一种黄樟素半抗原及其于免疫分析检测黄樟素中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种黄樟素半抗原及其于免疫分析检测黄樟素中的应用。所述黄樟素半抗原的结构如下所示：；本发明专利技术提供的两种黄樟素半抗原具有合适长度的间隔臂，其在偶联载体蛋白后既可以使半抗原充分暴露出来，又可尽量避免识别间隔臂。本发明专利技术采用所述的黄樟素半抗原制备人工抗原和抗体，获得的黄樟素单克隆抗体效价高、特异性强、亲和力高。基于所述黄樟素人工抗原和抗体构建的免疫分析方法具有高特异性和灵敏度，最低检测限LOD为0.09 ng/mL，半抑制浓度IC50为2.05 ng/mL，定量检测范围为0.28~14.89 ng/mL，对黄樟素的类似物均无交叉反应，可对样品中黄樟素进行快速定性和定量检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于检测，具体涉及一种黄樟素半抗原及其制备方法、人工抗原、抗体及其于免疫分析检测黄樟素中的应用。

技术介绍

1、黄樟素（safrole，4-烯丙基-1,2-亚甲基二氧基苯，c10h10o2）是一种天然存在的有机化合物，属于苯基丙烯类化合物，是许多植物的挥发油成分。黄樟素常以液体形式存在，具有甜而辛辣的气味，广泛分布于樟科（如黄樟、樟树）和胡椒科植物中。

2、黄樟素具有毒性，会对肝脏造成损害，并可能具有致癌性。动物实验表明，黄樟素能引起基因突变和肝脏肿瘤。而在腐败变质的香料类植物中，黄樟素的含量会急剧增加。

3、目前常用于黄樟素检测的方法包括液质法和气质法。这些方法存在前处理复杂繁琐、仪器昂贵、成本高的问题，且不能实现对黄樟素高效快速的检测和监控。另外，目前报道的黄樟素免疫分析方法的检测限仅为200 ng/ml，灵敏度较低。因此，有必要建立一种操作简便、灵敏度高、准确性强的黄樟素快速检测方法。

技术实现思路

1、为解决上述全部或者部分的技术问题，本专利技术提供以下的技术方案：<本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种黄樟素半抗原，其特征在于：它的结构如式（Ⅰ）或者式（Ⅱ）所示：

2.权利要求1所述的黄樟素半抗原的制备方法，其特征在于，包括：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述第一混合反应体系中丁香酚、吡啶和卤化铝的摩尔当量满足1：1~3：1~2；

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述5-烯丙基苯并[D][1,3]二氧戊环-2-羧酸、N,N'-羰基二咪唑、氨基丁酸叔丁酯的摩尔当量满足1：1~2：1~2；

6.一种黄樟素人工抗原，其特征在于，它由权利要求...

【技术特征摘要】

1.一种黄樟素半抗原，其特征在于：它的结构如式（ⅰ）或者式（ⅱ）所示：

2.权利要求1所述的黄樟素半抗原的制备方法，其特征在于，包括：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述第一混合反应体系中丁香酚、吡啶和卤化铝的摩尔当量满足1：1~3：1~2；

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，包括：

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述5-烯丙基苯并[d][1,3]二氧戊环-2-羧酸、n,n'-羰基二咪唑、氨基丁酸叔丁酯的摩尔当量满足1：1~2：1~2；

6.一种黄樟素人工抗原，其特征在于，它由权利要求1所述的黄樟素半抗原偶联载体蛋白得到，所述黄樟素人工抗原的结构如式（ⅲ）或者式（ⅳ）所示：

7.根据权利要求6所述的黄樟素人工抗原，其特征在于：所述载体蛋白为牛血清蛋白、鸡卵白蛋白、血蓝蛋白、乳铁蛋白中的任一种。

8.一种黄樟素人工抗原组合，其特征在于，包括免疫原和包被原，所述免疫原为权利要求6所述的黄樟素人工抗原，且其结构如式（ⅲ）所示且载体蛋白为牛血清蛋白，所述包被原为权利要求6所述的黄樟素人工抗原，且其结构如式（ⅳ）所...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷红涛，陈新文，孟嫚，梅邢，孙眸然，吴青，杨哪，徐振林，王福，徐丹，徐学明，
申请(专利权)人：利诚检测认证集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：