂中加入防腐剂。防腐剂一方面防止或尽可能将的制剂中的有害微生物污染。对于传统的非蛋白治疗剂，抗微生物防腐剂如双氯苯双胍己烷、苯酚、苯乙醇、邻甲苯酚、间甲苯酚、对甲苯酚、氯甲酚、硝酸苯汞、硫柳汞、苯甲酸、烷基对羟基苯甲酸酯(甲基、乙基、丙基、丁基及其他类似基团)、氯下烷铵、氯化苄乙氧铵、sodium dehydroacetate andthimerosal及其各种混合物通常加入制剂以确保其在销售期间和/或多种服用时无菌(Akers,MJ,Pharmaceutical Sciences,17thedition.,Mack,Easton,PA.,1279-1280,1985)。这一大类防腐剂对蛋白质的稳定有害。例如，十分有效的防腐剂间甲酚据报道可同蛋白质结合并使之变性(Development of PharmaceuticalParenteral Dosage Forms,Bontempo,ed.,Marcel Dekker,Inc.,New York,New York,pp.118-119,1977)。诸如人类生长激素这样的激素溶液的稳定性还面临着特殊的困难(Maa YF and Hsu C,International Journal of Pharmaceutics,140,pp.155-168,1996)。FSH是异二聚体糖蛋白激素家族中的一员，该家族包括促甲状腺素(TSH)、绒毛膜促性腺激素(CG)和黄体生成素(LH)(Pierce JGand Parsons TF,Annu.Rev.Biochem.,50,465-495,1981；Baenziger and Green,Biochem.Biophys.Acta.,947,287-306,1988)。本家族的成员为异二聚体，通过非共价作用将两个不同的亚基结合在一起。人FSH(hFSH)二聚体包括(ⅰ)一条成熟的92氨基酸的α亚基，它是人类家族其它成员(如，绒毛膜促性腺激素(“CG”)、黄体生成素(“LH”)和促甲状腺素(“TSH”))所共有的；(ⅱ)一条成熟的111氨基酸的β亚基，它为FSH所特有(Shomeet al.,J.Clin.Endocrinol.Metab.39:187-205(1974)；Shome,et al.,Prot.Chem.,7:325-339,1988)。α和β亚基非共价结合，这使得该结合被认为对蛋白质去稳定剂更敏感。人类或其它哺乳类的天然FSHα和β亚基氨基酸序列以及这些序列的一些变体在1982年以前便已了解得很清楚，人类或其它哺乳类活性FSH在哺乳细胞中的克隆和表达在1985年以前便已完成。从纯化的蛋白中对光有的促性腺激素α亚基(FSHα)进行测序(Bellisarioet al.,J.Biol.Chem.248:6796(1973)；Morgan et al.,J.Biol.Chem.250:5247(1973))随后将其克隆并表达(Fiddes et al.,Nature 281:351(1979)；Nature 286:684(1981)；J.Molec.Appl.Genet.1:3-18(1981))。FSHβ亚基也从纯化的蛋白中进行测序(Shomeet al.,J.Clin.Endocrinol.Metab.39:187(1974)；Saxena et al.,J.Biol.Chem.251:993(1976))；(Sairam et al.,Biochem.J.197:541(1981)；Fujiki et al.,Biochem.Biophs.Acta624:428(1980))。Integrated Genetics报道了人类CG的重组表达(Biotechology Newswatch(p.3,June 20,1983)；Chemical andEngineering News 61:47(Nov.21,1983)；Genetic Technology News3:9(Dec.12,1983))以及它的活性形式(biotechnology Newswatch,Jan.16,1984),也报道了FSH的成功克隆(Genetic EngineeringNewsletter 4:4(August 10,1984))和重组FSH在哺乳类细胞中的活性形式(DNA 4:76(Jan.16,1985))。Amgen还报道了活性牛LH在CHO细胞中的表达(Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:7280(Nov.1985))。有相当多的文献证据表明异源二聚体蛋白激素可在生理或酸环境中解聚(Ryan,R.J.,et al.,Recent Progr.Hormone Res.26:105-137；1970,Strickland,TW and Puett,D,J.Biol.Chem.,257:2954-2960；1982,Reichert LE and Ramsey Rb,J.Biol.Chem.,250:3034-3040；1975)。完整的二聚体对于FSH的生物活性和分泌是十分重要的(Baenziger JU and Green ED,Biochem.Biophys.Acta,947:287-306,1988；Corless,et al.,J.CellBiol.,104:1173-1181,1987)。降低FSH的不稳定性的尝试包括将两亚基合并到一个稳定分子中以产生一个单链分子，以及产生额外的二硫键以稳定两亚基间的相互作用(Sughara T.,et al.,J.Biol.Chem.,271:10445-10448,1996；Heikoop J.C.,et al.,NatureBiotech,15:658-62,1997)。Donaldson，美国专利号No.5,162,306，直接相关于包括FSH和LH的兽用组合物。这些组合物在麝香草酚(5-甲基-2(1-甲基乙基)苯酚)中表本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有包括一个α亚基和一个β亚基的ＦＳＨ或ＦＳＨ变体以及防腐剂的制剂，该防腐剂选自酚、邻甲苯酚、间甲苯酚、对甲苯酚、氯甲酚、苄醇、烷基对羟基苯甲酸甲，乙，丙，丁酯及其类似物、洁尔灭、氯化苄乙铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞及其各种衍生物的至少一种或混合物，的水性稀释剂中。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 1998-7-23 60/093906;US 1998-7-30 60/094611;US 11．含有包括一个α亚基和一个β亚基的FSH或FSH变体以及防腐剂的制剂，该防腐剂选自酚、邻甲苯酚、间甲苯酚、对甲苯酚、氯甲酚、苄醇、烷基对羟基苯甲酸甲，乙，丙，丁酯及其类似物、洁尔灭、氯化苄乙铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞及其各种衍生物的至少一种或混合物，的水性稀释剂中。2．权利要求1的制剂，其防腐剂为苯酚、间甲苯酚、氯甲酚或其混合物。3．权利要求2的制剂，其FSH或FSH变体浓度约为1.0μg/ml至50mg/ml。4．权利要求3的制剂，它进一步含有一种等渗试剂。5．权利要求4的制剂，它进一步含有一种生理可耐受的缓冲液。6．包括两个药瓶的制剂，第一个药瓶含有冻干的FSH或FSH变体，第二个药瓶含一种防腐剂，该防腐剂选自酚、邻甲苯酚、间甲苯酚、对甲苯酚、氯甲酚、苄醇、烷基对羟基苯甲酸甲，乙，丙，丁酯及其类似物、洁尔灭、氯化苄乙铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞及其各种衍生物的至少一种或混合物，的水性稀释剂中。7．权利要求1的制剂，其所述的FSH或FSH变体和防腐剂存在于溶液中。8．权利要求1的制剂，其所述的FSH或FSH变体是选自如下所列群体的至少一种化合物(a)α-亚基(SEQ ID NO:1)FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKPDAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNVRVENHTECHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:2)RSCELTNITITVEKEECGFCISINTTWCAGYCYTRDLVYRDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCSKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFREIKE(b):α-亚基(SEQ ID NO:3)FPDGEFTTQDCPECKLRENKYFFKLGVPIYQCKGCCFSRAYPTPARSRKTMLVPKNITSESTCCVAKAFIRVTVMGNIKLENHTQCYCSTCYHHKIβ-亚基(SEQ ID NO:4)NSCELTNITIAVEKEGCGFCITINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATACHCGKCNSDSTDCTVRGLGPSYCSFGDMKE(c):α-亚基(SEQ ID NO:5)APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:6)NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE(d):α-亚基(SEQ ID NO:7)FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:8)NSCELTNITITVEKEECNFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE(e):α-亚基(SEQ ID NO:9)FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKPDAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNVRVENHTECHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:10)RSCELTNITITVEKEECSFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKACTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDRDSTDCTVRGLGPSYCSFSDIRE(f):α-亚基(SEQ ID NO:5)APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:11)NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGE(g):α-亚基(SEQ ID NO:5)APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:12)NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEM(h):α-亚基(SEQ ID NO:5)APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNNTSESTCCVAKSYNKVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:13)NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMK9．一种用于治疗不育症的方法，它包括以权利要求1的制剂向有需要的患者进行给药。10．权利要求9的方法，其所述的患者选自人类、绵羊、牛、马或兔。11．用于制备含一个α亚基和一个β亚基的FSH或FSH变体的防腐溶液制剂的方法，它包括将所述的FSH或FSH变体同一种防腐剂混合，该防腐剂选自酚、邻甲苯酚、间甲苯酚、对甲苯酚、氯甲酚、苄醇、烷基对羟基苯甲酸甲，乙，丙，丁酯及其类似物、洁尔灭、氯化苄乙铵、脱氢乙酸钠和硫柳汞及其各种衍生物的至少一种或混合物，的水性稀释剂。12．一种用于人类医疗的制成品，它包括包装材料和一个包含含有一个α亚基和一个β亚基的FSH或FSH变体溶液以及一种防腐剂溶液的药瓶，所述的包装材料包括一个表明所述溶液可保存超过24小时或更长时间的标签。13．权利要求12的制成品，其所述的药品为玻璃容器，它具有一个用于多用途给药的塞子。14．权利要求12的制成品，其所述的药瓶为一包装泡，它可以被穿刺并用于肺部给药。15．权利要求12的制成品，其所述的药瓶为一pen-注射器设备。16．一种制成品，它包括包装材料、盛有冻干的含一个α亚基和一个β亚基的FSH或FSH变体的第一个药瓶和含一种防腐溶液的第二个药瓶，此处所述的包装材料包括一个标签用以指导患者用防腐溶液再配所述的FSH或FSH变体以使用超过24小时或更长时间。17．权利要求16的制成品，其所述的第一个和第二个药瓶包含于一pen-注射器设备。18．一种用于治疗患者的不育症的方法，它包括以溶于防腐溶液的包含一个α亚基和一个β亚基的FSH或FSH变体的防腐溶液向有需要的患者进行给药，所述的溶液适于超过24小时或更长时间的给药。19．一种使用含一个α亚基和一个β亚基并用于治疗患者的不育症的FSH或FSH变体的稳定溶液的方法，它包括以FSH或FSH变体的稳定溶液向有需要的患者进行给药，所述的溶液适于超过24小时或更长时间的给药。20．FSH或FSH变体的至少一个α多肽或β多肽在制备防腐溶液中的使用，该防腐溶液适于超过24小时或更长时间的给药。21．一种包括至少一种含有一个α亚基和一个β亚基FSH或FSH变体以及含盐水或一种盐的磷酸缓冲液的稳定制剂，此处所述的FSH或FSH变体在23℃下60天后至少含90％的FSH或FSH变体二聚体。22．权利要求21的制剂，其所述的FSH或FSH变体浓度约为1.0μg/ml至50mg/ml。23．权利要求21的制剂，进一步包括一种等渗试剂。24．权利要求21的制剂，其所述的缓冲液为磷酸盐水缓冲液。25．一种制剂，它包括盛有含一个α亚基和一个β亚基的冻干的FSH或FSH变体的第一个药瓶和盛有含盐水或一种盐的磷酸缓冲液的第二个药瓶。26．权利要求21的制剂，其所述的FSH或FSH变体和所述的磷酸缓冲液处于溶液中。27．权利要求21的制剂，其所述的FSH或FSH变体是选自如下所列群体的至少一种化合物(a):α-亚基(SEQ ID NO:1)FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKPDAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNVRVENHTECHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:2)RSCELTNITITVEKEECGFCISINTTWCAGYCYTRDLVYRDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCSKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFREIKE(b):α-亚基(SEQ ID NO:3)FPDGEFTTQDCPECKLRENKYFFKLGVPIYQCKGCCFSRAYPTPARSRKTMLVPKNITSESTCCVAKAFIRVTVMGNIKLENHTQCYCSTCYHHKIβ-亚基(SEQ ID NO:4)NSCELTNITIAVEKEGCGFCITINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATACHCGKCNSDSTDCTVRGLGPSYCSFGDMKE(c):α-亚基(SEQ ID NO:5)APDVQDCPECTLQENPFFSQPGAPILQCMGCCFSRAYPTPLRSKKTMLVQKNVTSESTCCVAKSYNRVTVMGGFKVENHTACHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:6)NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE(d):α-亚基(SEQ ID NO:7)FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKLGAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNARVENHTECHCSTCYYHKSβ-亚基(SEQ ID NO:8)NSCELTNITITVEKEECNFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPNIQKTCTFKELVYETVKVPGCAHHADSLYTYPVATECHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFSEMKE(e):α-亚基(SEQ ID NO:9)FPDGEFTMQGCPECKLKENKYFSKPDAPIYQCMGCCFSRAYPTPARSKKTMLVPKNITSEATCCVAKAFTKATVMGNV...

【专利技术属性】
技术研发人员：JA霍夫曼，吕继蓉，
申请(专利权)人：伊莱利利公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]