一种基于RAA-LFD检测鸡球虫卵囊的引物探针组合物及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种基于RAA‑LFD检测鸡球虫卵囊的引物探针组合物及其应用。本发明专利技术根据鸡球虫18S rRNA基因的特异性序列设计特异性引物和探针，可以定性检测鸡粪便样品中的鸡球虫18S rRNA基因。首先通过RAA方法对目的基因进行等温扩增，再结合侧流层析试纸条，最终实现对扩增产物进行可视化分析的一种技术，能够达到快速检测的目的。该方法具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性好以及反应结果可视化等优点，适用于临床样本及实验室的快速诊断，在鸡球虫病的防控中具有较好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于动物疫病分子诊断，具体涉及一种基于重组酶介导的等温扩增(raa)与横向流动层析试纸条(lfd)联用的鸡球虫粪便卵囊可视化检测试纸条及应用。

技术介绍

1、鸡球虫病是由艾美耳属一种或者多种球虫寄生于肠道上皮细胞，从而引发的一种严重威胁鸡肠道健康的寄生虫疾病，是严重危害养鸡业发展的重要疫病之一。其公认的病原体有7种，分别为柔嫩艾美耳球虫(e.tenella)、毒害艾美耳球虫(e.necatrix)、巨型艾美耳球虫(e.maxima)、堆型艾美耳球虫(e.acervulina)、和缓艾美耳球虫(e.mitis)、早熟艾美耳球虫(e.praecox)和布氏艾美耳球虫(e.brunetti)。鸡球虫病呈全球性分布，每年在全球范围内造成的经济损失超过100亿英镑。在美国，鸡球虫病连续7年(2016至2022年)位列影响肉鸡养殖业发展重要疫病的首位。在英国，鸡球虫病也位列对养禽业造成经济损失最为严重禽类疫病的前三位。

2、鸡球虫的快速检测是及时防治疾病，减少经济损失的重要手段。当前鸡球虫病的临床诊断主要是传统粪便学检查。传统粪便学检查的可行性强本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于RAA-LFD检测鸡球虫或其卵囊的引物探针组合物，其特征在于，上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示，探针序列为FA M-TAGGGTATTGGCCTACCGTGGCAGTGACGG[THF]TAACGGGGAATTAGG-C3，其中，下游引物在其5’端标记Biotin生物素；探针的5’标记FAM荧光素，+31位点标记THF残基，3’端添加封闭基团C3。

2.权利要求1所述的引物探针组合物在制备RAA-LFD检测鸡球虫的试剂中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，权利要求1所述的引物探针组合物在制备RA...

【技术特征摘要】

1.一种用于raa-lfd检测鸡球虫或其卵囊的引物探针组合物，其特征在于，上游引物如seq id no.1所示，下游引物如seq id no.2所示，探针序列为fa m-tagggtattggcctaccgtggcagtgacgg[thf]taacggggaattagg-c3，其中，下游引物在其5’端标记biotin生物素；探针的5’标记fam荧光素，+31位点标记thf残基，3’端添加封闭基团c3。

2.权利要求1所述的引物探针组合物在制备raa-lfd检测鸡球虫的试剂中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，权利要求1所述的引物探针组合物在制备raa...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋小凯，张莹，李祥瑞，徐立新，陆明敏，严若峰，陈晨，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：