免疫疗法中细胞因子释放综合征的减轻制造技术

本发明专利技术公开了一种重组核酸分子，该重组核酸分子至少由ORF(100,100a,100b)编码以在免疫疗法期间降低细胞因子风暴。该重组核酸分子包含至少一个发夹环结构和第一启动子(120)。该发夹环结构在免疫疗法期间调节粒细胞单核细胞集落刺激因子(GMCSF)细胞因子的量。该发夹环结构由一个或多个短发夹RNA(130)序列形成。该第一启动子(120)设置在该至少一个发夹环结构的上游。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本公开涉及一种经人工修饰的免疫效应细胞，用以减少细胞因子释放综合征。更具体地，本公开涉及一种经人工修饰的免疫效应细胞，该经人工修饰的免疫效应细胞降低在癌症免疫疗法期间释放的粒细胞单核细胞集落刺激因子(gmcsf)的水平。

技术介绍

1、癌症是一种异常细胞不受控制地分裂并破坏身体组织的疾病。优选地，人体的天然免疫细胞会根据肿瘤部位是否存在免疫细胞，分别将进展期肿瘤识别为“热肿瘤”或“冷肿瘤”。在热肿瘤的情况下，尽管免疫细胞(包括细胞毒性t淋巴细胞或t细胞)在肿瘤部位大量存在，但由于肿瘤微环境产生的抑制信号，这些免疫细胞并不活跃。而在冷肿瘤的情况下，受到抑制的是t细胞的趋化信号传导。

2、为了使免疫细胞能够主动靶向癌细胞，已经引入了基于嵌合抗原受体(car)t细胞的免疫疗法。基于car t细胞的免疫疗法是一种过继细胞疗法(act)，在该疗法中，免疫细胞经工程化(遗传操作)以特异性靶向和杀死癌细胞。换句话说，car t细胞的car构建体经设计成靶向特异性肿瘤相关抗原(taa)。

3、常规的基于car t细胞的疗法靶向仅对b细胞恶性肿瘤有效本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组核酸分子，所述重组核酸分子至少由ORF(100,100a,100b)编码以在免疫疗法期间降低细胞因子风暴，所述重组核酸分子包含：

2.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，短发夹RNA(130)由SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.24中的至少一者或与其具有至少95％同一性的核苷酸序列编码。

3.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，所述第一启动子120包含以下各项中的至少一者：由SEQ ID NO.2编码的全长巨细胞病毒(CMV)启动子、由SEQ ID NO.3编码的减毒CMV启动子、由SEQ ID NO.4编码的人UG(hU...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种重组核酸分子，所述重组核酸分子至少由orf(100,100a,100b)编码以在免疫疗法期间降低细胞因子风暴，所述重组核酸分子包含：

2.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，短发夹rna(130)由seq id no.5-seq id no.24中的至少一者或与其具有至少95％同一性的核苷酸序列编码。

3.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，所述第一启动子120包含以下各项中的至少一者：由seq id no.2编码的全长巨细胞病毒(cmv)启动子、由seq id no.3编码的减毒cmv启动子、由seq id no.4编码的人ug(hu6)启动子、小鼠u6(mu6)启动子、鸡7sk(ch7sk)启动子、hl启动子和snord启动子。

4.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，由seq id no.25编码的至少一个微小rna30(130a)序列形成所述至少一个发夹环结构的环部。

5.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，多聚a尾(160)序列设置在所述发夹环结构的下游。

6.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，所述重组核酸分子包含设置在第二启动子(140)的下游的一个或多个嵌合抗原受体基因(150)。

7.根据权利要求1所述的重组核酸分子，其特征在于，从所述重组核酸分子转录的所述发夹环结构的信使rna被配置为与细胞因子的信使rna结合。

8.一种重组核酸分子，所述重组核酸分子至少由orf(100)编码以在免疫疗法期间降低细胞因子风暴，所述重组核酸分子包含：

9.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，短发夹rna(130)由seq id no.5-seq id no.24中的至少一者或与其具有至少95％同一性的核苷酸序列编码。

10.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述第一启动子120包含以下各项中的至少一者：由seq id no.2编码的全长巨细胞病毒(cmv)启动子、由seq id no.3编码的减毒cmv启动子、由seq id no.4编码的人ug(hu6)启动子、小鼠u6(mu6)启动子、鸡7sk(ch7sk)启动子、hl启动子和snord启动子。

11.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述微小rna30(130a)序列位于所述短发夹rna(130)序列的两侧。

12.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述至少一个微小rna30(130a)序列由seq id no.25编码。

13.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个单链可变片段结构域(210)对以下各项中的至少一者具有结合亲和力：分化簇19(cd19)、分化簇7(cd7)、分化簇20(cd20)、分化簇22(cd22)、分化簇123(cd123)、分化簇133(cd133)、分化簇30(cd30)、分化簇138(cd138)、表皮生长因子受体(egfr)、表皮生长因子受体变体iii(egfrviii)、成纤维细胞激活蛋白α(fap)、粘蛋白1(muc1)、二唾液酸神经节苷脂gd2(gd2)、癌胚抗原(cea)、前列腺特异性膜抗原(psma)、人表皮生长因子受体2(her2)、纽约食管鳞状细胞癌-1(ny-eso-1)、黑色素瘤相关抗原3(magea-a3)和人端粒酶逆转录酶(htert)。

14.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，用于分化簇19(cd19)的所述单链可变片段结构域(210)由seq id no.29和seq id no.31中的至少一者编码。

15.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个铰链结构域(220)至少部分地包含由seq id no.33编码的分化簇8(cd8)。

16.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个共刺激结构域(240)包含以下各项中的至少一者：由seq id no.37编码的分化簇28(cd28)、由seq idno.39编码的诱导型t细胞共刺激分子(icos)、由seq id no.41编码的ox40、由seq idno.43编码的4-1bb、由seq id no.45编码的dap10、由seq id no.47编码的dap12和由seqid no.49编码的2b4。

17.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个信号传导结构域(250)至少部分地包含由seq id no.51编码的分化簇3ζ(cd3ζ)。

18.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个安全开关结构域(260)包含由seq id no.53编码的诱导型胱天蛋白酶9(icaspase 9)、截短的表皮生长因子受体(egfrt)和由seq id no.55编码的rqr8中的至少一者。

19.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个跨膜结构域230至少部分地包含由seq id no.35编码的分化簇8(cd8)。

20.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述第二启动子(140)是由seqid no.27编码的延伸因子1(ef1)全长启动子、由seq id no.28编码的ef1α核心启动子中的至少一者。

21.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述第一启动子(120)和所述第二启动子(140)被配置为与真核rna聚合酶ii(pol ii)和真核rna聚合酶iii(pol iii)中的至少一者结合。

22.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个长末端重复序列(110)由seq id no.1编码。

23.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个共刺激结构域(240)包含：

24.根据权利要求8所述的重组核酸分子，其特征在于，从所述重组核酸分子转录的所述发夹环结构的信使rna被配置为与细胞因子的信使rna结合。

25.一种重组核酸分子，所述重组核酸分子至少由orf(100a)编码以在免疫疗法期间降低细胞因子风暴，所述重组核酸分子包含：

26.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，短发夹rna(130)由seq idno.5-seq id no.24中的至少一者或与其具有至少95％同一性的核苷酸序列编码。

27.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述第一启动子120包含以下各项中的至少一者：由seq id no.2编码的全长巨细胞病毒(cmv)启动子、由seq id no.3编码的减毒cmv启动子、由seq id no.4编码的人ug(hu6)启动子、小鼠u6(mu6)启动子、鸡7sk(ch7sk)启动子、hl启动子和snord启动子。

28.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述微小rna30(130a)序列位于所述短发夹rna(130)序列的两侧。

29.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述至少一个微小rna30(130a)序列由seq id no.25编码。

30.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述多聚a尾(160)序列来自由seq id no.26编码的猿猴病毒40(sv40)或牛生长激素β球蛋白(bgh)。

31.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个单链可变片段结构域(210)对以下各项中的至少一者具有结合亲和力：分化簇19(cd19)、分化簇7(cd7)、分化簇20(cd20)、分化簇22(cd22)、分化簇123(cd123)、分化簇133(cd133)、分化簇30(cd30)、分化簇138(cd138)、表皮生长因子受体(egfr)、表皮生长因子受体变体iii(egfrviii)、成纤维细胞激活蛋白α(fap)、粘蛋白1(muc1)、二唾液酸神经节苷脂gd2(gd2)、癌胚抗原(cea)、前列腺特异性膜抗原(psma)、人表皮生长因子受体2(her2)、纽约食管鳞状细胞癌-1(ny-eso-1)、黑色素瘤相关抗原3(magea-a3)和人端粒酶逆转录酶(htert)。

32.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，用于分化簇19(cd19)的所述单链可变片段结构域(210)由seq id no.29和seq id no.31中的至少一者编码。

33.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个铰链结构域(220)至少部分地包含由seq id no.33编码的分化簇8(cd8)。

34.根据权利要求25所述的重组核酸分子，其特征在于，所述一个或多个共刺激结构域...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿曼·安朱姆·比拉基亚，尼莱·莫汉拉尔·拉德，达瓦尔·阿什温拜·凯达里亚，乌尔维·赫里希拉吉·潘瓦尔，乔蒂莫伊·艾奇，吉滕德拉·德文德拉·维亚斯，阿蕾吉·阿赫塔尔，
申请(专利权)人：微克立思尔私人有限公司，
类型：发明
国别省市：