一种检测人细胞端粒酶亚基TERT转录本全长mRNA的方法及试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种检测人细胞端粒酶亚基TERT转录本全长mRNA的方法及试剂盒，属于生物技术领域。本发明专利技术提供了一种检测人细胞端粒酶亚基TERT转录本全长mRNA的方法，采用特异性反转录引物TERT rt1进行反转录得到cDNA，如果所述cDNA中能够检测到端粒酶亚基TERT的第6号外显子和第7号外显子，则判定待测样本中含有人细胞端粒酶亚基TERT转录本全长mRNA。本发明专利技术方法可区分TERT mRNA的全长mRNA以及其他的剪切异构体mRNA，为更加便捷、精准地间接评估细胞内端粒酶活性提供了新的技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种检测人细胞端粒酶亚基tert转录本全长mrna的方法及试剂盒。

技术介绍

1、端粒酶是一种由rna模板（terc）和催化亚基（tert）组成的核糖核蛋白复合物，其活性与细胞永生化及癌症发生密切相关。tert的表达是端粒酶活性的主要限速因素，因此检测tert mrna的表达水平是评估端粒酶活性的重要手段。

2、目前检测端粒酶活性的方法主要有两种，一种是trap法，通过提取细胞中的端粒酶，在体外进行端粒序列进行延伸，再通过电泳或者qpcr的方法来确定端粒序列的延伸效率并以此判断细胞端粒酶的活性，这是检测端粒酶活性强弱的最直接且最准确的方法，但是其缺点也很明显，就是提取过程十分繁琐，端粒酶易受各种因素影响而失活，操作时间较长，技术要求较高，对于没有经验的人很难提取到有活性的端粒酶；第二种方法是通过pcr或者qpcr检测端粒酶的亚基——端粒酶催化亚基tert的mrna表达水平来间接确定端粒酶的活性，往往高表达量的tert mrna意味着细胞内的端粒酶具有很高的活性，这在许多研究报道中已经被证实，也有很多基于此种方法开发出本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测人细胞端粒酶亚基TERT转录本全长mRNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述反转录引物TERT rt1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

3.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述第6号外显子和第7号外显子检测用引物探针包括核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的上游引物TERT6-7 F、核苷酸序列如SEQ IDNO:3所示的下游引物TERT6-7 R和核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的探针TERT6-7 P。

4.一种检测人细胞端粒酶亚基TERT转录本全长mRNA的表达水...

【技术特征摘要】

1.一种检测人细胞端粒酶亚基tert转录本全长mrna的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述反转录引物tert rt1的核苷酸序列如seq id no:1所示。

3.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述第6号外显子和第7号外显子检测用引物探针包括核苷酸序列如seq id no:2所示的上游引物tert6-7 f、核苷酸序列如seq idno:3所示的下游引物tert6-7 r和核苷酸序列如seq id no:4所示的探针tert6-7 p。

4.一种检测人细胞端粒酶亚基tert转录本全长mrna的表达水平的方法，其特征在于，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，所述人细胞端粒酶亚基tert转录...

【专利技术属性】
技术研发人员：代红圆，冯滨，丁文鹏，段仁和，郑义，
申请(专利权)人：深圳市库源生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：