一种高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株及其构建方法与应用技术

技术编号:46577856 阅读:1 留言:0更新日期:2025-10-10 21:19
本发明专利技术涉及生物技术领域,具体涉及一种高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株及其构建方法与应用,该菌株为基因敲除的工程菌株;所述基因敲除的工程菌株中敲除调控基因Tr100508,该里氏木霉工程菌株滤纸酶活、内切纤维素酶活、木聚糖酶酶活和胞外蛋白含量均有显著地提升,显示出良好的工业开发和应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体涉及一种高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株及其构建方法与应用


技术介绍

1、木质纤维素生物质主要由纤维素、半纤维素和木质素组成,是地球上最丰富的可再生资源之一,利用木质纤维素生产生物燃料和生物精炼产品对于缓解能源危机和解决环境问题具有重要意义。木质纤维素的降解是其生物转化最为关键的一步,该过程依赖于木质纤维素降解酶对木质纤维素生物质底物的水解能力。丝状真菌里氏木霉是一种嗜温软腐子囊菌,具有较为完整的木质纤维素降解酶酶系,里氏木霉基因组包含cbh1、cbh2、eg1、eg2和bgl1等10个纤维素酶基因和xyn1、xyn2、xyn3、xyn4和bxl1等16个半纤维素酶基因,这些木质纤维素降解酶通过协同作用可以有效降解木质纤维素生物质,因此在工业上被广泛用于生产木质纤维素降解酶。由于木质纤维素降解酶产量低和降解效率低,导致了酶成本过高,这严重阻碍了木质纤维素生物转化。

2、在里氏木霉中,木质纤维素降解酶的表达受到转录因子、信号转导、环境因素和次级代谢等严格调控,其中转录因子对木质纤维素降解酶的转录调控是木质纤维素降本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株,其特征在于,所述工程菌株为基因敲除的工程菌株;

2.根据权利要求1所述的高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株,其特征在于,所述调控基因Tr100508的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述调控基因Tr100508的编码蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.一种权利要求1或2所述高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,步骤S1中,所述Tr100508基因上游同源臂片段的核苷酸序列如SEQ ID N...

【技术特征摘要】

1.一种高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株,其特征在于,所述工程菌株为基因敲除的工程菌株;

2.根据权利要求1所述的高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株,其特征在于,所述调控基因tr100508的核苷酸序列如seq id no.1所示,所述调控基因tr100508的编码蛋白氨基酸序列如seq id no.2所示。

3.一种权利要求1或2所述高产纤维素酶和木聚糖酶的里氏木霉工程菌株的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,步骤s1中,所述tr100508基因上游同源臂片段的核苷酸序列如seq id no.3所示。

5.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,步骤s1中,所述tr100508基因下游同源臂片段的核苷酸序列如seq id no.4所示。

6.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,步骤s1中,所述hyg表达盒的核苷酸序列如seq id no.5所示,所述pczf8载体骨架的核苷酸序列如seq id no.6所示。

7.权利要求1或2所述里氏木霉工程菌株在生产纤维素酶和木聚糖酶中的应用,其特征在于,所述应用包括:通过培养所述里氏木霉工程菌株,离心收集上清,得到粗酶液。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,将里氏木霉工程菌株...

【专利技术属性】
技术研发人员:薛闯戴晓赞程驰
申请(专利权)人:大连理工大学
类型:发明
国别省市:

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