含有抗真菌多肽的抗头屑组合物制造技术

本发明专利技术涉及含有抗真菌多肽的抗头屑组合物，抗真菌多肽在治疗或预防头屑中的应用，治疗或预防头屑的方法，和抗头屑多肽在制备用于治疗或预防头屑的组合物中的应用。发现具有图１所示氨基酸序列的抗真菌多肽即使在低浓度下也可有效抑制酵母瓶形酵母的生长。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及含有抗真菌多肽的抗头屑组合物，抗真菌多肽在治疗或预防头屑中的应用，治疗或预防头屑的方法，和抗头屑多肽在制备用于治疗或预防头屑的组合物中的应用。
技术介绍
头屑是头皮功能失调引起的，但它不认为是皮肤病，因此，头屑应当和可能在早期阶段与它类似的疾病区分开来。尽管头屑只是一种美容问题，但是对于治疗这种症状的领域仍然进行了大量的研究。广泛认可的是，头屑主要由酵母菌瓶形酵母(Pityrosporum ovale)引起，因此，抑制瓶形酵母生长的物质可能在治疗或预防头屑中有用。传统上用于治疗头屑的活性物质包括例如各种煤焦油制品、水杨酸、一硫化硒和双(2-巯基吡啶氧化)锌。新近，WO 95/27471描述了一种含有酮康唑或elubiol的新抗头屑洗发剂。然而，现有物质中一些有非常令人不快的气味，而另一些则是只可在医疗指导和控制之下应用到头皮上的非常烈性的物质。因此，有必要开发容易生产(如通过微生物)，又不产生不愉快的气味，并且没有有害性质的物质。本专利技术概要令人吃惊地发现，具有附图说明图1所示氨基酸序列的抗真菌多肽即使在低浓度下也能有效阻止瓶形酵母的生长。因此，在第一方面，本专利技术涉及适合应用于人的头发或头皮的抗头屑组合物，其包含有效量的具有图1所显示之氨基酸序列的抗真菌多肽或其变体，所述变体是I)可与如下抗体反应的多肽，所述抗体可与具有图1所示氨基酸序列的多肽的至少一个表位反应，或II)其氨基酸序列与图1所示多肽的氨基酸序列基本同源的多肽。在第二方面，本专利技术涉及以上定义的抗真菌多肽在治疗或预防头屑中的应用。在第三方面，本专利技术涉及治疗或预防头屑的方法，所述方法包括用有效量的以上定义的抗真菌多肽接触头发。最后，本专利技术还涉及以上定义的抗真菌多肽在制备用于治疗或预防头屑的组合物中的应用。附图的简要说明图1显示本专利技术抗真菌多肽的全长氨基酸序列。图2是生长了酵母瓶形酵母的微量滴定板的示意图，参见实施例1。本专利技术的详述描述抗真菌多肽及其变体在本文中，按其传统意义使用氨基酸的三字母密码。除非明确指出，本文提到的氨基酸是L型氨基酸。本文所用述语“抗真菌多肽”旨在包括所述多肽的线性和活性折叠结构，而且，在适当的地方，可和述语“抗真菌蛋白”互换使用。与抗真菌多肽联用的述语“变体”是指具有图1所示氨基酸序列的多肽衍生出的多肽或天然存在的变体。典型地，该变体与天然抗真菌多肽有一个或多个氨基酸残基不同，这一个或多个氨基酸残基可以从所述多肽N末端或C末端的一端或两端插入或缺失，也可以在所述多肽氨基酸序列内部的一个或多个位点插入或缺失，或在所述多肽氨基酸序列内部或一端或两端被一个或多个氨基酸残基替代。而且，本专利技术的变体具有上述特性I)和II)的一项或两项。特性I)，即本专利技术变体与如下抗体的反应性，其中所述抗体抗具有下文图1所示氨基酸序列的多肽的至少一个表位或与之反应。该特性可使用按下文材料和方法部分标题“抗AFPP抗体的制备”中的描述制备的抗体制品来测定。抗体反应性可采用本领域已知的方法来测定，所述方法例如Western印迹或径向免疫扩散分析，例如Hudson等1989所描述的方法。上文所述AFPP同源性用显示第一个序列由第二个序列衍生的两个蛋白质序列之间的一致性程度来确定。该同源性可通过本领域已知的计算机程序来适当确定，如GCG程序包中提供的GAP(Wisconsin程序包的程序手册(Program Manual for the Wisconsin Package)，第8版，1994年8月，Genetics Computer Group，575 Science Drive，Madison，Wisconsin，USA 53711)(Needleman，S.B.和Wunsch，C.D.，(1970)，分子生物学杂志(Journal of Molecular Biology)，48，第443—453页)。使用空缺(Gap)和下列用于多肽序列比较的设定空缺建立罚分3.0，空缺延伸罚分0.1，本专利技术类似DNA序列编码的多肽的成熟部分显示与图1所示氨基酸序列的成熟部分有优选至少约60％，如至少约70％、至少约80％、至少约90％、至少约95％，更优选至少约97％，最优选至少约99％的一致性程度。优选地，AFPP包含图1的氨基酸序列；或其等位变体；或其具有AFPP活性的片段。AFPP的片段是具有一个或多个选自该氨基酸序列氨基和/或羧基末端的氨基酸的多肽。等位变体是指一个基因位于相同染色体座位的两个或多个可替代形式的任意一个。等位变异通过突变天然发生，可导致种群内部的多态性。基因突变可以是沉默的(所编码的蛋白质没有改变)，也可以编码具有改变的氨基酸序列的多肽。多肽的等位变体是基因等位变体所编码的多肽。同源AFPP的氨基酸序列与图1的氨基酸序列的不同可以是一个或多个氨基酸残基的插入或缺失和/或由不同的氨基酸残基替代一个或多个氨基酸残基。优选地，氨基酸改变在性质上比较小，即是不显著影响蛋白质折叠和/或活性的保守氨基酸替代；小的缺失，典型是1至约30个氨基酸的缺失；小的氨基或羧基末端突出，如氨基末端的甲硫氨酸残基；不超过约20—25个残基的小的接头肽；通过改变净电荷或其它功能便于纯化的小的突出，如聚组氨酸片段、抗原表位或结合域。本文所用述语“有效量”是指具有图1所示氨基酸序列的抗真菌多肽或其变体的量，该量足以防治(从而除去或至少是限制)由于头屑引起的起皮。典型地，根据本专利技术所使用的多肽来自微生物。尽管可设想抗真菌多肽或其变体可通过其它微生物如细菌、原生动物和藻类产生，但该多肽通常来自真菌，特别是曲霉属(Aspergillus)的真菌。正如WO 94/01459所详细说明的，已在真菌种巨大曲霉(A.giganteus)的若干株系中发现具有图1所示氨基酸序列的抗真菌多肽，所述株系的一个例子是在真菌菌种保藏中心(Centraallbureauvoor Schimmelcultures，CBS)保藏的、保藏号为CBS 526.65的巨大曲霉株。但是，适于根据本专利技术的应用的抗真菌多肽或其变体可期待来自其它真菌种，特别是其它曲霉属物种，如A.pallidus、棒曲霉(A.clavatus)、A.longivesica、A.rhizopodus和A.clavatonanicus，因为这些种和巨大曲霉之间存在近缘的关系。如上所述，抗真菌多肽的变体可以是天然来源的变体，即从任何一种以上列举的真菌种分离的多肽，也可以是基于抗真菌多肽的氨基酸序列知识构建的、合成产生的变体。如前文所述，抗真菌多肽的其它变体也可用于本专利技术的目的。因此，可以考虑，使用本领域已知的技术，如NMR(如蛋白质工程(ProteinEngineering)，编者Oxender，D.L.和Fox，C.F.，Alan R.Liss，Inc.New York(1987)所描述的)、X-射线衍射、计算机模拟等，根据对图1所示抗真菌多肽的构象结构和活性位点的分析，可鉴定图1所示多肽的有益的、也可用于治疗或防止头屑的变体。当鉴定了抗真菌多肽氨基酸序列的一个或多个有趣的改变时，即可通过适当修改编码该抗真菌多肽的核苷酸序列来制备相应的变体。先前，Nakaya等(1990)公开了巨大曲霉抗真菌多肽的氨基酸序列。Wnen本文档来自技高网...

【技术保护点】
适用于应用至人头发或头皮上的抗头屑组合物，其包含有效量的含有图１所示氨基酸序列的抗真菌多肽或其变体，所述变体是Ⅰ） 可与如下抗体反应的多肽，所述抗体可与具有图１所示氨基酸序列的多肽的至少一个表位反应，或Ⅱ） 其氨基酸序列与图１所示多 肽的氨基酸序列基本同源的多肽。

【技术特征摘要】
DK 1998-11-30 PA1998015791.适用于应用至人头发或头皮上的抗头屑组合物，其包含有效量的含有图1所示氨基酸序列的抗真菌多肽或其变体，所述变体是I)可与如下抗体反应的多肽，所述抗体可与具有图1所示氨基酸序列的多肽的至少一个表位反应，或II)其氨基酸序列与图1所示多肽的氨基酸序列基本同源的多肽。2.根据权利要求1的组合物，其中抗真菌多肽来自微生物。3.根据权利要求2的组合物，其中抗真菌多肽来自真菌，特别是曲霉属的真菌。4.根据权利要求3的组合物，其中抗真菌多肽来自属于巨大曲霉、A. pallidus、棒曲霉、A. longivesica、A. rhizopodus或A.clavatonanicus的真菌。5.根据权利要求4的组合物，其中抗真菌多肽来自属于巨大曲霉的真菌。6.根据权利要求5的组合物，其中抗真菌多肽来自巨大曲霉的CBS 526.65株。7.根据前述权利要求之任一项的组合物，其中抗真菌多肽含有图1所示氨基酸序列。8.根据权利要求7的组合物，其中抗真菌多肽由图1所示氨基酸序列组成。9.根据权利要求1—6之任一项的组合物，其中图1所示抗真菌多肽第4、24、32、42和50位上的一或多个氨基酸残基已被另一种天然存在的氨基酸残基替代。10.根据权利要求9的...

【专利技术属性】
技术研发人员：J文德，NH索伦森，
申请(专利权)人：诺沃奇梅兹有限公司，
类型：发明
国别省市：DK[丹麦]