【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞共培养,具体涉及一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基及共培养方法。
技术介绍
1、神经干细胞作为具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,在神经退行性疾病治疗、神经损伤修复及药物筛选等领域具有重要应用价值。其功能高度依赖于与中枢神经系统微环境中其他细胞(尤其是小胶质细胞)的动态互作。小胶质细胞作为中枢神经系统的主要免疫细胞,可通过分泌细胞因子、神经营养因子及直接接触,对神经干细胞的存活及维持产生关键调控作用。因此,建立一个能够模拟生理微环境并支持两者协同作用的共培养体系,对神经再生研究、疾病建模及药物开发至关重要(schafer st等人,2023 cell186.10,2111-2126)。
2、目前,神经干细胞与小胶质细胞的共培养仍存在挑战,其中培养基兼容性与稳定性不足亟待解决。由于两类细胞对培养基成分需求存在显著差异,例如,神经干细胞需要特定的生长因子(表皮生长因子-[epidermal growth factor, egf]、成纤维细胞生长因子-[basic fibroblast growth fa
...【技术保护点】
1.一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,包括基础培养基、双模式脂质体以及以下终浓度的组分:
2.根据权利要求1所述的神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,基础培养基为DMEM/F12培养基。
3.根据权利要求1或2所述的神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,共培养培养基中不含维生素A的B-27无血清添加剂的终浓度为1.5~2%、GlutaMAX添加剂的终浓度为0.5~1%、N-乙酰半胱氨酸的终浓度为0.5~1 mM、抗坏血酸-2-磷酸盐的终浓度为90~100 μM。
4.根据权利要求3所述的神经干
...【技术特征摘要】
1.一种神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,包括基础培养基、双模式脂质体以及以下终浓度的组分:
2.根据权利要求1所述的神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,基础培养基为dmem/f12培养基。
3.根据权利要求1或2所述的神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,共培养培养基中不含维生素a的b-27无血清添加剂的终浓度为1.5~2%、glutamax添加剂的终浓度为0.5~1%、n-乙酰半胱氨酸的终浓度为0.5~1 mm、抗坏血酸-2-磷酸盐的终浓度为90~100 μm。
4.根据权利要求3所述的神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基,其特征在于,共培养培养基中使用的egf脂质体和bfgf脂质体以生长因子用量计,两者终浓度均为18~20 ng/ml。
5.根据权利要求3所述的神经干细胞与小胶质细胞共培养培养基...
【专利技术属性】
技术研发人员:王文佳,高谋,陈鹏宇,王文硕,陈昱周,周玉会,
申请(专利权)人:中国人民解放军总医院海南医院,
类型:发明
国别省市:
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