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AAV衣壳蛋白变体、重组腺相关病毒颗粒及其应用制造技术

技术编号:46414986 阅读:4 留言:0更新日期:2025-09-16 20:03
本发明专利技术属于基因工程和病毒载体技术领域,具体涉及一种能够特异性感染小鼠睾丸支持细胞的重组腺相关病毒(AAV)载体,该病毒在AAV8的第590位氨基酸位点插入多肽序列DGCRPPR。与野生型AAV8载体相比,该突变体对于睾丸支持细胞具有更强的特异性,生精小管注射后对于睾丸中支持细胞的感染能力更强且特异性更好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程,具体涉及aav衣壳蛋白变体、重组腺相关病毒颗粒及其应用。


技术介绍

1、睾丸支持细胞是维持男性生殖功能的核心细胞,参与睾丸血睾屏障(btb)的构建与调控。支持细胞通过紧密连接形成的btb,既可以隔离生精小管内的精子发生微环境,保护生殖细胞免受免疫攻击和毒素损伤,还可以限制免疫细胞浸润,防止自身免疫反应攻击精子。此外,支持细胞还可以分泌多种营养物质(如乳酸)、调控激素信号(如fsh)和清除凋亡的生殖细胞残体。这对精子发生的支持与调控具有重要的作用。然而,支持细胞的功能异常会导致男性不育、精子发生障碍及睾丸相关疾病(如纤维化)。因此,针对支持细胞的基因调控工具开发是研究其功能机制及治疗相关疾病的关键。

2、腺相关病毒(aav)是在人类及其他哺乳动物中发现的一种微小型病毒,包含一个直径约26 nm的二十面体衣壳和一个4.7 kb的单链dna基因组。重组腺相关病毒(raav)源于非致病的野生型腺相关病毒,由于其安全性好、对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染性、免疫原性低、在体内表达外源基因时间长等特点,被视为最有前途的基因转移载体之本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种AAV衣壳蛋白变体,其特征在于,所述AAV衣壳蛋白变体的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

2.根据权利要求1所述的AAV衣壳蛋白变体,其特征在于,所述AAV衣壳蛋白变体为在野生型AAV衣壳蛋白的VP1可变区Ⅷ的第590位氨基酸后插入SEQ ID NO:2所示的多肽序列得到。

3.一种AAV8病毒载体,其特征在于,所述AAV8病毒载体的AAV衣壳蛋白为权利要求1-2任一所述的AAV衣壳蛋白变体。

4.一种权利要求3所述的AAV病毒8载体的制备方法,其特征在于,所述方法包括:

5.一种重组腺相关病毒颗粒,其特征在于,包括权利要求1...

【技术特征摘要】

1.一种aav衣壳蛋白变体,其特征在于,所述aav衣壳蛋白变体的氨基酸序列如seq idno:1所示。

2.根据权利要求1所述的aav衣壳蛋白变体,其特征在于,所述aav衣壳蛋白变体为在野生型aav衣壳蛋白的vp1可变区ⅷ的第590位氨基酸后插入seq id no:2所示的多肽序列得到。

3.一种aav8病毒载体,其特征在于,所述aav8病毒载体的aav衣壳蛋白为权利要求1-2任一所述的aav衣壳蛋白变体。

4.一种权利要求3所述的aav病毒8载体的制备方法,其特征在于,所述方法包括:

5.一种重组腺相关病毒颗粒,其特征在于,包括权利要求1~2任一项所述的aav衣壳蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗孟成雷耀轲
申请(专利权)人:武汉大学
类型:发明
国别省市:

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