一种检测间充质干细胞肝细胞生长因子含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测间充质干细胞肝细胞生长因子含量的方法，属于蛋白检测技术领域。步骤包括：取已知浓度的MSC细胞悬液，将MSC细胞悬液与细胞裂解液按设定体积比混合并配合直接裂解工艺进行待测样本的制备，裂解液由特定含量的磷酸氢二钠、TritonX‑100、NP‑40和SDS组成。该裂解液不会影响抗原和抗体的结合，因此采用ELISA检测间充质干细胞HGF的含量，可作为评估MSC免疫调节、组织修复和抑制细胞凋亡的重要生物学功能指标。该方法简便、高效，相较于传统的反复冻融样本制备方法，极大的缩短了样本制备周期，提高了样本裂解效率，为间充质干细胞的蛋白含量检测提供更优的样本制备方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白检测，具体涉及一种检测间充质干细胞肝细胞生长因子含量的方法。

技术介绍

1、人肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，hgf)存在于人体内多种组织和细胞中，是一种可调节多种细胞生长、运动和形态发生的多功能因子，可促进组织细胞的再生，抑制细胞凋亡。间充质干细胞(mesenchymal stem cell，简称msc)是一类具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞。msc具有分泌hgf的能力，hgf分泌量的多少会影响其免疫调节、组织细胞的再生和抑制细胞凋亡的能力。因此需对hgf的含量进行准确的测定，以评估msc的生物功能。

2、一般采用elisa法检测msc中的hgf含量。现有elisa检测的样本制备方法通常为室温/-80℃反复冻融法。此制备方法耗时长，且细胞裂解效果不佳，无法精确检测出msc样本中hgf的含量。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本专利技术开发了一种有效用于间充质干细胞hgf含量检测的方法，从而可以对msc的生物功能进行评价，该本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测间充质干细胞肝细胞生长因子含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述间充质干细胞悬液的浓度为4～6×106个细胞/mL。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S1中，所述间充质干细胞来源于脐带。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，按设定体积比混合细胞悬液与细胞裂解液，所述设定体积比为1:(1～8)。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤S2中，孵育时长为10-30分钟。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在...

【技术特征摘要】

1.一种检测间充质干细胞肝细胞生长因子含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤s1中，所述间充质干细胞悬液的浓度为4～6×106个细胞/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤s1中，所述间充质干细胞来源于脐带。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤s2中，按设定体积比混合细胞悬液与细胞裂解液，所述设定体积比为1:(1～8)。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤s2中，孵育时长为10-30分钟。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：马进，陆晓，黄彤舸，廖联明，
申请(专利权)人：江苏拓弘康恒医药有限公司，
类型：发明
国别省市：