一种棉花遗传转化方法技术

本发明专利技术提供了一种棉花遗传转化方法，从浸泡后的棉花成熟种子中剥取的去除一片子叶暴露出的下胚轴组织为遗传转化受体，在超声波处理条件下，用含有目的DNA的重组根癌农杆菌侵染所述遗传转化受体，得到侵染后的外植体；然后在开放环境下，培养所述侵染后的外植体，得到棉花遗传转化植株。本发明专利技术具有操作简单，生长周期短，重复性好，受体基因型限制小，转化方式统一简便，转化效率高，获得的棉花遗传转化植株遗传稳定性好等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物遗传转化、生物技术、植物基因工程领域，具体地，涉及一种棉花遗传转化方法，尤其涉及一种无菌条件和开放环境下培养(无需传统的组织培养过程)相结合的棉花遗传转化方法。

技术介绍

1、棉花是世界上最重要的天然纤维来源和经济作物之一，是仅次于粮食的第二大农作物，全球70％的纺织原料依赖棉花，其产业链涵盖种植、加工、纺织、服装等环节，直接关联数亿农民和纺织业就业。

2、目前常规的植物遗传转化方法是通过基因枪轰击和农杆菌浸染后通过组织培养途径获得转基因植株，然而在数十万种高等植物中，仅有远远不到0.1％的物种能够用现有的技术进行遗传转化。且植物遗传转化技术存在强烈的基因型依赖性，即使是同一个物种，不同品种之间的遗传转化难度差异很大。棉花是世界公认的较难再生的作物之一，且遗传转化长期面临效率低、基因型依赖性强等技术瓶颈。目前常规的棉花遗传转化方法是通过体细胞胚为外植体，基因枪轰击和农杆菌浸染后通过组织培养途径获得转基因植株，这一过程通常需要10-11个月左右，受到包括植物基因型、培养条件、愈伤分化效率、体细胞胚畸形和再生苗数量等诸多因素的限制本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种棉花遗传转化方法，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(ii)中选取棉花种子的下胚轴外植体作为遗传转化受体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(iii)中的所述侵染在超声波处理的条件下进行；优选的，所述超声波条件为30KHz-50KHz超声40s-100s。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在超声波处理后，还包括以80rpm-120rpm的速度震动处理30min-60min的步骤。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述农杆菌为根癌农杆菌EHA105、GV3101...

【技术特征摘要】

1.一种棉花遗传转化方法，所述方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(ii)中选取棉花种子的下胚轴外植体作为遗传转化受体。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(iii)中的所述侵染在超声波处理的条件下进行；优选的，所述超声波条件为30khz-50khz超声40s-100s。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在超声波处理后，还包括以80rpm-120rpm的速度震动处理30min-60min的步骤。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述农杆菌为根癌农杆菌eha105、gv3101或agl1...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭军，朱健康，杨璐，李明，栗战帅，何杰，李金珠，张鑫洁，王媛，王浩宇，刘袁媛，朱婼楠，
申请(专利权)人：三亚中国农业科学院国家南繁研究院，
类型：发明
国别省市：