一种毛囊干细胞的分离提取方法技术

技术编号:46418084 阅读:10 留言:0更新日期:2025-09-19 20:28
本发明专利技术涉及毛囊干细胞相关技术领域,尤其涉及一种毛囊干细胞的分离提取方法,通过酶解可温和解离毛囊组织,直接获得高活性单细胞悬液,细胞存活率达90%以上,显著优于机械剥离法,并精准控制酶浓度与时间,缩短消化时间并减少细胞损伤,同时维持细胞活性;采用两步酶法保留干细胞完整性;简化操作流程,进而实现高效制备;规范化预处理与操作规范,配合设备定向维护,减少污染;优化后流程将细胞得率提高35%‑50%,培养周期缩短至7天内,污染率降至5%以下。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及毛囊干细胞相关,尤其是涉及一种毛囊干细胞的分离提取方法


技术介绍

1、毛囊干细胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一种。毛囊干细胞属于成体干细胞,在体内处于静止状态,在体外培养作用下表现出惊人的增殖能力。研究发现,毛囊干细胞具有多向分化潜能,它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺,参与皮肤创伤愈合的过程。

2、毛发的生理周期分为生长期、退行期和休止期三个阶段。目前治疗脱发的方法多采用药物或物理刺激方式激活毛囊干细胞,刺激毛发生长,改善脱发或斑秃。但治疗往往具有难度且治疗效果缓慢,患者也可能对目前可用的治疗方式产生抗药性。毛囊干细胞在再生医学、组织修复领域及治疗脱发中具有较高的使用价值和广泛的前景。目前,在治疗脱发方面,已有不少成功的案例。而在对毛囊干细胞进行研究前,需要先对毛囊干细胞进行分离提取操作。

3、目前,常规的毛囊干细胞分离提取方法有酶消化分离法和机械离心分离法等等,其中在使用酶消化分离法对毛囊干细胞进行分离处理时,存在细胞得率较低、培养周期长和污染率高的问题。


技术实现思路

...

【技术保护点】

1.一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述S3中Dispase II处理阶段引入ROCK抑制剂。

3.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述S6中采用“两步酶法”:先用中性蛋白酶分离表皮层,再以低浓度胰酶靶向消化毛囊隆突部。

4.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述S8中采用离心切割装置替代人工吹打,通过程序化控制转速与刀网密度。

5.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述s3中dispase ii处理阶段引入rock抑制剂。

3.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述s6中采用“两步酶法”:先用中性蛋白酶分离表皮层,再以低浓度胰酶靶向消化毛囊隆突部。

4.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述s8中采用离心切割装置替代人工吹打,通过程序化控制转速与刀网密度。

5.根据权利要求1所述的一种毛囊干细胞的分离提取方法,其特征在于,所述s11中使用减血清培养基,或添加小分子化合物维持干细胞干性。

6.根据权利要求1所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员:江鹤张勇邹兴臣
申请(专利权)人:秦皇岛北戴河区山丘细胞医疗有限公司
类型:发明
国别省市:

相关技术
    暂无相关专利
网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1