【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物细胞,具体涉及一种基于crispr/cas9技术构建mir-155基因缺失的df-1细胞系。
技术介绍
1、crispr/cas9系统是来源于细菌和古细菌的一种天然适应性免疫防御机制,以其高效率和准确性著称,该系统通过grna识别并引导cas9核酸酶精确地在基因组特定位点进行切割,产生双链断裂,诱导dna同源重组或非同源末端修复机制,从而实现靶基因位点的删除、替换或插入。近年来广泛应用于动物基因编辑中,crispr/cas9可以靶向几乎任何基因,这为基因功能研究提供了极大的便利。
2、mir-155基因是鸡基因组中一种重要的微小rna(mirna),在免疫调节、病毒防御及肿瘤发生中发挥关键作用。研究表明,mir-155基因通过调控靶基因(如socs1、pi3k/akt通路)影响宿主抗病毒反应,然而,目前对其分子机制的解析仍不充分,主要原因在于缺乏高效的基因敲除工具及稳定的细胞模型。
技术实现思路
1、针对上述情况,为克服现有技术之缺陷,本专利技术之目的就是提供
...【技术保护点】
1.一种可打靶DF-1细胞系中miR-155基因的CRISPR/Cas9敲除载体,其特征在于,所述可打靶DF-1细胞系中miR-155基因的CRISPR/Cas9敲除载体包含pX459-gRNA重组质粒;
2.根据权利要求1所述的CRISPR/Cas9敲除载体,其特征在于,所述筛选的gRNA核苷酸序列为SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.4至少一项所示。
3.根据权利要求2所述的CRISPR/Cas9敲除载体,其特征在于,所述CRISPR/Cas9敲除载体由pX459-gRNA1重组质粒和pX459-gRNA4重组质粒组合而成;
...【技术特征摘要】
1.一种可打靶df-1细胞系中mir-155基因的crispr/cas9敲除载体,其特征在于,所述可打靶df-1细胞系中mir-155基因的crispr/cas9敲除载体包含px459-grna重组质粒;
2.根据权利要求1所述的crispr/cas9敲除载体,其特征在于,所述筛选的grna核苷酸序列为seq id no.1-seq id no.4至少一项所示。
3.根据权利要求2所述的crispr/cas9敲除载体,其特征在于,所述crispr/cas9敲除载体由px459-grna1重组质粒和px459-grna4重组质粒组合而成;
4.根据权利要求3所述的crispr/cas9敲除载体,其特征在于,所述crispr/cas9敲除载体由px459-grna1重组质粒...
【专利技术属性】
技术研发人员:成子强,文静,周德方,周静,张心悦,王卓媛,许婉晴,郎枫,杨亮宇,李秋林,
申请(专利权)人:山东农业大学,
类型:发明
国别省市:
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