一种海豹隐秘杆菌的PCR检测方法技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，具体涉及一种海豹隐秘杆菌的PCR检测方法，该方法是基于特定的基因编码设计将普通PCR与荧光定量PCR方法应用于海豹隐秘杆菌的检测，具有高灵敏度和特异性，适用于直接从组织样本中检测病原菌。因此，本发明专利技术结合普通PCR和荧光定量PCR法对海豹隐秘杆菌进行检测，为海豹隐秘杆菌检测提供了新的有效路径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，具体涉及一种海豹隐秘杆菌的pcr检测方法。

技术介绍

1、海豹隐秘杆菌(arcanobacterium phocae，aph)属于放线菌门(actinobacteria)、放线菌纲(actinobacteria)、放线菌目(actinomycetales)、放线菌科(actinomycetaceae)、隐秘杆菌属(arcanobacterium)。该菌呈球杆状和短杆状，革兰氏染色阳性，无运动性，不形成芽孢，非抗酸杆菌。菌体可单独存在、成对排列或聚集成簇，可呈现短类白喉杆菌形态。海豹隐秘杆菌兼性厌氧生长，在血琼脂培养基上培养24h后，形成白色、微小、圆形、低凸起的菌落，周围伴有β-溶血环，其直径可达菌落直径的2-3倍。

2、海豹隐秘杆菌是水貂坏死性足皮炎的主要病原菌之一，感染后会导致水貂足垫出现急性严重溃疡或慢性角化过度化脓性足底皮炎，严重影响水貂的健康与福利。此外，海豹隐秘杆菌还可能通过血液或其他途径引发系统性感染，甚至与其他病原体协同作用，加剧病情，严重时导致水貂死亡。为了有效控制海豹隐秘杆菌的感染，建立更有效的检测方本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种海豹隐秘杆菌的PCR检测方法，其特征在于，所述检测方法为普通PCR检测和/或荧光定量PCR检测，

2.一种海豹隐秘杆菌的普通PCR检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述一种海豹隐秘杆菌的普通PCR检测方法，其特征在于，所述普通PCR扩增的20μL反应体系为：10×PCRBuffer 2μL，dNTPs 1.6μL，上游引物0.4μL，下游引物0.4μL，DNA聚合酶0.2μL，模板DNA 2μL，无RNA酶水补足20μL。

4.根据权利要求2或3所述的一种海豹隐秘杆菌的普通PCR检测方法，其特征在于，所述普通PCR扩增...

【技术特征摘要】

1.一种海豹隐秘杆菌的pcr检测方法，其特征在于，所述检测方法为普通pcr检测和/或荧光定量pcr检测，

2.一种海豹隐秘杆菌的普通pcr检测方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述一种海豹隐秘杆菌的普通pcr检测方法，其特征在于，所述普通pcr扩增的20μl反应体系为：10×pcrbuffer 2μl，dntps 1.6μl，上游引物0.4μl，下游引物0.4μl，dna聚合酶0.2μl，模板dna 2μl，无rna酶水补足20μl。

4.根据权利要求2或3所述的一种海豹隐秘杆菌的普通pcr检测方法，其特征在于，所述普通pcr扩增的反应条件为：95℃预变性3min；95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；最后72℃再延伸5min。

5.一种海豹隐秘杆菌的荧光定量pcr检测方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：邢进，冯育芳，谢元志，李威，高强，张雪青，么山山，付瑞，
申请(专利权)人：中国食品药品检定研究院，
类型：发明
国别省市：