一种DNA合成纠错体系及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种在DNA合成过程中可以高效纠错的纠错体系，所述体系包括CELI酶和T7核酸内切酶I构建的混合酶体系，特异性识别并切割DNA合成过程中产生的全部错配类型，并在纠错体系中加入3％‑5％的PEG6000，显著提高切割效果。所述纠错体系能够高效地特异性识别并切割DNA合成过程中可能产生的错配类型，克服剪切酶的切割偏好性，提高DNA合成中的正确片段获得率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种dna合成纠错体系及应用

技术介绍

1、dna设计合成是推动生命科学及其相关领域发展的关键共性底层技术。常规的遗传操作技术仅能对已有的dna序列进行有限的改造，而dna合成技术则可从头“书写”生命信息，从另一高度提升我们对生命体理解、预测和操控的能力。dna的合成与组装过程都不可避免地引入错误，基于错配结合或错配切除的纠错技术在dna合成过程不同阶段的应用，不仅能提高dna合成的准确性，还可有效降低长片段dna合成的质控成本。

2、寡核苷酸合成与酶促组装过程都不可避免地产生多种类型的错误。常见的错误包括核苷酸的插入、缺失和取代。纠错技术的使用可有效地去除不同类型的错误从而提高合成产物的正确率。经互补配对后的双链dna片段的核苷酸插入、缺失、取代错误主要表现为错配和凸起等，这些错误的去除更多是借助基于生物体内的dna修复体系开发出的dna酶促纠错技术。通过对互补序列退火，暴露出错配信号，再利用具有错配结合或错配切割活性的酶对dna双链纠错，从而富集正确序列。

3、错配切割酶是识别dna双链错配位点并在错本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种DNA合成纠错体系，其特征在于，所述纠错体系包括缓冲试剂和混合酶体系，对DNA合成过程中产生的所有错配类型进行高效纠错。

2.根据权利要求1所述的纠错体系，所述混合酶体系包括CELI内切酶、T5核酸内切酶I、T4核酸内切酶VII或T7核酸内切酶I中的两种或两种以上，优选的，包括CELI酶和T7核酸内切酶I。

3.根据权利要求1或2所述的纠错体系，所述混合酶体系按照物质的量计，包括60％-70％的CELI酶和30％-40％T7核酸内切酶。

4.根据权利要求1或2所述的纠错体系，所述缓冲试剂包括缓冲液和稳定剂。

5.根据权利要求1或2所...

【技术特征摘要】

1.一种dna合成纠错体系，其特征在于，所述纠错体系包括缓冲试剂和混合酶体系，对dna合成过程中产生的所有错配类型进行高效纠错。

2.根据权利要求1所述的纠错体系，所述混合酶体系包括celi内切酶、t5核酸内切酶i、t4核酸内切酶vii或t7核酸内切酶i中的两种或两种以上，优选的，包括celi酶和t7核酸内切酶i。

3.根据权利要求1或2所述的纠错体系，所述混合酶体系按照物质的量计，包括60％-70％的celi酶和30％-40％t7核酸内切酶。

4.根据权利要求1或2所述的纠错体系，所述缓冲试剂包括缓冲液和稳定剂。

5.根据权利要求1或2所述的纠错体系，所述缓冲...

【专利技术属性】
技术研发人员：王瑞超，梁加龙，曾程，蔡万世，
申请(专利权)人：北京艾吉科技有限公司，
类型：发明
国别省市：