自反馈蛋白含量的分离纯化系统、分离纯化方法及设备技术方案

技术编号:46581939 阅读:0 留言:0更新日期:2025-10-10 21:21
本发明专利技术涉及自反馈蛋白含量的分离纯化系统、分离纯化方法及设备,分离纯化方法包括:实时获取清洗液的光学信号值V1;将样本液分离纯化,得到截留端样本液;实时获取截留端样本液的光学信号值V3;基于光学信号值V3和V1的比对结果,调整纯化参数实现截留端样本液中蛋白含量的控制。分离纯化系统包括液体供应单元,包括待测样本室和清洗液室;分离芯片单元,设有进样端、截留端和滤出端;光学信号检测单元,设置于进样端,用于清洗液、截留端样本液的光学信号值检测。本发明专利技术采用Exodus仪器实现光学信号检测单元的搭载,根据其提供的监测数据判断纯化过程的蛋白变化状态、异常失效情况等,通过控制纯化参数,使最终的产物蛋白满足需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体为一种自反馈蛋白含量的分离纯化系统、分离纯化方法及设备。


技术介绍

1、细胞外囊泡(extracellular vesicles,evs)是细胞经膜分泌或脱落的囊泡状纳米颗粒,通常evs大小在30-200 nm间,与细胞膜有相似的双层膜结构。研究表明evs在疾病早筛、疾病治疗和再生领域中可以起到极为显著的功效,其主要依托于evs包含蛋白质、核酸等复杂的生物大分子,参与免疫信号通路、炎症放大等多种生理、病理过程的信息传递。

2、外囊泡在治疗和再生板块的应用促使外泌体分离纯化的需求量扩增,当前外囊泡制备含外囊泡的培养、外囊泡的分离纯化浓缩、外囊泡的转化应用三大环节。由于培养后的外囊泡是在含蛋白、其它因子等营养成份的培养基中,将外囊泡从培养基中分离纯化浓缩成为了一个必不能缺的关键环节。在传统的蛋白纯化过程中通过检测蛋白总量评估蛋白纯化效果,而在外囊泡纯化中蛋白去除的效果却是衡量纯化后的外囊泡纯度的一个重要指标。

3、现今常用的外囊泡纯化工艺方法包括超速离心(uc)、密度梯度离心(duc)、超滤膜法(uf)(包含死端本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,调整纯化参数包括:调整所述截留端样本液清洗置换次数。

3.根据权利要求1所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,还包括:

4.根据权利要求3所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,检测状态的有效性至少包括:

5.根据权利要求4所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,当光学信号值V2和V1的比对结果CV值小于2%,判定检测状态有效。

6.根据权利要求3所述的自反馈蛋白含量的分离...

【技术特征摘要】

1.一种自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,调整纯化参数包括:调整所述截留端样本液清洗置换次数。

3.根据权利要求1所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,还包括:

4.根据权利要求3所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,检测状态的有效性至少包括:

5.根据权利要求4所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,当光学信号值v2和v1的比对结果cv值小于2%,判定检测状态有效。

6.根据权利要求3所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,分离纯化步骤的有效性至少包括:

7.根据权利要求6所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,当光学信号值v2和光学信号值v3满足:{average(v2)-v3}/ average (v2)< 3%,判定芯片过滤膜为破损状态,average代表该组数据的平均值。

8.根据权利要求6所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,当{v3(第n次加样)-v3(第1次加样)}/ v3(第1次加样)>3% ,判定芯片过滤膜负载为饱和状态。

9.根据权利要求8所述的自反馈蛋白含量的分离纯化方法,其特征在于,当所述芯片过滤膜负载为...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨一杰单峰池书锐向愿
申请(专利权)人:深圳汇芯生物医疗科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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