兴奋剂化合物的分析制造技术

本发明专利技术提供了在（机体）流体或（机体）样品或（机体）组织的萃取物中测定药品或药物或其代谢产物的方法，所述方法包括下述步骤：（ｉ）任选地，用至少一种酶处理所述流体或样品萃取物，（ｉｉ）将所述流体或萃取物的至少第一部分与能从该流体或萃取物吸附或吸收出有机化合物的至少第一固相接触，和／或（ｉｉｉ）将所述流体或萃取物的至少第二部分与能从该流体或萃取物萃取或吸附出有机化合物的至少第二相接触，和／或（ｉｖ）任选地，将所述流体或萃取物的至少第三部分与能从该流体或萃取物萃取出有机化合物的液相接触，和／或（ｖ）通过对第一固相应用热处理和／或通过溶剂萃取，解吸附与第一固相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发溶剂，（ｖｉ）任选地，通过应用热处理和／或通过溶剂萃取，萃取或解吸附第二相中的或与第二相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发溶剂，以及（ｖｉｉ）通过多维气相色谱（ＧＣ），优选通过优选与质谱偶连的全多维ＧＣ（ＧＣ＊ＧＣ），来分析步骤（ｖ）和（ｖｉ）解吸附的化合物以及任选的步骤（ｉｖ）中萃取的化合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】兴奋剂化合物的分析 本专利技术涉及在(机体)流体或组织/样品萃取物中测定药品或药物或其代谢产物的方法，所述方法包括固相萃取和/或固相微萃取和/或衍生化和全多维气相色谱的组合。 在很多情况下，人们想要了解关于药品或药物在活生物体中的任何使用。例如，可 能对药物的代谢或监测生化途径感兴趣(例如在毒物学研究中)。此外，在很多领域，使用 药品或药物，以增强或增加任何预期的结果，特别是运动和育种的领域。此类药品或药物例 如可用于改善(人或动物)运动员的体能或耐久性或者支持任何育种过程(例如，动物更 快生长)。 为测定任何药物或药品的使用(或滥用)，需要快速、可靠且可行的用于在任何 (机体)样品中测定药物或药品或其代谢产物的方法。因此，通过本专利技术，提供了一种方法，用于在来自生物体的(机体)流体或组织或 其它样品中测定药品或药物或其代谢产物，所述方法可在两或三小时内进行(整个方法)， 并且高度灵敏，因此能在短时间内提供优异的结果。 本专利技术的方法包括下述步骤(i)任选地，用至少一种酶处理(机体)流体或(机体)样品或(机体)组织的萃取物，和/或任选地，进行衍生化以增强样品制备，例如，用卤代甲酸烷基酯，例如ECF (氯甲 酸乙酯)进行衍生化。 (ii)将所述流体或萃取物的至少第一部分与能从该流体或萃取物中吸附出有机 化合物的至少一种第一固相接触，和/或 (iii)将所述流体或萃取物的至少第二部分与能从该流体或萃取物中萃取或吸附 出有机化合物的至少一种第二相接触，和/或 (iv)任选地，将所述流体或萃取物的至少第三部分与能从该流体或萃取物中萃取 出有机化合物的液相接触 (v)通过对第一固相应用热处理和/或通过溶剂萃取，解吸附与第一固相结合的 化合物，任选地，接着至少部分蒸发溶剂， (vi)任选地，通过应用热处理和/或通过溶剂萃取，萃取或解吸附第二相中的或 与第二相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发溶剂 (vii)通过多维气相色谱(GC)，优选通过优选与质谱偶连的全多维GC(GOGC)，来分析步骤(v)和(vi)解吸附的化合物以及任选的步骤(iv)中萃取的化合物。 本文所用的化合物是任何药品或药物或者其生化途径(优选是哺乳动物生化途径)之后的代谢产物，所述化合物在摄入(包括注射或药膏应用)后被包含于任何(机体)流体或组织中。 可根据本专利技术的方法加以分析的(机体)流体可以例如是血液、尿液、粪便、来自 泪道的液体、脊髓液、脑液、来自淋巴腺的液体或任何其它可获得的体液。因为易于获得， 机体液体优选是血液或尿液。还可在下述液体中测定药品或药物的可能摄入，所述液体来 自用合适溶剂对其中存在药品或其代谢产物的组织或物质进行的萃取。在这种情况下，例 如可对毛发或指甲、机体组织和来自活体(剩余部分)的其它材料进行测定。在该情况下，4流体是来自所述组织的萃取物。此外，可对固体样品进行直接分析，例如，在热解吸附或 热解之后。 使用多维气相色谱分析化合物是本领域已知的。特别地，可使用全二维气相色谱， 通过两种不同参数来分析任何化合物。就这些目的而言，可使用两种不同的分离柱，例如， 第一种柱包含非极性材料，第二种柱包含更具极性的材料，或者反过来。但是，也可使用其 它组合，例如，对映异构分离。 全二维气相色谱以及全二维气相色谱和飞行时间质谱(T0F-MS)的组合是已知技 术，例如Lu，X.et al in Journal of Chromatography A， 1043 (2004) ， 265-273页对其进行 了描述，Adahchour， M. et al. ， in Trends inAnalytical Chemistry, Vol. 25， No. 8， 2006， 821-840页描述了全二维气相色谱近来的发展。 使用全二维气相色谱(GC x GC)在反兴奋剂中用于药品分析，可从Kuch et al.， in Journal of Chromatography A， 1000 (2003) ， 109-124页的文章已知。但是，该文描述的 方法是实验室规模的，并且耗时。此外，进行的样品制备排除了大量化合物，例如，利尿剂。 术语全在本文中使用时表示从第一色谱柱洗脱的几乎所有成分都作为不同级 分引入第二色谱柱。此外，可检测从该第二柱洗脱的所有组分，优选通过质谱，更优选通过 T0F-MS来进行。 在本专利技术的一个任选步骤，即步骤(i)中，在酶能提供其活性的条件下，向原样 浓縮、稀释或不管怎样处理过的形式的(机体)流体中，加入至少一种酶。酶展示出最佳活 性的条件(例如温度或缓冲系统)取决于所使用的酶，其通常由供应商给出。酶优选选自 葡糖苷酸酶、乙二醇酯酶和/或硫酸酯酶/脱硫酸酯酶。加入酶使得化合物的衍生物(例 如生化途径的代谢产物)分解，其典型被糖基化或磺化。如果合适的话，可向(机体)流体 中加入任何其它酶，用于分解途径代谢产物。 在根据本专利技术的一种优选实施方式中，任何(机体)流体或萃取物被分为若干 部分，其中，根据步骤(ii)将流体或萃取物的至少一部分与至少一种第一固相相接触。 所述第一固相优选是有机材料，更优选选自聚二甲基硅氧烷(PDMS)、聚丙烯酸酯、聚乙 二醇(Carbowax) -二乙烯基苯(聚乙二醇/DVB) 、 PDMS-DVB、 Carboxen/PDMS、 二乙烯基 苯-Carboxene-聚二甲基硅氧烷(DVB/Carboxen/PDMS)、聚(甲基氢硅氧烷)(PMHS)或其它 通常已知和使用的相。 Carbowax 和Carboxen 是商业可获得的固相，其由Supelco (Sigma-Aldrich)提供。 在一种特别优选的实施方式中，第一固相是有机纤维，其优选具有5至200ym的 厚度，优选10至200 ii m，更优选30至150 ii m，或者其是搅拌棒。 此类纤维可通过商业途径购得，并可用于固相微萃取工艺(SPME)。在使用之前，优 选对纤维加以调理(condition)，例如，令其被加热至至少200。C，优选至至少220。C，进行 至少20分钟，优选至少30分钟，更优选至少1小时，这取决于所使用的材料。使用之前调 理纤维的温度由厂商说明书提供。可应用任何其它调理，以对固相进行想要的处理，例如， 用有机溶剂对其加以冲洗或者任何其它合适的处理(包括其它温度或其它解吸附时间)。 优选地，根据步骤(iii)将流体或萃取物的第二部分与第二相接触，第二相可以 是液相、气相或固相。因此，所述第二相被用于液相萃取(例如通过有机溶剂来进行)、气相萃取(用于挥发性有机化合物)或固相萃取(SPE)。如果第二相是固相，所述第二固相可以 是已知用于SPE工艺的任何材料，例如，基于氧化硅的材料、氧化锆或其它例如经修饰或未 经修饰的聚合材料(例如，聚苯乙烯-二乙烯基苯共聚物PS-DVB或聚丙烯酸酯)。如果经 过修饰的话，使用的材料典型地经十八烷基修饰，但是也可应用其它修饰(例如苯基、辛基 或者甚至官能化或未官能化的材料)。可用于SPE的材料是公知的。 可将含有化合物的流体或萃取物放到经预清洁或预冲洗(仅通过将液体样品经 柱洗脱来进行)的SPE柱的顶端，之后，可解吸附留下的化合物，例如通过用溶剂洗脱来进 行。为进行洗脱，本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于在（机体）流体或（机体）样品或（机体）组织的萃取物中测定药品或药物或其代谢产物的方法，所述方法包括下述步骤：　　（ｉ）任选地，用至少一种酶处理所述流体或萃取物，（ｉｉ）将所述流体或萃取物的至少第一部分与能从所述流体或萃取物中吸附或吸收出有机化合物的至少一种第一固相接触，　　（ｉｉｉ）将所述流体或萃取物的至少第二部分与能从所述流体或萃取物中萃取或吸附出有机化合物的至少一种第二相接触，　　（ｉｖ）任选地，将所述流体或萃取物的至少第三部分与能从所述流体或萃取物中萃取出有机化合物的液相接触，　　（ｖ）通过对第一固相应用热处理和／或通过溶剂萃取，解吸附与所述第一固相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发所述溶剂，　　（ｖｉ）通过应用热处理和／或通过溶剂萃取，萃取或解吸附所述第二相中的或与所述第二相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发所述溶剂，　　（ｖｉｉ）通过多维气相色谱（ＧＣ），优选通过优选与质谱偶连的全多维ＧＣ（ＧＣ＊ＧＣ），来分析步骤（ｖ）和（ｖｉ）解吸附的化合物以及任选的步骤（ｉｖ）中萃取的化合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】EP 2007-7-13 07013740.1用于在(机体)流体或(机体)样品或(机体)组织的萃取物中测定药品或药物或其代谢产物的方法，所述方法包括下述步骤(i)任选地，用至少一种酶处理所述流体或萃取物，(ii)将所述流体或萃取物的至少第一部分与能从所述流体或萃取物中吸附或吸收出有机化合物的至少一种第一固相接触，(iii)将所述流体或萃取物的至少第二部分与能从所述流体或萃取物中萃取或吸附出有机化合物的至少一种第二相接触，(iv)任选地，将所述流体或萃取物的至少第三部分与能从所述流体或萃取物中萃取出有机化合物的液相接触，(v)通过对第一固相应用热处理和/或通过溶剂萃取，解吸附与所述第一固相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发所述溶剂，(vi)通过应用热处理和/或通过溶剂萃取，萃取或解吸附所述第二相中的或与所述第二相结合的化合物，任选地，接着至少部分蒸发所述溶剂，(vii)通过多维气相色谱(GC)，优选通过优选与质谱偶连的全多维GC(GC*GC)，来分析步骤(v)和(vi)解吸附的化合物以及任选的步骤(iv)中萃取的化合物。2. 根据权利要求l的方法，其中步骤(ii)中的所述第一固相是有机材料。3. 根据权利要求2的方法，其中步骤(ii)中的所述第一固相选自聚二甲基硅氧烷 (PDMS)、聚丙烯酸酯、聚乙二醇-二乙烯基苯(Carbowax/DVB) 、 PDMS-DVB、 Carboxen/PDMS、 二乙烯基苯-Carboxene-聚二甲基硅氧烷(DVB/Carboxen/PDMS)、聚(甲基氢硅氧烷) (PM...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜威德布尔，伯特基普，恩泽门格因克，约翰默梅尔斯，罗兰彼得斯，尼科尔莱姆卡斯，
申请(专利权)人：帝斯曼知识产权资产管理有限公司，
类型：发明
国别省市：NL[荷兰]