一株高产nisin菌株的高通量筛选方法及其应用技术

本申请涉及生物技术领域，具体公开了一株高产nisin菌株的高通量筛选方法及其应用，提供了一株高产nisin的乳酸乳球菌SD‑06，保藏编号为CGMCC No.35340，其发酵产量≥22400IU/mL；还提供了一种高通量筛选方法，包括紫外诱变构建突变库；深孔板规模化培养结合超高效液相色谱快速检测nisin含量，筛选效价前1%的菌株；经试管复筛和发酵罐验证后，进一步通过诱变获得高产菌株；所述超高效液相色谱检测采用C18反相色谱柱及乙腈‑0.1%三氟乙酸梯度洗脱，建立线性方程实现精准定量；该菌株及方法可显著提升nisin生产效率，适用于食品防腐和抗菌药物制备领域。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及生物，具体的说是一株高产nisin菌株的高通量筛选方法及其应用。

技术介绍

1、乳酸链球菌素（nisin）作为一种天然抗菌肽，是目前唯一被批准用于食品防腐的细菌素。由于其安全性高、不与医用抗生素产生交叉耐药性等特点，nisin已成为食品工业和生物医药领域极具应用前景的绿色生物防腐剂。作为nisin的工业生产菌株，乳酸乳球菌的产量水平直接影响nisin的生产效率和经济价值，因此选育高产菌株具有重要意义。

2、传统菌株选育方法主要包括自然分离、理化诱变和原生质融合等技术。然而，这些方法普遍存在筛选通量低、检测周期长、结果误差大等缺陷。特别是常规采用的琼脂扩散法，虽然基于nisin的抑菌特性建立，但依赖指示菌（如藤黄微球菌）的抑菌圈测定，不仅操作繁琐、耗时长达18-24h，且难以实现精准定量检测，严重制约了高产菌株的筛选效率。

3、随着高通量筛选技术的发展，以多孔板为载体的自动化筛选系统为微生物育种提供了新思路。现有技术如专利cn109810972a虽然尝试将高通量技术与传统育种相结合，但其采用的比浊法仍属于间接检测，通过指示菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株高产nisin菌株，其特征在于，所述菌株为乳酸乳球菌SD-06，于2025年07月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.35340，分类命名为乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），该菌株的nisin产量≥22400IU/mL。

2.一种权利要求1所述高产nisin菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的高产nisin菌株的高通量筛选方法，其特征在于，所述步骤S2中种子培养基包含：大豆蛋白胨3-8g/L、牛...

【技术特征摘要】

1.一株高产nisin菌株，其特征在于，所述菌株为乳酸乳球菌sd-06，于2025年07月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为cgmcc no.35340，分类命名为乳酸乳球菌（lactococcus lactis），该菌株的nisin产量≥22400iu/ml。

2.一种权利要求1所述高产nisin菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的高产nisin菌株的高通量筛选方法，其特征在于，所述步骤s2中种子培养基包含：大豆蛋白胨3-8g/l、牛肉膏3-8g/l、胰蛋白胨3-8g/l、酵母提取物1.5-3.5g/l、抗坏血酸0.2-0.7g/l、mgso4·7h2o 0.15-0.25g/l、β-甘油磷酸二钠17-21g/l及葡萄糖0.3-0.7% (w/v)；

4.根据权利要求2所述的高产nisin菌株的高通量筛选方法，其特征在于，所述步骤s3中酸化处理为向发酵液中加入5-7m盐酸调节ph至2.0-3.0；离心参数为：温度0-10℃，转速2000-4000rpm，时间5-15min；过滤采用0.22...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢潇，司洋，李园成，刘倩莉，陈逸楚，缪红艳，叶鑫业，钱文乐，李春华，张晔，陈少杰，许志刚，朱勇刚，
申请(专利权)人：通辽市圣达生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：