【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、性别分离是生物防治的昆虫释放方法中的限速步骤。对于许多昆虫物种(例如，埃及伊蚊(ae.aegypti)、按蚊属(anopheles spp.)、库蚊属(culex spp.)、黑腹果蝇(d.melanogaster)、冈比亚疟蚊(an.gambie)、致倦库蚊(cx.quinquefasciatus))，认为不可能在发育早期就将雄性和雌性分离。需要允许高通量性别分选的系统，因为这将使得不育昆虫的应用能够扩大到许多物种，由此限制对有害杀虫剂的需求。
技术实现思路
1、本文提供了基于性别特异性基因表达对多种昆虫进行性别分选的方法，所述方法包含(a)生成外源性核酸分子；(b)将所述外源性核酸分子递送到所述多种昆虫中的昆虫体内，其中所述外源性核酸分子包含启动子区、性别特异性剪接模块、报告基因和转录终止子；(c)检测所述报告基因的性别特异性基因表达；以及(d)基于步骤(c)中对所述性别特异性基因表达的检测，对所述多种昆虫中的所述昆虫进行分选，由此基于所述性别特异性基因表达对所述昆虫进
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1.一种基于性别特异性基因表达对多种昆虫进行性别分选的方法，所述方法包含：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述外源性核酸分子进一步包含位于效应区的每一端处的piggyBac反向末端重复序列。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述启动子区包含Hr5IE1启动子或OpIE-1启动子。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中步骤(b)包含将所述外源性核酸分子整合到所述昆虫的基因组中。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中步骤(d)包含在幼虫阶段对所述昆虫进行分选。
6.根据权利要求1至5...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种基于性别特异性基因表达对多种昆虫进行性别分选的方法，所述方法包含：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述外源性核酸分子进一步包含位于效应区的每一端处的piggybac反向末端重复序列。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述启动子区包含hr5ie1启动子或opie-1启动子。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中步骤(b)包含将所述外源性核酸分子整合到所述昆虫的基因组中。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中步骤(d)包含在幼虫阶段对所述昆虫进行分选。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述性别特异性剪接模块包含内源性性别特异性外显子序列和截短的性别特异性内含子序列。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述性别特异性剪接模块是雄性特异性剪接模块。
8.根据权利要求6所述的方法，其中所述性别特异性剪接模块是雌性特异性剪接模块。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述昆虫包含埃及伊蚊(aedesaegypti)、黑腹果蝇(drosophila melanogaster)、铃木氏果蝇(drosophila suzukii)、地中海实蝇(ceratitis capitata)或墨西哥按实蝇(anastrepha ludens)。
10.根据权利要求9所述的方法，其中所述性别特异性剪接模块源自埃及伊蚊双性基因(aaedsx)、地中海实蝇转化子(traf)、黑腹果蝇traf或铃木氏果蝇traf。
11.根据权利要求10所述的方法，其中所述性别特异性剪接模块源自aaedsx，并且其中所述雄性特异性剪接模块包含外显子4、外显子6或其任何组合。
12.根据权利要求10所述的方法，其中所述性别特异性剪接模块源自aaedsx，并且其中所述雌性特异性剪接模块包含外显子4、外显子5b、外显子6或其任何组合。
13.根据权利要求12所述的方法，其中外显子5b是经工程化的外显子5b，其中一个或多个终止密码子被排除在所述外显子5b之外。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述报告基因包含dsred基因、egfp基因或其任何组合。
15.根据权利要求14所述的方法，其中基于所述egfp基因的表达将所述昆虫分选为雄性。
16.根据权利要求14所述的方法，其中基于所述dsred基因的表达将所述昆虫分选为雌性。
17.根据权利要求1至16...
【专利技术属性】
技术研发人员：O·阿克巴里，翁施哲，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：
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